Sideed u kaydisaa microsomes beerka aadanaha?

Xaaladaha qaboojinta ugu Fiican ee Microsomes Beerka

Muhiimadda Ilaalinta Heerkulka Hoose

Kaydintamicrosomes beerka aadanahawaxay u baahan tahay in si taxadar leh looga fiirsado heerkulka si loo ilaaliyo dhaqdhaqaaqooda enzymatic. Cilmi-baaristu waxay muujinaysaa in lagu kaydiyo microsomes - 80 ° C ay ugu fiican tahay. Heerkulka hoose wuxuu hoos u dhigaa hoos u dhaca enzymes wuxuuna ilaaliyaa daacadnimada cytochrome P450 enzymes. Soo saaraha iyo alaab-qeybiyeyaashu waa inay hubiyaan in shuruudahan la buuxiyey si looga fogaado khasaare weyn oo ku yimaada shaqada enzyme, taas oo u dhexeysa 20-40% marka aan si habboon loo ilaalin.

Saamaynta muddada qaboojinta ee sharafta Microsome

Daraasaduhu waxay muujinayaan in qaboojinta microsomes beerka bini'aadamka ee muddada u dhaxaysa 1 ilaa 6 bilood ay keento hoos u dhac isku mid ah oo ku yimaada hawlaha enzymes gaarka ah. Natiijooyinkani waxay hoosta ka xariiqayaan lagama maarmaanka u ah warshadaha iyo alaab-qeybiyeyaasha inay si adag ugu hoggaansamaan tilmaamaha muddada kaydinta iyo xaaladaha, maadaama barafaynta dheer ee ka baxsan talooyinka kaydinta caadiga ah ay soo dedejin karto hoos u dhaca dhaqdhaqaaqa.

Doorka Sucrose ee Dejinta Kaydinta

Sucrose sida Cryoprotectant

Joojinta microsomes beerka ee 250 mM sukrose ka hor inta aan la qaboojin ayaa door muhiim ah ka ciyaarta xasilinta shaybaaradan noole. Sucrose waxa ay u adeegtaa sidii crioprotectant, iyada oo yaraynaysa samaynta crystal barafka iyo waxyeelada ka dhalan karta borotiinnada microsomal. Dhaqankan waxaa si weyn u qaata soosaarayaasha si loo ilaaliyo qaabka iyo shaqada enzymes sida cytochrome P450 iyo NADPH-cytochrome c reductase inta lagu jiro kaydinta.

Isbarbardhigga Degenaansho leh iyo Aan lahayn Sukrose

Xogtu waxay muujineysaa in microsomes-yada lagu keydiyo sukrose ay muujinayaan hoos u dhac ku yimaada dhaqdhaqaaqa enzyme, marka la barbardhigo kuwa la keydiyay la'aanteed. Alaab-qeybiyeyaasha, ku darida sukrose borotokoolka kaydinta waxay u horseedi kartaa tayada badeecada oo joogto ah, iyadoo la hubinayo in dufcad kasta ay sii haysato sifooyinkii kiimikaad ee loogu talagalay inta lagu jiro warshadda - safarka shaybaarka.

Saamaynta Kaydinta Muddada Dheer -80°C

Dhaqdhaqaaqa Enzyme ee ka badan Muddada Kaydinta Dheeraadka ah

• Daraasaduhu waxay muujinayaan in microsomes beerka bini'aadamka lagu kaydin karo -80 ° C ilaa 5 sano iyada oo aan khasaare weyn laga helin dhaqdhaqaaqa enzymatic ama xoojinta borotiinka.
• Xasiloonidaani waxay lama huraan u tahay alaab-qeybiyeyaasha u baahan xalal kaydinta oo dheer iyo helitaan badeecad la isku halayn karo.

Xaqiijinta Tayada Joogtada ah

Awoodda lagu kaydiyo microsomes muddo dheer iyada oo aan hoos loo dhigin waxqabadka enzyme ayaa faa'iido u leh soosaarayaasha. Waxay hubisaa in alaabtoodu ay waxtar u yihiin ujeedooyinka cilmi-baarista waqti ka dib, taas oo si gaar ah muhiim ugu ah xarumaha qaybiya diyaarinta microsomal ee adduunka oo dhan.

