கே: வளர்சிதை மாற்ற ஸ்திரத்தன்மை ஆய்வுகளுக்கு மைக்ரோசோம்கள் மற்றும் ஹெபடோசைட்டுகளை நான் எவ்வாறு தேர்வு செய்ய வேண்டும்? தேவையை பூர்த்தி செய்ய அவற்றில் ஒன்றை மட்டுமே நான் தேர்வு செய்யலாமா?
ப: வளர்சிதை மாற்ற நிலைத்தன்மை ஆய்வில், கல்லீரல் மைக்ரோசோம்கள் அல்லது ஹெபடோசைட்டுகளின் தேர்வு முக்கியமாக சேர்மங்களின் வளர்சிதை மாற்ற பண்புகளைப் பொறுத்தது, இதில் அதிக வளர்சிதை மாற்ற விகிதம் கொண்டவர் தேர்வு செய்யப்படுகிறார். பொதுவாக, கல்லீரல் மைக்ரோசோம்கள் விரும்பப்படுகின்றன, குறிப்பாக கூட்டு மூலக்கூறுகள் அதிக நீர் மற்றும் ஒரு - கட்ட வளர்சிதை மாற்றம் முக்கிய வளர்சிதை மாற்ற பாதையாகும் (குறிப்பாக CYP வழியாக). முக்கிய பாதையாக இரண்டு - கட்ட வளர்சிதை மாற்றத்தின் சான்றுகள் இருக்கும்போது, முக்கிய வளர்சிதை மாற்ற பாதையாக நீராற்பகுப்பு, கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களில் அதிக குறிப்பிடப்படாத புரத பிணைப்பு மற்றும் கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களில் வளர்சிதை மாற்றம் ஆகியவை தெளிவாகத் தெரியவில்லை. வழக்கமாக, தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்ய ஒரு வளர்சிதை மாற்ற அமைப்பைத் தேர்வு செய்யலாம்; எல்லா அம்சங்களிலும் உள்ள நிலைமைகள் அனுமதித்தால், இரு அமைப்புகளையும் ஒரே நேரத்தில் தேர்வு செய்வது நிச்சயமாக சிறந்தது.
கே: என்சைம் தூண்டல் மதிப்பீட்டிற்கு முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகளைப் பயன்படுத்துவது ஏன் அவசியம்?
A: CYP என்சைம் - தூண்டப்பட்ட மதிப்பீடு ஒரு செயலில் உள்ள CYP என்சைம் புரதத்தைப் பெற "டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன்", "மொழிபெயர்ப்பு" இலிருந்து "இடுகை - புரதத்தின் மொழிபெயர்ப்பு மாற்றம்" க்கு செல்ல வேண்டும். எனவே, சோதனை அமைப்பு கல்லீரல் செல்கள் இருக்க வேண்டும், கல்லீரல் மைக்ரோசோம்கள் அல்லது கல்லீரல் எஸ் 9 அல்ல.
கே: நொதி தூண்டல் மதிப்பீட்டிற்கு நான் ஏன் மூன்று நன்கொடையாளர் மனித முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகளை தேர்வு செய்ய வேண்டும்?
ப: மருந்து தொடர்புகளுக்கான வழிகாட்டுதல்களின் அறிமுகத்தின்படி, குறைந்தது மூன்று நன்கொடையாளர்கள் பயன்படுத்தப்பட வேண்டும், மேலும் ஒவ்வொரு நன்கொடையாளரின் தூண்டல் முடிவையும் தனித்தனியாக மதிப்பீடு செய்ய வேண்டும். புள்ளிவிவர ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க முடிவுகளைத் தயாரிப்பதைத் தவிர, சோதனைக்கு மூன்று நன்கொடையாளர்களின் தேர்வும் இன்டர் - தனிப்பட்ட மாறுபாட்டை மதிப்பிடுவதற்கு மிகவும் முக்கியமானது. குறைந்தது ஒரு நன்கொடையாளரின் முடிவு முன்னரே தீர்மானிக்கப்பட்ட வாசலை மீறினால், மருந்து வேட்பாளர் தூண்டக்கூடியவராக இருக்கலாம் மற்றும் பின்தொடரலாம் - அப் மதிப்பீடு தேவை.
கே: சிஐபி என்சைம் தூண்டலில் மட்டுமே கவனம் செலுத்துவது ஏன், யுஜிடி என்சைம் தூண்டலில் அல்ல?
