CGT inovativna terapija - Lentivirus - embalažni avtomobil - t imunske celice

CGT inovativna terapija - Lentivirus - embalažni avtomobil - t imunske celice

Imunska celična terapija je inovativno zdravljenje raka, ki izboljšuje imunski sistem telesa za ciljanje in odpravljanje rakavih celic. Ključne oblike vključujejo citokin - inducirano terapijo z morilci, T - celično terapijo in CAR - T celično terapijo. CAR - T terapija vključuje reprogramiranje T celic za izražanje himernih receptorjev antigena (CAR), ki posebej ciljajo na tumorske celice, kar kaže na pomemben uspeh pri hematoloških rakih, kot sta levkemija in limfom.

Ključne besede: avto - T, lentivirak, lentivirusni vektor, sledilni lentivirus

Priprava avtomobila - T celične terapije

Na splošno so ključni koraki za pripravo avtomobilov - T celice naslednji:

Slika Vir: Dana - Inštitut za raka Farber - CAR T - Klinična preskušanja celic pomagajo bolnikom z mielomom, da se vrnejo k zdravju

1. 1.Sorting (T - celična izolacija)

Prvi korak pri pripravi CAR - T celic je izolirati t - celice iz belih krvnih celic v bolnikovi periferni krvi. Tehnike, kot sta imunomagnetna ločevanje kroglic ali pretočna citometrija, se običajno uporabljajo za pridobivanje CD3+- bogatih t - celic iz krvi. Da bi zagotovili čistost celic, mora biti postopek razvrščanja zelo natančen in tako zagotoviti zadostno število visokih - kakovostnih t - celic.

2. 2.stimulacija (T - aktivacija celic)

Izvlečene t - celice se aktivirajo in vitro, običajno z uporabo aCD3 /CD28 T - celice Aktivacija /razširitev kompleta. Aktivirane T celice vstopijo v aktivno stanje in jih pripravljajo na transfekcijo genov. S tem procesom se izboljša T -celična funkcija, kar prispeva k poznejši genetski modifikaciji in amplifikaciji.

3. 3.Transfection (urejanje genov)

Aktivirane T celice so podvržene transfekciji gena, da bi izrazili himerni receptor za antigen (CAR). Ta postopek običajno uporabljalentivirusni vektorVstaviti avtomobilske gene v T celice. Lentivirus je učinkovito orodje za transdukcijo genov, ki ima prednost, ki stabilno integrira ciljni gen (kot je gen CAR) v celični genom. Z okužbo T celic in transfektiranjem CAR gena v T celično DNK Lentivirus omogoča T -celicam, da dolgo izražajo avtomobile. Gen CAR vključuje en sam - verižni spremenljivi fragment (SCFV) protitelesa, ki omogoča T celicam prepoznavanje specifičnih antigenov na površini tumorskih celic in sproži imunski odziv z aktiviranjem signalnih regij T celic. Kot je prikazano na sliki 2. Lentivirusna transfekcija ima značilnosti visoke učinkovitosti in stabilnosti, tako da se lahko gen CAR v T celicah že dolgo izraža.

Slika Vir: Singapurski avtomobil - T celična terapija

4. 4.Amplifikacija (proliferacija celic)

Po transfekciji CAR - T celice vstopijo v stopnjo ojačanja, kjer rastni faktorji, kot soIl - 2se dodajo za spodbujanje celične proliferacije. Namen tega postopka je zagotoviti, da je za morebitno infuzijo na pacienta na voljo zadostno število celic CAR - T. Postopek ojačanja mora biti izveden v sterilnih pogojih, da se zagotovi kakovost in količino celic.

5. 5. Nadzor kakovosti (QC)
6. Pred ponovnim vplivom pacienta je nadzor kakovosti ključnega pomena med postopkom priprave. Pripravljene avtomobile - T celice se strogo testirajozagotoviti njihovo čistost, aktivnost, učinkovitost transfekcije in skladnost s standardi zdravljenja. Poleg tega je potrebno testiranje na celično kontaminacijo ali neželene učinke, da se zagotovi varnost in terapevtska učinkovitost celic po ponovni konfuziji pri bolniku.