Cawaaqibta dhalaalida iyo dib u qaboojinta

Dullaynta Marka la dhalaalayo

Dhaleecida microsomes waxay u horseedi kartaa hoos u dhac weyn oo ku yimaada hawlaha enzymes. Tusaale ahaan, wadarta guud ee P450 waxay hoos u dhigi kartaa ilaa 90% ka dib marka lagu hayo heerkulka qolka 6 saacadood ka dib - dhalaalid. Wax-soo-saarayaashu waa inay xoogga saaraan muhiimadda ay leedahay yaraynta baraf-wareejinta wareegyada macaamiishooda si ay u ilaaliyaan shaqada ensaymka.

Saamaynta Foomamka Enzyme P450

Dhallaynta soo noqnoqda iyo dib u qaboojinta waxay keentaa insaymisyo gaar ah inay hoos u dhigaan qaababkooda aan shaqayn, sida cytochrome P420. Alaab-qeybiyeyaashu waa inay bixiyaan tilmaamo wax-ku-qabasho oo cad si looga fogaado dhibaatooyinkan, taas oo wax u dhimi karta natiijooyinka tijaabada ah iyo isku halaynta alaabta.

Isbeddellada Kala duwanaanshaha Hawsha Enzymatic

Falanqaynta Kala duwanaanshaha Hawlaha Enzyme

Kaydinta muddada dheer - , microsomes waxay soo bandhigaan kala duwanaanshiyaha ugu yar ee hawsha enzyme, iyagoo xaqiijinaya kalsoonida - 80°C heerka kaydinta. Xogtu waxay muujinaysaa in hawlaha kala duwan ee enzymes CYP, oo ay ku jiraan CYP1A2 iyo CYP3A4, ay yihiin kuwo deggan, ka faa'iideysanaya soosaarayaasha waa in ay ilaaliyaan heerarka joogtada ah ee alaabtooda.

Isku dheelitirka Joogtada iyo Dabacsanaanta

Xaqiijinta kala duwanaanshaha ugu yar ee dhaqdhaqaaqa enzyme microsomal waxay ka caawisaa alaab-qeybiyeyaasha inay bixiyaan agab cilmi baaris lagu kalsoonaan karo, oo muhiim u ah dib u soo saarista tijaabooyinka sayniska iyo daraasadaha horumarinta daroogada.

Xasiloonida Enzyme P450 ee Xaaladaha barafsan

U adkaysiga Qaboojinta-Dhaqdhaqaaq la'aanta ay keentay

Daacadnimada ensaymes-yada P450 ayaa si weyn u ahaanaya marka la keydiyo barafaysan -80°C. Cilmi-baaristu waxay xaqiijinaysaa in xaaladdu aanay u beddelin P450 P420 aan firfircoonayn si weyn, taas oo alaab-qeybiyeyaasha iyo warshaduhu ay ku tiirsanaan karaan marka la hubinayo tayada badeecadahooda.

Joogteynta dhammaan Enzymes P450 ee kala duwan

In kasta oo ay kala duwan yihiin waqtiyada kaydinta, enzymes-yada muhiimka ah ee P450, oo ay ku jiraan CYP2C9 iyo CYP2E1, waxay ilaashadaan heerarkooda waxqabad, iyaga oo hoosta ka xariiqaya muhiimadda ay leedahay soo-saarayaashu inay raacaan borotokoolka kaydinta adag.

Saamaynta Dhallaanka ee Foomamka Enzyme

Cawaaqibta ka dhalan karta soo-gaadhista heerkulka qolka

Haysashada microsomes-ka 25°C ka dib - dhalaaliddu waxay sababtaa hoos u dhac weyn oo ku yimaadda hawlaha ensaymka, iyadoo qaarkood, sida tolbutamide methyl hydroxylation, ay hoos u dhacayaan 90%. Alaab-qeybiyeyaashu waxay u baahan yihiin inay ku adkeeyaan hab-dhaqannada maaraynta saxda ah macaamiishooda si ay u ilaaliyaan dhaqdhaqaaqa enzyme

Xaqiijinta Hawsha Dib-u-dhiska

Nidaamyada dhalaalidda saxda ah waa in ay la xiriiraan soosaarayaasha si loo ilaaliyo daacadnimada shaqeynta ee microsomes post-kaydinta. Tani waxay muhiim u tahay xaqiijinta isticmaalka waxtarka leh ee codsiyada cilmi-baarista.