ப: சைபேஸ் தூண்டலில் கவனம் செலுத்துவதற்கான காரணம் என்னவென்றால், சைபேஸ் தூண்டலின் வழிமுறை இன்னும் தெளிவாக ஆய்வு செய்யப்பட்டுள்ளது. வேறு வார்த்தைகளில் கூறுவதானால், உக்டேஸ் தூண்டல் ஆய்வு தேவையில்லை என்பதற்கான காரணம் என்னவென்றால், பொறிமுறையானது இன்னும் தெளிவாக இல்லை; இருப்பினும், உக்டேஸ் தூண்டப்படாது என்று அர்த்தமல்ல. டிரான்ஸ்போர்ட்டர்கள் மற்றும் இரண்டாம் கட்ட வளர்சிதை மாற்ற நொதிகளின் தூண்டிகள் அல்லது தடுப்பான்களுக்கு தரப்படுத்தப்பட்ட வகைப்பாடு அமைப்பு இல்லை என்றும் வழிகாட்டுதல்கள் கூறுகின்றன.
கே: புத்துயிர் பெற்ற பிறகு முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகள் எவ்வளவு காலம் வாழ முடியும், மேலும் புத்துயிர் பெற்ற பிறகு ஒட்டக்கூடிய கலாச்சாரம் இல்லாமல் ஹெபடோசைட்டுகளை எவ்வளவு காலம் பராமரிக்க முடியும்?
ப: பாஸ்டுரைஸ் செய்யப்பட்ட முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகள் பொதுவாக நொதி தூண்டல் மதிப்பீடுகளுக்கு பயன்படுத்தப்படுகின்றன. செல் மீட்புக்குப் பிறகு, செல்கள் தட்டு பரவக்கூடிய ஊடகத்தில் இடைநிறுத்தப்பட்டு, பொருத்தமான செறிவுடன் சரிசெய்யப்பட்டு, கொலாஜன் - பூசப்பட்ட தட்டுகளில் வளர்க்கப்படுகின்றன; பின்னர் செல்களை 4 ~ 6 மணி நேரத்திற்குள் பேஸ்சுரைஸ் செய்யலாம். செல்கள் சுவரில் இணைக்கப்பட்ட பிறகு, உயிரணு நிலையை அதிகபட்சமாக மீட்டெடுப்பதை உறுதி செய்வதற்காக பராமரிப்பு ஊடகம் 18 மணிநேரத்திற்கு மாற்றப்பட்டு பராமரிக்கப்படுகிறது. அடுத்து, வளர்சிதை மாற்ற செயல்பாடு மற்றும் எம்ஆர்என்ஏ தூண்டல் அளவைக் கண்டறிய என்சைம் தூண்டல் மதிப்பீடு செய்யப்படலாம். முழு சுழற்சியின் கண்ணோட்டத்தில், சுவர் பின்பற்றிய பிறகு 6 ~ 7 நாட்களுக்கு ஹெபடோசைட்டுகளை பராமரிக்க முடியும். நேரம் செல்ல செல்ல, செல் சுவர் பின்பற்றுதல் நிலை மோசமடைகிறது, மேலும் செல்கள் பிரித்து இடைநிறுத்தப்படும்.
ஒட்டக்கூடிய ஹெபடோசைட்டுகள் வளர்க்கப்படாவிட்டால், அவற்றை 4 ~ 6 மணி நேரத்திற்குள் ஒரு நல்ல நிலையில் பராமரிக்க முடியும் என்பதை நாங்கள் சரிபார்த்துள்ளோம். நாங்கள் இன்னும் நீண்ட காலத்திற்கு சரிபார்ப்பை மேற்கொள்ளவில்லை.
கே: ஹெபடோசைட்டுகள் பயன்படுத்தப்படும் வெவ்வேறு கலாச்சார ஊடகங்களைப் பொறுத்து இடைநீக்கம் மற்றும் ஒட்டக்கூடிய செல்கள் இரண்டாகவும் பயன்படுத்த முடியுமா?