Impornost transfekcije lentivirusa v imunskih celicah

Tehnologija lentivirusne transfekcije je ključnega pomena pri terapiji z imunskimi celicami, zlasti pri urejanju genov in celičnega inženiringa. Lentivirusni vektorji, ki izhajajo iz spremenjenega virusa HIV - 1, se pogosto uporabljajo zaradi svoje sposobnosti integracije genov v genom gostitelja, kar zagotavlja stabilno, dolgotrajno izražanje. Lahko okužijo tako delitvene kot ne - delitvene celice, njihova varnost pa je bila izboljšana s spreminjanjem ključnih genov, da se prepreči razmnoževanje. Ti vektorji se zdaj pogosto uporabljajo pri genski terapiji, urejanju genov in raziskavah celične biologije za njihovo učinkovitost in trajnost pri dostavi genov.

Slika Vir: Obiosh.com/product/ Shematski diagram lentivirusne embalaže in procesa transfekcije lentivirusa v 293T celicah

1. učinkovita transdukcija genov

Lentivirusni vektor lahko učinkovito dostavi ciljne gene, kot je gen CAR, v imunske celice in te gene stabilno integrira v celični genom, kar zagotavlja, da se gen CAR nenehno izraža med celično delitvijo in proliferacijo. Ta visoka - sposobnost transdukcije učinkovitosti je bistvena za uspeh imunoterapije.

2.Nejna imunogenost 

V primerjavi z drugimi virusnimi vektorji imajo lentivirusi nižjo imunogenost. Kot rezultat, ko lentivirusi uporabljajo za pretvorbo imunskih celic, bolnikov imunski sistem ustvari relativno šibkejši imunski odziv na virus. To pomaga zmanjšati neželene učinke, zlasti v dolgem obdobju preživetja celic po infuziji in s tem prepreči prekomerno zavrnitev imunskega zavrnitve.

3. Visoka prilagodljivost imunskim celicam

Lentivirusni vektor je sposoben učinkovito pretvoriti različne vrste imunskih celic,zlasti T celice in NK celice. Z lentivirusno transdukcijo lahko imunske celice pridobijo tumor - specifične sposobnosti prepoznavanja in s tem povečajo njihovo sposobnost ciljanja in ubijanja tumorskih celic.

4. IZBIRA Transducirane efektorske celice pri prepoznavanju ciljnih celic 

Pri imunoterapijitransducirane efektorske celiceGlejte imunske celice, ki po transdukciji izražajo CAR in izvajajo anti - tumorsko aktivnost. Lentivirusni vektorji lahko natančno dovajajo gen CAR v te efektorske celice, kar jim omogoča prepoznavanje in ciljanje tumorskih celic.Ciljne celiceso tumorske celice, ki jih te imunske celice prepoznajo in uničijo. Z lentivirusno transdukcijo lahko imunske celice povečajo njihovo specifičnost pri prepoznavanju in ubijanju tumorskih celic, s čimer se izboljša terapevtska učinkovitost.

V tem okviru je Iphase, vodilni v raziskovalnih reagentih in vitro, razvil lentivirusni embalažni komplet in koncentracijski reagent lentivirus, da bi poenostavil kompleksnost transdukcije za stranke imunoterapije in izboljšal stopnjo uspešnosti stabilne transfekcije genov. Ti izdelki ponujajo rešitev One - Stop za stranke.

IPhase lentivirusPpalice

Komplet iphase lentivirusvsebuje vse bistvene reagente, potrebne zaembalaža lentivirusa, bistveno poenostavitev eksperimentalnega procesa in prihranek časa in truda. Ta komplet vključuje:

• Mešanica plazmida lentivirus
• Transfektni reagent
• EGFP plazmid
• Koncentracijski reagent iPhase lentivirus

Ta komplet resnično racionalizira eksperiment! Brez potrebe po zapleteni pripravi reagenta je mogoče učinkovito dokončati lentivirusno embalažo, če preprosto upoštevamo vključena navodila.Edinstvene prednosti kompleta vključujejo kratki čas embalaže, visok titer virusa in enostavno delovanje, zaradi česar je idealen za začetnike v lentivirusni embalaži. Vsak sklop reagentov je podvržen strogemu nadzoru kakovosti, da se zagotovi natančne, zanesljive in ponovljive rezultate, kar bistveno izboljša učinkovitost transfekcije in stabilnost virusnih vektorjev, s čimer zagotavlja močno tehnično podporo pri pripravi imunskih celic.

