Human & Animal gal van lege biologische matrix voor bioanalytische methode Ontwikkeling en validatie van bioanalytische methode

1 iPhase -producten

2 lege biomatrix

Verschillende soorten vanbiologische matrices, inclusief blanco volbloed, serum, plasma, gal, melk, urine, ontlasting, darminhoud, visceraal orgaan, glasvochthumor, waterige humor, cerebrospinale vloeistof, enz., Verzameld bij gezonde proefpersonen of gezonde experimentele dieren, worden gezamenlijk aangeduid als lege biologische matrices.

3 De noodzaak om lege biologische matrices in preklinische studies te gebruiken

In Preklinisch onderzoek van het medicijn, lege biologische matrix is ​​de hoeksteen voor het opzetten en validerenBiologische analysemethoden. Door lege matrices van gezonde proefpersonen of experimentele dieren te gebruiken, kunnen onderzoekers kalibratienormen en monsters van kwaliteitscontrole nauwkeurig voorbereiden, de specificiteit, gevoeligheid, precisie en matrixeffecten van analytische methoden evalueren en de betrouwbaarheid van de kwantificatieresultaten van geneesmiddelenconcentratie waarborgen.

4 Biologische methode Validatie en vestiging en toepassing van lege biologische matrix

Zoals vereist door FDA/EMA -richtlijnen, moeten in de oprichting en validatie van biologische matrixanalysemethoden blanco biologische matrices worden gebruikt om de nauwkeurigheid en betrouwbaarheid van de analysemethode te waarborgen. Vooral in LC - MS/MS -analyse kunnen verschillen in matrixcomponenten uit verschillende bronnen de ionisatie -efficiëntie aanzienlijk beïnvloeden. Blanke matrix wordt voornamelijk gebruikt voor het bereiden van kalibratienormen, het bereiden van kwaliteitscontrolemonsters voor het onderzoeken van de specificiteit, selectiviteit, precisie, nauwkeurigheid, matrixeffecten, herstelsnelheid, stabiliteit, verdunningslineariteit, interferentie -effecten, enz. Van analytische methoden. Het selectiviteit en het matrixeffect van de detectiemethode vereisen hogere vereisten voor lege matrix.

5 Toepassingsscenario's van gal lege matrix in de ontwikkeling van geneesmiddelen

Kunstmatige galmatrix (gesimuleerde galmatrix)is een synthetische oplossing die natuurlijke galcomponenten simuleert en wordt gebruikt voor medicijnmetabolisme, toxicologie en biologisch analyseonderzoek.Gal lege matrixHeeft belangrijke toepassingswaarde in de volgende scenario's voor geneesmiddelenontwikkeling: farmacokinetische (PK) -studies van geneesmiddelen voor hepatobiliaire systeem, absorptie en eerste pass metabolisme -studies van orale geneesmiddelen, onderzoeksonderzoek van geneesmiddelen, hepatotoxiciteitsbeoordeling en galstasisstudies en ontwikkeling van biologische analysemethoden (LC - ms/ms).

6 Hepatobiliaire systeemgeneesmiddelen

Bij de ontwikkeling van geneesmiddelen voor het hepatobiliaire systeem speelt gal lege matrix een onvervangbare rol als een gestandaardiseerd in vitro simulatiesysteem in farmacokinetisch (PK), toxicologisch en biologisch analyseonderzoek.

6.1 Evalueer de galuitscheidingskarakteristieken van geneesmiddelen

Onderzoek naar hepatintestinale circulatie: gal is een van de belangrijke paden voor de uitscheiding van geneesmiddelen en hun metabolieten. Door gebruik te maken van kunstmatige galmatrix, kunnen de concentratieveranderingen van geneesmiddelen in gal worden gesimuleerd om te evalueren of ze worden opnieuw geabsorbeerd door de darmdarmcirculatie.

BEPLAATS BEPLAATSCHAPPRIJZEN: Voor geneesmiddelen die actief worden uitgescheiden door gal (zoals statines en bepaalde antibiotica), kan kunstmatige gal (gesimuleerde gal) helpen hun klaringefficiëntie te kwantificeren en het doseringsregime te optimaliseren.

6.2 Bestudeer het effect van galzuren op de absorptie van geneesmiddelen

Solubilisatie -effect: galzuren kunnen de oplossing en darmabsorptie van lipofiele geneesmiddelen zoals vitamine D. kunstmatige gal bevorderen, kunnen verschillende galzuursamenstellingen simuleren en hun impact op de biologische beschikbaarheid van geneesmiddelen evalueren.

Geneesmiddel galzuurinteracties: sommige geneesmiddelen (zoals liraglutide) kunnen concurreren met galzuurtransporters (zoals BSEP, MRP2) en kunstmatige gal kunnen worden gebruikt om dergelijke interacties te bestuderen om potentiële galstasisrisico's te voorkomen.

6.3 Risicobeoordeling van hepatotoxiciteit en cholestase

Door geneesmiddelen geïnduceerd cholestasis -model: kunstmatige gal kan pathologische aandoeningen zoals galwegen obstructie en hyperbilirubinemie simuleren en wordt gebruikt om te detecteren of geneesmiddelen interfereren met galstroom of beschadigde galwegencellen.