ப: திட திசுக்கள் மற்றும் உறுப்புகளிலிருந்து வரும் பெரும்பாலான செல்கள் சுவர் கொண்டவை, ஆனால் - விட்ரோவில் வளர்க்கப்படும்போது அனைத்து உயிரணுக்களும் சுவர் செய்யப்படாது. செல்கள் சுவர் - பின்பற்றுபவரா இல்லையா என்பது உயிரணுக்களின் நிலையைப் பொறுத்தது; அதே நேரத்தில், சுவர் - ஒட்டக்கூடிய உயிரணுக்களுக்கு குறிப்பிட்ட கலாச்சார ஊடகம் மற்றும் சில சிறப்பு சார்பு - செல் ஒட்டுதல் பொருட்கள் (எ.கா. முடிவில், பின்பற்றும் செல்கள் இடைநீக்க கலங்களாகப் பயன்படுத்தப்படலாம், ஆனால் இடைநீக்க செல்கள் ஒட்டக்கூடிய பயன்பாட்டிற்கு அவசியமில்லை.
கே: ஒட்டக்கூடிய சுவர் வசனங்கள் சஸ்பென்ஷன் ஹெபடோசைட்டுகளைப் பயன்படுத்துவதன் நன்மைகள்/தீமைகள் என்ன? முடிவு அளவுகோல்கள் யாவை?
ப: ஹெபடோசைட்டுகள் தனிமைப்படுத்தப்பட்ட பிறகு, அவை இடைநீக்கத்தில் அல்லது பின்பற்றும் சுவரில் வளர்க்கப்படலாம். சஸ்பென்ஷன் வளர்ப்பு முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகளிலிருந்து சைட்டோக்ரோம் பி 450 என்சைமின் செயல்பாடு முதல் 4 ~ 6 மணிநேரத்திற்கு - விவோவுடன் மிகவும் ஒத்துப்போகிறது, பின்னர் நேரத்தின் நீடித்ததுடன் வேகமாக குறைகிறது. எனவே, இடைநீக்க ஹெபடோசைட்டுகள் பொதுவாக வளர்சிதை மாற்ற நிலைத்தன்மை ஆய்வு அல்லது வளர்சிதை மாற்ற விவரக்குறிப்பு ஆய்வுக்கு பயன்படுத்தப்படுகின்றன. ஒட்டக்கூடிய சுவரில் வளர்க்கப்பட்ட முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகள் சாதாரண ஹெபடோசைட்டுகளின் உயிரியல் பண்புகள் மற்றும் வளர்சிதை மாற்ற செயல்பாடுகளை பராமரிக்க சேதத்திலிருந்து மீட்க போதுமான நேரம் உள்ளது. எனவே, அவை பொதுவாக நொதி தூண்டல் ஆய்வுகள், மருந்து சைட்டோடாக்ஸிசிட்டி ஆய்வுகள், மெதுவாக வளர்சிதை மாற்ற மருந்துகளின் வளர்சிதை மாற்ற நிலைத்தன்மை அல்லது தயாரிப்பு அனுமான ஆய்வுகள் ஆகியவற்றிற்கு பயன்படுத்தப்படுகின்றன.
தற்போது, நாங்கள் வலைப்பக்க ஆன்லைன் கொள்முதல் சேவையை வழங்கவில்லை. பதிவுசெய்தல் மற்றும் உள்நுழைந்த பிறகு வணிக வண்டியில் சேர்க்கப்பட்ட தயாரிப்புகள் குறிப்புக்கு மட்டுமே. எங்கள் தயாரிப்புகளை நீங்கள் வாங்க வேண்டும் என்றால், தயவுசெய்து உங்கள் தொடர்புத் தகவல்களை தொடர்பு சேனல் மூலம் விட்டுவிடுங்கள், எங்கள் சேவைகளை முடிக்க சரியான நேரத்தில் நாங்கள் உங்களைத் தொடர்புகொள்வோம்.
கே the அல்லாத - குறிப்பிட்ட புரத பிணைப்பு சோதனை முடிவுகளை எவ்வாறு பாதிக்கிறது?
A • மருந்து வேட்பாளர் அல்லாத - குறிப்பாக மைக்ரோசோமல் புரதங்களுடன் பிணைக்கப்பட்டால், இது மாற்றப்பட்ட இயக்க அளவுருக்களில் விளைகிறது. புரத செறிவு அதிகரிக்கும் போது, கி.மீ மதிப்பு அதிகரிக்கிறது, இதன் விளைவாக குறைந்த அனுமானமான உள்ளார்ந்த அனுமதி ஏற்படுகிறது. மேலும், மருந்து வேட்பாளரை மைக்ரோசோம்களில் புரதங்களுடன் பிணைப்பது வெவ்வேறு ஆய்வகங்கள் மற்றும் வெவ்வேறு அமைப்புகளின் முடிவுகளில் பெரிய வேறுபாடுகளை ஏற்படுத்தும்.
