İlaç metabolizmasında ve siRNA ilaç dağıtımında hepatositler: türler arasında model sistemlerinin değerlendirilmesi

Not: Süspansiyon hepatositlerinin çözülme ortamı ve inkübasyon ortamı ile kullanılması gerekir; Platable hepatositlerin çözülme ortamı ile kullanılması gerekir, Platable ortam, bakım ortamı ve kollajen kaplı plaka. CYP indüksiyonu da mRNA indüksiyon test kiti gerektirir.

Hepatositler

Hepatositlermetabolizma, detoksifikasyon, safra üretimi ve protein sentezinde merkezi bir rol oynayan karaciğerin birincil fonksiyonel hücreleridir. Çeşitli endojen ve eksojen bileşiklerin daha az zararlı maddelere dönüştürülmesinde ve ilaç ve toksinlerin metabolizmasını kolaylaştıran ana aracılar olarak hareket eden karaciğer fonksiyonunun yapısal ve biyokimyasal temelini oluştururlar. Hepatositlerin kimyasalları işleme konusundaki bu içsel yeteneği, özellikle ilaç metabolizması ve karaciğer toksisitesinde yer alan yolları araştırırken, hem klinik hem de araştırma ortamlarında vazgeçilmez hale getirmiştir.

Birincil hepatositler

Birincil hepatositler, in vitro yayılım uzunluğunda karaciğer dokusundan - insan veya hayvan olsun - taze izole edilen hücrelere atıfta bulunur. Bu hücreler, karaciğerin karakteristiği olan enzimatik aktivitenin ve fizyolojik fonksiyonların çoğunu koruduğundan, genellikle karaciğer özel aktivitelerini inceleyen çalışmalarda altın standart olarak kabul edilir. Araştırmada kullanımları, hem metabolik stabiliteyi hem de ilaçların içsel kapasitesinin dönüşümden geçme veya biyolojik bir sisteme sokulduktan sonra orijinal formlarında devam etme konusunda çok önemlidir.

Platable Hepatositler ve Süspansiyon Hepatositleri

Deneysel çerçeveler içinde hepatositler kültürleme koşullarına göre daha fazla kategorize edilebilir. Platable hepatositleri, in vivo ortamı yakından taklit eden kararlı bir bağlanma ve morfolojiye izin veren bir kültür substratına bağlı olanlardır. Bu bağlanma sadece bu hücrelerin polarize yapısını desteklemekle kalmaz, aynı zamanda biyokimyasal yolların uzun süreli çalışmalarını da sürdürürCYP450 enzim indüksiyonu. Tersine, süspansiyon hepatositleri, tipik olarak hücresel ortamdaki değişikliklerin ve hızlı metabolik değerlendirmelerin gerekli olduğu kısa - terim tahlillerinde kullanılır. Süspansiyon kültürleri, bileşikleri test etmek için hücrelerin daha düzgün bir şekilde maruz kalmasını kolaylaştırır, bu da onları metabolik stabilite ve akut hepatotoksik yanıtların hızlı değerlendirmeleri için ideal hale getirir.

Platable hepatositler

Platable hepatositlerkaplanmış veya özel kültür yemekleri üzerinde kültürlenen izole edilmiş karaciğer hücreleridir. Bu bağlanma, hücrelerin birkaç gün hatta haftalarda birçok in vivo - benzer fonksiyonları koruyarak hücreler arası kontakları yaymasına, polarize etmesine ve oluşturmasına izin verir. Bu hücreler yapışkan olduğundan, kronik yanıtları, zaman içinde CYP450 enzim indüksiyonunu ve çok - günlük toksisite deneylerini izlemek için kullanılabilirler. Platable hepatositler ayrıca karaciğer - spesifik işlevselliği korumak için çok önemli olan daha sağlam hücre - TO - hücre iletişimi ve hücre dışı matris etkileşimlerini korur. Her tür - insan, insan primatı, kemirgen veya başka bir tür - fizyolojik koşulları en iyi şekilde çoğaltmak için optimize edilmiş kaplama koşulları (spesifik kaplamalar veya ortam takviyeleri gibi) gerektirebilir.

Süspansiyon hepatositleri

Tersine,Süspansiyon hepatositleridaha kısa süreler boyunca uygulanabilir kalırken yuvarlak bir morfolojiyi koruyarak yapışmayan bir durumda kültürlenir. Süspansiyon hepatositleri, ilk ilaç metabolizması çalışmaları veya hızlı enzim kinetik değerlendirmeleri gibi kısa - terim deneyleri için idealdir. Hücreler matris ekleri tarafından kısıtlanmadığından, hücre uyumu için gerekli gecikme olmadan fonksiyonel testler için hızla hazırlanabilir ve kullanılabilirler. Süspansiyon kültürleri, tür farklılıklarını karşılaştırırken özellikle yararlıdır, çünkü insanlardan gelen süspansiyon hepatositleri, insan olmayan primatlar, kemirgenler ve diğer türler arasında standartlaştırılmış hızlı deneylere izin verirler.