U Nuglaanshaha Microsome ee Wasakhowga Hemoglobin

Saamaynta Hawlaha Gaarka ah

Wasakhaynta Hemoglobin waxay kordhisaa dhaqamada qaboojinta aan habboonayn, taasoo horseedaysa labbiska hoos u dhaca hawlaha enzyme gaarka ah. Alaab-qeybiyeyaashu waa inay kormeeraan oo ay yareeyaan khataraha faddaraynta inta lagu jiro farsamaynta microsome si loo hubiyo nadiifnimada iyo waxtarka alaabta.

Xeeladaha lagu Yaraynayo Wasakhda

Wax-soo-saarayaashu waa inay hirgeliyaan hubinta tayada adag iyo hababka baakadaha adag si looga hortago faddaraynta, si loo hubiyo heerarka ugu sarreeya ee diyaarinta microsomal ee macaamiishooda.

Suurtogalnimada Barafka -Ku qallajinta Kaydinta Microsome

Faa'iidooyinka Lyophilization

Qabow Farsamadani waxay u noqon kartaa ciyaar- beddelka warshadaha doonaya inay yareeyaan isticmaalka tamarta oo ay xoojiyaan nolosha alaabta.

Isbarbardhigga Hawlaha Enzyme

Qalajinta ka dib, hawlaha ensaymes ee microsomes dib loo fuuqeeyay waxay ku sii jirayaan 60-120% marka la barbar dhigo kontaroolada, oo muujinaya hab cusub oo loogu talagalay soosaarayaasha ujeedadoodu tahay inay hagaajiyaan kaydinta iyo debecsanaanta rarida.

Saamaynta Xaaladaha Kaydinta ee Xasiloonida Genomiga

Xaqiijinta daacadnimada DNA-da

Iyadoo hawlaha ensaymku yihiin diiradda koowaad, ilaalinta xasilloonida DNA-da genomic ee microsomes beerka ayaa muhiim ah. Hoos-u-dhac ku yimaadda dhalaalidda waxay muujinaysaa baahida loo qabo xaaladaha kaydinta ugu wanaagsan, taas oo soo saarayaasha iyo alaab-qeybiyeyaasha ay tahay inay si adag u hubiyaan.

Kala duwanaanshaha xasiloonida ee borotiinnada

Enzymes iyo borotiinno kala duwan ayaa muujinaya heerar kala duwan oo xasilooni ah. Marka la fahmo nuucyadan, alaab-qeybiyeyaashu waxay habayn karaan xalalka kaydinta si ay u kordhiyaan waxtarka iyo isku halaynta alaabtooda microsomal.

IPHASE Waxay Bixisaa Xalka

IPHASE waxay bixisaa xalal dhamaystiran oo kaydinta iyo maaraynta microsomes beerka aadanaha. Anagoo fulinayna farsamooyinka ilaalinta sare ee cryopreservation iyo qaadashada hababka cusub ee lyophilization, waxaan hubineynaa heerarka ugu sarreeya ee waxqabadka enzyme iyo xasiloonida genomic. Badeecadahayagu waxay wataan tilmaamo maarayn tifaftiran, ka caawinaya alaab-qeybiyeyaasha iyo wax-soo-saareyaasha inay ilaaliyaan xaaladaha ugu wanaagsan oo ay yareeyaan khataraha la xidhiidha baraf - Wadashaqeynta nala waxay dammaanad qaadaysaa isku halaynta, joogteynta, iyo tayada agabka cilmi-baarista, taasoo u gogol xaareysa horumarro saynis iyo dawo oo guuleysta.