Poleg tega je za pomoč strankam prihraniti stroške, je Iphase razvil in ustvaril koncentracijski reagent lentivirusa, ki ponuja hitro in preprosto rešitev za koncentracijo.S preprosto mešanjem lentivirusnega supernatanta s koncentracijskim reagentom, ki mu sledi kratka inkubacija in centrifugiranje z uporabo standardne centrifuge, lahko lentivirusne delce hitro koncentriramo. Ta postopek ne potrebuje ultracentrifuge, zaradi česar je za večino laboratorijskih uporabnikov priročna in strošek - učinkovita možnost.

Na kratko, koncentracijski reagent ifaznega lentivirusa ne le bistveno izboljšuje učinkovitost transfekcije, ampak tudi zagotavlja visoko - kakovostno podporo virusnega vektorja za pripravo imunskih celic. Je bistveni izdelek za rutinske eksperimente, predklinične raziskave in druga področja uporabe.

Če povzamemo, imunoterapija, zlasti CAR - T celice in avtomobile - NK celične terapije, predstavlja novo smer pri sodobnem zdravljenju raka. Z natančnimi procesi, kot so razvrščanje celic, aktivacija, transdukcija, širitev in nadzor kakovosti, lahko znanstveniki pripravijo učinkovite in varne produkte imunskih celic za bolnike, kar omogoča ciljno zdravljenje raka.Lentivirusna transdukcija kot temeljna tehnologija igra kritično vlogo pri pripravi celic CAR - T in CAR - NK zaradi njegove visoke učinkovitosti in stabilnosti.Imunoterapija z nenehnim tehnološkim napredkom ima potencial, da ponudi inovativne možnosti zdravljenja za več bolnikov, kar zagotavlja večjo klinično vrednost. V prihodnosti naj bi imunoterapija prinesla revolucionarno terapevtsko upanje več bolnikom z rakom.

Da bi zadovoljili potrebe genske transdukcije, izražanja in raziskav bolezni, iPhase ponuja lentivirusne embalažne komplete, koncentracijske reagente lentivirusa in lentiviruse iz sledilcev. Ti sledilni lentivirusi so pakirani z zelenim fluorescentnim beljakovinam (GFP), rdečim fluorescentnim proteinom mCherry in luciferazo, kar omogoča enostavno sledenje ciljnih celic tako in vitro kot in vivo.

Poleg tega lahko Iphase ponuja tudi dva pred - pakirano sledilno lentivirusi: GFP & Luciferase ter McHerry & Luciferase. Te sledilce je mogoče izbrati ali kombinirati na podlagi eksperimentalnih potreb, racionalizacije delovnih tokov in izboljšanju učinkovitosti za resnično - sledenje in spremljanje ciljnih celic.

IfazaImmunoterapijaRnavdušenaPpalice

Poleg lentivirus - povezanih izdelkov, ki se uporabljajo v Car - T ali CAR - NK terapij, je iPhase kot vodilni v raziskovalnih reagentih in vitro pomembno prispeval k podpori inovacij v CGT (celični in genski terapiji) in drugih področjih. Ifaza je razvila in proizvajala levkocite in PBMC (periferne mononuklearne celice), izolirani z levkaferezo, skupaj z različnimi kompleti za izolacijo imunskih celic, za podporo hitrega razvoja imunoterapije.

IPhase izdelki ponujajo naslednje prednosti inPotrdilo o analizi (COA)Preverjeno z iPhase je na voljo za vsako serijo.

Varnost 

Ifazni izdelki so pridobljeni od zdravih darovalcev/živali, ki so bili podvrženi temeljiti pred - presejalnim pregledom, z negativnimi rezultati za virusno testiranje (HIV - 1/2, HBV, HCV, Syphilis).

Skladnost  

IPhase ponuja obrazce za informirane soglasje, ki jih podpišejo donatorji, z jasnim in sledljivim preverjanjem virov.

Strokovnost

Izdelke, ki jih ponuja Iphase, ki jih pridobiva z levkaferezo, upravljajo usposobljeni strokovnjaki. Vsako serijo spremlja ustrezna COA, izdelke pa se prevažajo pod strogo hladno verigo, da se zagotovi varnost, hitro dostavo in zagotavljanje kakovosti.

Služba za stranke

Iphase ponuja visoko - kakovost po - prodajnih storitvah, s čimer zagotavlja gladko in neprekinjeno izkušnjo v celotnem preskusnem postopku.