Спленоцити у имунолошком истраживању: преко врста и изолације, замрзавање, кораке одмрзавања

Кључне речи:Спленоцити (СПЛС); ЦИНОМОЛГУС МОНКЕИ СПРЕНОЦИТЕС; Спленоцити Рхесус Монкеи; Псе спленоцити; Пасји спленоцити; Пацове спленоцити; Спленоцити миша; Мишеви спленоцити; Зечје спленоцити; Изолација спленоцита; Смрзавање спленоцита; Одмрзавање спленоцита

Ифасе производ

Спленоцити (СПЛС)су хетерогена популација имуних ћелија изолована из слезине, витални орган који је укључен у филтрирање крви, монтирање имунолошких одговора и одржавање хомеостазе. Ове ћелије укључују лимфоците (Т ћелије, Б ћелије), макрофаге, дендритичке ћелије и ћелије природних убица (НК), све које играју критичне улоге у адаптивном и уродном имунитету. Спленоцити се широко користе у предклиничким и транслацијским истраживањима за проучавање имунолошке функције, развој вакцине, аутоимуне болести и имунотерапију рака.

Улога и састав Спленоцита (СПЛС)

Унутар слезине, Спленоцити су боравили у различитим регионима: црвени целулоза, који филтрира крв и рециклира старе црвене крвне ћелије и бели пулп, где се покрећу имуни одговори. Бели пулп је организован у Т ћелијске зоне и Б ћелијске фоликуле, олакшавајући интеракције између антигена - презентације ћелија и лимфоцита. Ова јединствена архитектура чини Спленоците (Сплс) моћно средство у имунолошком тестовима као што су Елиспот, проточна цитометрија и мешовите реакције лимфоцита.

Врсте - специфични спленоцити (СПЛС)

-ЦИНОМОЛГУС МОНКЕИ СПРЕНОЦИТИ:Спленоцити Монкеи Циномолгус користе се у предклиничким истраживањима, јер су они ближе опонашани људски имуни одговори, прављење циномолгус монкеи спленоцита идеалним за транслацијске студије.

-Рхесус Монкеи Спленоцитес:Спленоцити Рхесус Монкеи Спленоцити су слично вредновани за њихове блиске имунолошке сличности људима. Студије користећи Рхесус Монкеи Спленоцити помажу мосту јаз између животињских модела и клиничких апликација.

-Дог Спленоцитес / Патине Спленоцитес:У ветеринарском истраживању, псе спленоцити (или псећим спленоцитима) користе се за проучавање имунолошких поремећаја у очњацима и цртати поређењу са људским имунолошким одговорима.

-Зуб Спленоцити: Зуб Спленоцити су важни у студијама о производњи антитела и развоју вакцине. Зуб Спленоцити помажу у откривању детаља који се могу разликовати од слабоцита миша или Спленоцита пацова.

-Моусе Спленоцитес / Мице Спленоцитес:Моусе Спленоцити су једно од најчешће проучавани спленоцити (Сплс) у имунологији. Протоколи за изолацију Спленоцити из мишева су добро успостављени, а моусе спленоцити и мишеви Спленоцити користе се за протоку цитометрије, елиспот и друге функционалне тестове.

-Рат Спленоцити:Спленоцити пацова пружају комплементарни модел имунотоксикологије и студија вакцине. Спленоцити пацова често се упоређују са сланоцитима миша како би разумели разлике у међупростори.

Изолација спленоцита

Изолација спленоцитаДа ли је процес вађења имунолошког ћелија из слезине који се користе у различитим истраживачким апликацијама, као што су цитометрија протока, испитивања производње цитокина или мешовитих реакција лимфоцита.

Слезина је уклоњена под асептичним условима, тла у изолационом раствору и пребачена у стерилну цев која садржи РПМИ 1640 медијум. Леукоцитни слој је пажљиво прикупљен након центрифугирања. Ћелије су испране РПМИ 1640 средњим, центрифугираним и супернатант је одбачен. Овај корак прања је поновљен 1 - 2 пута пре него што су изоловане ћелије коришћене за даљње експерименте.

Замрзавање спленоцита

Замрзавање спленоцитаје пресудан корак за очување ћелија за будућу употребу. ЦриоиПресервација омогућава истраживачима да чувају спленоците за продужене периоде без угрожавања њихове одрживости или функционалности.

Супернатант добро центрифугиране ћелијске суспензије из корака изолације одбацује се и концентрација ћелије је разблажена у медијуму замрзавања. Додајте аликвота на сваку епрувету замрзавања и пребаците на посуду за смрзавање, осигуравајући да ћелије остану у суспензији. Брзо замрзнете контејнере замрзавања у замрзивач за - 80 ° Ц. Пренос на - 150 ° Ц замрзивач за замрзивача (или течни резервоар за азот) за дугорочно складиштење рока.

Одмрзавање спленоцита

Одмрзавање спленоцитаМора се пажљиво обавити да би се осигурала висока одрживост ћелијске ћелије и функционалност након криопресервације. Процес одмрзавања је обично брз да би се смањили штетни ефекти ДМСО и формације кристала леда.

Цриотубес се преносе на водену купатило на 37 ° Ц и одмрзавају се док се у епруветама не остану само фини кристали ледене ледене. Додајте 0,5 - 1МЛ ћелијске културе медијума на смрзнуту цев, ресуспендују и пребаците суспензију на 15 мл цев испуњену медијумом ћелијског културе. Центрифуга, уклоните супернатант и додирните цев да бисте отпустили аранжман ћелије. Додајте 1МЛ медијум за културу ћелијске културе, пухајте и ресуспендирајте са пипетом, додајте медијум на запремину од 15 мл. Центрифуга, де - Супернатизе, додајте 1МЛ медијума ћелијске културе, додајући медијум у складу са очекиваним концентрацијом ћелијске ћелије. Поставите ћелије у ЦО2 инкубатор и инкубирајте се за 1Х малим јазмом у поклопцу. На крају инкубације, ресуспендујте и одлазите да 1мин омогући агрегирану ћелијску крхоту да се таложи. Суспензија ћелија без падавина пажљиво је пребачена на нову 15 мл цев. Ћелије су пребројане да одреде ћелијску активност.

Закључак

Спленоцити, са разноликим саставом и кључношћу у имунолошним одговорима, непроцењиви су алати у имунолошком истраживању. Без обзира да ли је изведено од глодара, примата или других врста попут зечева и паса, Спленоцити олакшавају критичне студије у имунолошкој функцији, механизмима болести, развоју вакцине и имунотерапију од рака и имунотерапијом од рака. Процеси изолације, замрзавања и одмрзавања су од суштинског значаја за очување њиховог интегритета и одрживости, омогућавајући истраживачима да истражују ћелијску динамику преко различитих модела. Како се наше разумевање имунологије продубљује, употреба спленоцита и даље ће бити од инструмента у премоштавању јаза између предклиничких студија и клиничких апликација, обезбеђивање унапређења и у људској и ветеринарској медицини.