Uvod vJetrni mikrosomiin S9 frakcije
Na področju presnove zdravil in farmakokinetike je ključnega pomena razumevanje pretankosti jetrnih mikrosomov in Frakcij S9. Ti in vitro sistemi so ključnega pomena v zgodnjih fazah odkrivanja drog, kar omogoča vpogled v to, kako jetra presnavljajo nove kemične entitete (NCE). Sposobnost napovedovanja presnovne stabilnosti in potencialnih interakcij z zdravili je neprecenljiva, kar prihrani čas in vire pri razvoju novih farmacevtskih izdelkov. Ta članek se poglablja v razlike med jetrnimi mikrosomi in S9 frakcijami, ki raziskujejo njihovo sestavo, funkcionalnost, prednosti in omejitve.Sestava in struktura jetrnih mikrosomov
● mikrosomi kot del endoplazemskega retikuluma
Jetrni mikrosomi so vezikuli - kot artefakti, ki izhajajo iz endoplazemskega retikuluma v evkariontskih celicah. Nastajajo, ko se celice med homogenizacijskim postopkom razgradijo, kar ima za posledico usedvanje endoplazemskega retikuluma. Ta podcelična frakcija je obogatena z membranskimi - vezanimi encimi in je najpomembnejša pri preučevanju presnove zdravil, zlasti reakcij faze I.● Vključeni ključni encimi: citokrom P450 in UGTS
Visoka koncentracija encimov citokroma P450 (CYP) v jetrnih mikrosomih je njihova opredeljena lastnost. Ti encimi igrajo ključno vlogo pri oksidativnem presnovi velikega obsega ksenobiotikov, vključno z zdravili in okoljskimi toksini. Prisotni so tudi uridin difosfat - glukuronosiltransferaze (UGT), ki prispevajo k konjugaciji in kasnejši izločitvi presnovkov, kar označuje začetni korak k razumevanju reakcij faze I in nekaterih faze II.Sestava in struktura frakcij S9
● S9 kot kombinacija mikrosomalnih in citosolnih frakcij
Frakcija S9, ki jo pogosto imenujemo 9000G supernatant, je podcelična komponenta, pridobljena iz jetrnih homogenatov z diferencialnim centrifugiranjem. Za razliko od mikrosomov, ki vsebujejo pretežno endoplazemski retikulum - vezani encimi, frakcija S9 vključuje mikrosomalne in citosolne encime, ki predstavljajo bolj celovit encimski profil.● Encimi, ki so prisotni v S9, vključno s fazo I in II
Frakcije S9 zagotavljajo bogatejši encimski milje, ki zajema oba encima faze I, kot so CYP -ji, in nabor encimov faze II, kot so sulfotransferaze, glukuronosiltransferaze in glutation - s - prenos. Ta niz omogoča obsežnejše presnovne transformacije, ki simulirajo jetrno in vivo okolje natančneje kot samo mikrosomi.Funkcionalnost: Metabolizem faze I in faze II
● Razlike v aktivnosti encimov med mikrosomi in S9
Razlika jedra je v encimskem obsegu. Jetrni mikrosomi podpirajo predvsem presnovne reakcije faze I, ki vključujejo oksidacijo, zmanjšanje in hidrolizo. Te reakcije uvajajo ali izpostavljajo funkcionalne skupine na molekulah zdravil in utirajo pot reakcijam faze II. V nasprotju s tem frakcije S9 zajemajo obe fazi I in II, s čimer olajšajo reakcije konjugacije, ki jih mikrosomi ne morejo neodvisno.● Pomen faze I in II pri presnovi zdravil
Zaporedna narava reakcij faze I in II poudarja njihov pomen pri presnovi zdravil. Spremembe faze I na splošno pripravijo spojine za fazo II, kar običajno vključuje konjugacijo za povečanje topnosti, ki pomaga pri postopku izločanja. Razumevanje teh faz je ključnega pomena za napovedovanje biološke uporabnosti, učinkovitosti in potencialne toksičnosti zdravila.Uporaba v študijah presnove zdravil
● Uporaba v študijah ADME: absorpcija, distribucija, presnova, odprava
Jetrni mikrosomi in Frakcije S9 so ključne v študijah ADME, ki ocenjujejo absorpcijo, porazdelitev, presnovo in odpravo kandidatov za droge. Te študije so ključne pri določanju farmakokinetičnega profila zdravil, ki zagotavljajo bistvene podatke, ki sporočajo odmerjanje, potencialne interakcije in neželene učinke.● Primerjalne študije: mikrosomi proti S9 pri odkrivanju zdravil
Primerjalna analiza med mikrosomi in S9 frakcijami razkriva, da čeprav imata obe svoji uporabi, Frakcije S9 nudijo bolj celostni pogled na presnovno stabilnost zaradi vključitve encimov faze II. Ta celovita analiza pomaga pri identifikaciji presnovnih poti, ki morda ne bodo očitne pri uporabi samo jetrnih mikrosomov.Prednosti jetrnih mikrosomov
● Stroški - Učinkovitost in razpoložljivost