Q the கட்டம் I அல்லது கட்டம் II வளர்சிதை மாற்ற நிலைத்தன்மை கிட்டின் அறிவுறுத்தல் கையேட்டில் கல்லீரல் மைக்ரோசோமல் புரதத்தின் பரிந்துரைக்கப்பட்ட செறிவு 0.1 மி.கி/மில்லி -
அ: முதலில் கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களை நீர்த்துப்போகச் செய்ய வேண்டிய அவசியமில்லை; கிட்டில் கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களின் செறிவு 20 மி.கி/மில்லி மற்றும் சோதனை அமைப்பில் கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களின் இறுதி செறிவு 0.1 - 1 மி.கி/மில்லி ஆகும், இது விகிதாசாரமாக சேர்க்கப்படலாம்.
கே the முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகளின் வளர்சிதை மாற்ற நிலைத்தன்மை சோதனைக்கு பரிந்துரைக்கப்பட்ட செல் அடர்த்தி என்ன? அனுமதி கணக்கீடு கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களைப் போலவே உள்ளதா?
A the முதன்மை ஹெபடோசைட் வளர்சிதை மாற்ற நிலைத்தன்மை மதிப்பீட்டிற்கான பரிந்துரைக்கப்பட்ட செல் அடர்த்தி 0.5 முதல் 2 × 10 ஆகும்6 செல்கள்/எம்.எல், மற்றும் அனுமதி கணக்கீடுகள் மற்றும் கல்லீரல் மைக்ரோசோமல் வளர்சிதை மாற்ற நிலைத்தன்மை மதிப்பீட்டின் முடிவுகளின் செயலாக்கம் ஆகியவை சீரானவை.
கே your உங்கள் பிபிஎஸ் பஃப்பரில் உள்ள முக்கிய பொருட்கள் யாவை? அதில் கே.சி.எல் மற்றும் என்ஏசிஎல் உள்ளதா?
ஒரு rebs எங்கள் பிபிஎஸ் இடையகத்தின் முக்கிய கூறுகள் k2HPO4 மற்றும் கே2PO4, மற்றும் கே.சி.எல் மற்றும் NACL இல்லாதவை.
கே fos பாஸ்பேட் இடையகங்களின் நோக்கம் என்ன? உங்களுக்கு ஏன் பாஸ்பேட் தேவை?
உடலியல் சூழலைப் பிரதிபலிக்கும் நோக்கத்திற்காக ஒரு ： பாஸ்பேட் இடையகங்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்படுகின்றன, மேலும் உடலின் திரவ சூழலை பராமரிப்பதற்கான மிக முக்கியமான இடையக ஜோடிகளில் பாஸ்பேட் ஒன்றாகும்.
கே the நொதிக்கான வழக்கமான அமைப்பு என்ன - தூண்டப்பட்ட ஏற்பி செறிவு? சோதிக்கப்பட வேண்டிய அமைப்பின் கரைதிறன் மோசமாக இருந்தால் ஏதாவது தீர்வு இருக்கிறதா?
A ： என்சைம் தூண்டல் மதிப்பீடு 3 வெவ்வேறு செறிவுகளுடன் அமைக்கப்பட வேண்டும், செறிவு நிலை மனிதர்களில் எதிர்பார்க்கப்படும் பயனுள்ள இரத்த மருந்து செறிவை மறைக்க வேண்டும், மேலும் அதிக செறிவு மனிதர்களில் சராசரி பயனுள்ள இரத்த மருந்து செறிவை விட குறைந்தது ஒரு வரிசையாக இருக்க தேர்வு செய்யப்படுகிறது. அக்வஸ் கட்டத்தில் கரைதிறன் மோசமாக இருந்தால், ஒரு கரிம கரைப்பான் அதன் கரைப்பானாக தேர்ந்தெடுக்கப்படலாம், எ.கா. டி.எம்.எஸ்.ஓ, ஆனால் கணினியில் சேர்க்கப்பட்ட கரிம கரைப்பான் அளவைக் கட்டுப்படுத்த வேண்டும்.
கே ： வளர்சிதை மாற்ற ஸ்திரத்தன்மை ஆய்வுகளில், சோதனைக்கு இரண்டு சோதனை அமைப்புகள், கல்லீரல் மைக்ரோசோம்கள் மற்றும் முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகள் பயன்படுத்த வேண்டியது அவசியமா?