Biomarker -analyse: door het toevoegen van specifieke componenten zoals bilirubine, galzuren en inflammatoire factoren, kan de impact van geneesmiddelen op galcomponenten worden geëvalueerd en kan klinische veiligheid worden voorspeld.

6.4 Ethische en praktische voordelen van het vervangen van natuurlijke gal

Het aanpakken van de kwestie van steekproefschaarste: natuurlijke gal moet worden verkregen door invasieve methoden zoals galwegenkatheterisatie, terwijl kunstmatige gal oneindig kan worden voorbereid om ethische beperkingen te voorkomen.

Batch -consistentie: de samenstelling van de kunstmatige matrix (gesimuleerde matrix) is controleerbaar, waardoor de impact van individuele verschillen in natuurlijke gal op experimentele resultaten wordt verminderd.

6.5 Ondersteuning van de ontwikkeling van LC - MS/MS Biologische analysemethoden

Matrixeffectcorrectie: de complexe samenstelling van natuurlijke gal (hoge galzouten, fosfolipiden, pigmenten) kan gemakkelijk leiden tot ionenonderdrukking of verbetering in LC - MS/MS -analyse. Kunstmatige galmatrix (gesimuleerde galmatrix) kan een stabiele achtergrond bieden, de methode -gevoeligheid en nauwkeurigheid optimaliseren.

7 Cross -soortenonderzoek

De samenstelling van gal varieert sterk tussen verschillende dieren (ratten, honden, apen) en kunstmatige gal kan soortenverschillen standaardiseren en de vertaalbaarheid van preklinische gegevens verbeteren.

7.1 Cynomolgus Monkey gal (NHP gal)

De gal van Cynomolgus Monkey is zeer vergelijkbaar met die van mensen in termen van samenstelling (zoals galzuurprofiel) en geneesmiddelentransporterexpressie (zoals BSEP, MRP2), waardoor het het gouden standaard niet -- humaan primaatmodel is voor het evalueren van leverassuitexcretie en interacties tussen drugszuur.

7.2 Beagle hondengal

Het fosfolipidegehalte in beagle -gal is relatief hoog, waardoor het geschikt is voor het bestuderen van de galuitscheiding en galzoutafhankelijke absorptie van lipofiele geneesmiddelen. De verschillen in galzuursamenstelling tussen Beagle en mensen vereisen echter kalibratie door kunstmatige matrices.

7.3 SD -rattengalk

Het galinzamelingsvolume van SD -ratten is relatief groot (~ 1 ml/tijd), dat veel wordt gebruikt voor lever -darmcirculatie en hepatotoxiciteitsstudies voor geneesmiddelen. Er moet echter worden opgemerkt dat hun hoge bilirubine -basislijn kan interfereren met LC - MS/MS -analyse.

7.4 ICR/CD - 1 muisgal

CD - 1 muis heeft een klein galvolume (50 - 200 μ l), waardoor ze geschikt zijn voor het bestuderen van de mechanismen van genmodificatiemodellen (zoals de FXR/PXR -route), maar micro -kwantificatietechnieken zijn nodig voor aanpassing.

7.5 C57BL/6 muisgal

C57BL/6 -muis wordt vaak gebruikt in metabole ziektemodellen en veranderingen in hun gal samenstelling kunnen pathologische aandoeningen weerspiegelen, waardoor het gebruik van kunstmatige galmatrix nodig is om pathologie te simuleren.

De bovenstaande modellen moeten worden gecombineerd met kunstmatige galmatrix om soortenverschillen te regelen en de vergelijkbaarheid van de cross -soorten van LC - MS/MS -methoden te optimaliseren.

Conclusie

De kunstmatige galmatrix, als een belangrijk hulpmiddel voor het simuleren van de functie van natuurlijke gal, speelt een onvervangbare rol bij de ontwikkeling van hepatobiliaire geneesmiddelen. Door de gal samenstelling van verschillende soorten te standaardiseren (zoals Cynomolgus -apen, Beagle Dogs, SD -ratten, CD - 1 -ratten, C57BL/6 ratten), gaat kunstmatige galmatrix effectief de kernuitdagingen aan, zoals ethische beperkingen, individuele verschillen en pathologische toestand simulatie van natuurlijke steekproef, aanzienlijk de betrouwbaarheid van de betrouwbaarheid van het medicijnonderzoek.

Met de ontwikkeling van precisiegeneeskunde zal kunstmatige galmatrix pathologische specifieke componenten en microfluïdische technologie verder combineren om de micro -omgeving van de lever en galblaas dynamisch te simuleren, wat een sterkere ondersteuning biedt voor innovatieve geneesmiddelenontwikkeling.

Sleutelwoorden:Blanco biologische analyse, biologische matrixmonster, biomatrixanalyse, menselijke gal, diergal, galmonster, kunstmatige gal, gesimuleerde gal, NHP gal, cynomolgus apen gal, Rhesus Monkey gal, beagle hondengel, ratten gal, muis gal, LC - ms/ms, bioanalytical methode, bioanaly methode validatie, bioanaly methode

Referentie

Li T, Chiang JY. Galzuursignalering bij metabole ziekten en medicamenteuze therapie. Pharmacol Rev. 2014 oktober; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.