Jetrni mikrosomi so naklonjeni njihovim stroškom - Učinkovitost in razširjena razpoložljivost. Procesi za njihovo pripravo in uporabo so dobro ugotovljeni, zaradi česar so praktična izbira za številne laboratorije.● Združljivost z visoko pretok in avtomatizacijo
Enostavnost mikrosomenih testov omogoča, da se lahko hitro pregledujejo velike knjižnice spojin. Ta prednost je ključnega pomena pri racionalizaciji plinovoda za odkrivanje drog, kar omogoča zgodnjo identifikacijo obetavnih kandidatov.Prednosti frakcij jeter S9
● Celovita presnovna predstavitev
Z obeh encimih faze I in II frakcije S9 ponujajo popolnejšo oceno presnovne usode spojine. Ta celovita zastopanost je še posebej koristna za prepoznavanje potencialnih presnovkov zgodaj v procesu razvoja zdravil.● Vključitev metabolizma in stroškov faze II
Vključno z encimi faze II pomeni, da lahko Frakcije S9 dajejo vpogled v konjugacijske reakcije, kar napoveduje, kako se bodo zdravila predelala v telesu. Čeprav lahko za določene reakcije potrebujejo dodatne kofaktorje, še vedno ponujajo ugodno ravnovesje stroškov in uporabnosti v nastavitvah z visoko pretok.Omejitve jetrnih mikrosomov
● Odsotnost citosolnih encimov, ki vplivajo na podatke o polni presnovi
Pomembna omejitev jetrnih mikrosomov je njihovo pomanjkanje citosolnih encimov, ki so bistvenega pomena za popolno presnovno sliko. Ta odsotnost pomeni, da bi lahko nekatere presnovke spregledali, manjkajo kritične poti, pomembne za razumevanje varnosti in učinkovitosti zdravil.● Zahteva za dodatne sisteme za študij faze II
Za celovito preučevanje reakcij faze II je pri uporabi mikrosomov potrebnih dodatnih sistemov ali dodatkov z zunanjimi encimi/kofaktorji. Ta zahteva lahko zaplete oblikovanje in razlago testov.Omejitve frakcij jeter S9
● Potreba po CO - Faktorjih in možnem redčenju encimov
Kljub svoji celoviti naravi Frakcije S9 pogosto zahtevajo dodajanje kofaktorjev za podporo določenim encimskim dejavnostim. Ta potreba lahko v teste vnese spremenljivost in zapletenost. Poleg tega lahko redčenje encimov v frakcijah S9 v primerjavi z izoliranimi pripravki vpliva na občutljivost odkrivanja za nekatere presnovne reakcije.● Izzivi za shranjevanje in pripravo v primerjavi z mikrosomi
Priprava in shranjevanje frakcij S9 sta lahko bolj zahtevna kot pri mikrosomih. Pravilno vzdrževanje encimske aktivnosti s skrbnim ravnanjem in shranjevanjem je ključnega pomena za pridobivanje zanesljivih rezultatov, kar nekoliko zaplete njihovo uporabo v velikih študijah v obsegu.Zaključek in priporočila
● Povzetek Best - Uporaba scenarijev za vsako metodo
Jetrni mikrosomi in S9 frakcije imajo različne jakosti in slabosti. Jetrni mikrosomi se najbolje uporabljajo, kadar je potrebno učinkovito, hitro pregledovanje metabolizma faze I. V nasprotju s tem so Frakcije S9 bolj primerne za celovite študije, ki zahtevajo vpogled v presnovo faze I in II. Izbira ustreznega sistema je odvisna od posebnih zahtev raziskave in razpoložljivih virov.● Predlogi za optimalno uporabo v procesih razvoja zdravil
Za tiste v zgodnjih fazah razvoja zdravil, ki uporabljajo visoke - kakovostne jetrne mikrosome iz uglednega dobavitelja jetrnih mikrosomov ali jetrnih mikrosomov, lahko proizvajalec racionalizira začetne preglede. Ko raziskave napredujejo, vključujejojetra S9Frakcije, po možnosti pridobljene iz zanesljive tovarne jetrnih mikrosomov, bodo zagotovile popolnejšo sliko metabolične stabilnosti, kar bo zagotovilo zanesljivo oceno kandidatov za zdravila.● Uvod vIfaza
S sedežem v Severnem Walesu v Pensilvaniji, Iphase Biosciences je "specializirano, novo in inovativno" visoko - visoko - tehnološko podjetje, ki vključuje raziskave, razvoj, proizvodnjo, prodajo in tehnične storitve inovativnih bioloških reagentov. Naša znanstvena skupina se zavezuje, da bo uporabila obsežno znanje in strast do znanstvenih raziskav, da bo znanstvenikom po vsem svetu zagotavljala kakovostne inovativne biološke reagente in pomagala raziskovalcem pri njihovih znanstvenih prizadevanjih za pomoč pri doseganju njihovih raziskovalnih ciljev. Sledil je idealno raziskavo in razvoj "inovativnih reagentov, raziskovanje prihodnosti", Iphase je ustanovil več objektov za raziskave in razvoj, prodajne centre, skladišča in distribucijske partnerje po vsem svetu.
Čas objave: 2024 - 11 - 26 16:50:02