ஒரு ： கல்லீரல் மைக்ரோசோம்கள் கிட்டத்தட்ட கோள சவ்வு வெசிகல் - சுயத்தால் உருவான கட்டமைப்புகள் போன்றவை - கல்லீரல் திசுக்களின் ஒத்திசைவு மற்றும் வேறுபட்ட மையவிலக்கு ஆகியவற்றின் போது பெறப்பட்ட துண்டு துண்டான எண்டோபிளாஸ்மிக் ரெட்டிகுலத்தின் இணைவு, மற்றும் CYP450 என்சைம்கள் மற்றும் சில பைபாசிக் நொதிகள், எ.கா. முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகள் (பி.எச்.சி) என்பது விலங்குகளின் கல்லீரல்களிலிருந்து நேரடி தனிமைப்படுத்தப்பட்ட உடனேயே வளர்க்கப்படும் ஹெபடோசைட்டுகள், இது அடிப்படையில் கல்லீரலின் வளர்சிதை மாற்ற செயல்பாடுகளை பராமரிக்கிறது, குறிப்பாக விவோவில் உள்ளவர்களுடன் ஒத்த நொதி அளவைப் பாதுகாக்கிறது. வளர்சிதை மாற்ற ஸ்திரத்தன்மை ஆய்வில், செலவைக் கருத்தில் கொள்ள வேண்டிய அவசியமில்லை, மேலும் ஒரே நேரத்தில் சோதனைக்கு இரண்டு சோதனை அமைப்புகள் தேர்ந்தெடுக்கப்படலாம்; அல்லது கலவையின் வளர்சிதை மாற்ற பண்புகளின்படி பொருத்தமான சோதனை முறையைத் தேர்ந்தெடுக்கலாம், மேலும் அந்த அமைப்பில் அதிக வளர்சிதை மாற்ற விகிதம் தேர்ந்தெடுக்கப்படுகிறது என்பதே கொள்கை. பொதுவாக, கூட்டு மூலக்கூறுகள் அதிக நீர் மற்றும் ஒரு - கட்ட வளர்சிதை மாற்றம் என்பது முக்கிய வளர்சிதை மாற்ற பாதையாகும் (குறிப்பாக CYP வழியாக) கல்லீரல் மைக்ரோசோம்கள் சிறந்த தேர்வாகும்; இரண்டு - கட்ட வளர்சிதை மாற்றம் முக்கிய பாதையாக இருக்கும்போது, நீராற்பகுப்பு முக்கிய வளர்சிதை மாற்ற பாதையாகும், கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களில் குறிப்பிட்ட புரத பிணைப்பு மிக அதிகமாக உள்ளது, மேலும் கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களில் வளர்சிதை மாற்றம் தெளிவாக இல்லை, முதன்மை ஹெபடோசைட்டுகளைப் பயன்படுத்தி சோதனை மேற்கொள்ளப்படலாம்.
கே coprop வளர்சிதை மாற்ற ஸ்திரத்தன்மை சோதனையில் மைக்ரோசோம்களின் செறிவு ஆராயப்படுகிறதா? மிக உயர்ந்த அல்லது மிகக் குறைந்த விளைவு என்ன?
A ： வளர்சிதை மாற்ற நிலைத்தன்மை சோதனையில், புரத செறிவு வளர்சிதை மாற்ற விகிதத்தையும் பாதிக்கும், வழக்கமாக 0.1 mg/ml ~ 1 mg/ml இன் மைக்ரோசோமல் புரத செறிவைத் தேர்வுசெய்க, கலவையின் சொந்த வளர்சிதை மாற்ற பண்புகளின்படி எவ்வளவு புரத செறிவு தேர்ந்தெடுக்கப்பட வேண்டும் என்பதற்கான குறிப்பிட்ட தேர்வு. மைக்ரோசோமல் புரதத்தின் மிக அதிகமான செறிவு மைக்ரோசோமல் புரதத்துடன் மருந்தின் குறிப்பிட்ட பிணைப்புக்கு வழிவகுக்கும்; மைக்ரோசோமல் புரதத்தின் செறிவு மிகக் குறைவானது மருந்தின் முக்கியமற்ற வளர்சிதை மாற்றத்திற்கு வழிவகுக்கும்.