Metabolik stabilite ve hepatotoksisite

Metabolik stabiliteHepatosit araştırması bağlamında, bir molekülün, genellikle bir ilaç adayı, karaciğer enzimleri tarafından biyokimyasal dönüşüme direnme yeteneğini ifade eder. Hepatositlerle metabolik stabilitenin araştırılması, araştırmacıların ilaç gelişiminde kritik olan bu maddelerin yarısı - yaşamı ve potansiyel bozulma ürünlerini tahmin etmelerini sağlar. Bir bileşiğin metabolik profili sadece etkinliğini değil, aynı zamanda güvenliğini de belirleyebilir, çünkü metabolitler bazen ana bileşikte görülmeyen toksik etkiler sergileyebilir.

HepatotoksisiteÖte yandan, kimyasal maddelerin karaciğer hücreleri üzerindeki zararlı etkilerini kapsar. Toksisite çalışmalarında hem primer hem de kültürlenmiş hepatositlerin kullanılması, karaciğer hasarına yol açan mekanizmaların açıklanmasına yardımcı olur. Bu çok önemlidir, çünkü merkezi metabolik organ olan karaciğer, hem çevresel kimyasallardan hem de farmasötik ajanlardan toksik hakaretlere karşı oldukça hassastır. Bu hücreleri kullanan çalışmalar, hücre hasarı veya disfonksiyon paternlerini tespit edebilir, karaciğer hasarının erken olaylarına ilişkin bilgiler sağlayabilir ve klinik bir ortamda olumsuz sonuçları tahmin etmeye yardımcı olabilir.

Enzim indüksiyonu, belirli maddelerin ilaç - metabolize edici enzimlerin sentezini arttırma sürecine atıfta bulunan hepatosit fonksiyonuna bağlı bir diğer önemli özelliktir. Bu fenomen, CO uygulanan ilaçların metabolizmasının artmasına, potansiyel olarak etkinliklerini azaltmaya veya zararlı metabolitlerin üretimini arttırmaya yol açabileceğinden özellikle önemlidir. Platable hepatositleri kullanan araştırmalar genellikle enzim indüksiyonunu yöneten düzenleyici yolları incelemeyi, böylece çeşitli ksenobiyotikler ve karaciğerin metabolik kapasitesi arasındaki karmaşık etkileşimlere ışık tutmayı amaçlamaktadır.

Hepatik siRNA teslimatı ve hedefleme stratejileri

RNA Girişiminde (RNAI) son gelişmeler terapötikler için yeni stratejiler getirdihepatik hedefli teslimatKüçük müdahale eden RNA'lar (siRNA'lar) kullanılarak. Anahtar bir yaklaşım, asialoglikoprotein reseptörü yoluyla hepatositlerin seçici alımını kolaylaştıran SiRNA moleküllerinin N - asetilgalaktosamin (GALNAC) ile konjuge edilmesini içerir (ASGPR). ASGPR, hepatositlerin yüzeyinde yüksek oranda ifade edilir ve endositik içselleştirmede merkezi bir rol oynarGalnac - siRNAkonjugatlar, onu karaciğer için hayati bir yol haline getirir - spesifik ilaç dağıtım.

İn vitro çalışmalar yaygın olarak kullanılırBirincil hepatosit siRNA transfeksiyonuverimliliğini ve özgüllüğünü değerlendirmek için tekniklerSiRNA Galnac Hepatosit Teslimat. Bu yöntemler, araştırmacıların fizyolojik olarak ilgili bir bağlamda gen yıkma etkilerini incelemelerine ve maksimum hücre içi alım ve gen susturma verimliliği için iletim formülasyonlarını optimize etmelerini sağlar.

Genel olarak, ASGPR - aracılı GalNAC - siRNA sistemleri kullanılarak RNA terapötiklerinin hepatik hedefli verilmesi, genetik karaciğer hastalıklarını ve metabolik bozuklukları tedavi etmek için oldukça spesifik ve viral olmayan bir yaklaşımı temsil ederek, hem translasyonel araştırmalarda hem de ilaç geliştirmede primer hepatosit modellerinin faydasını daha da güçlendirir.

Türler - Spesifik Hepatosit Ayrıntıları

İnsan hepatositleri

Platable İnsan Hepatositleri yüksek fonksiyonel alaka düzeyi sunarak insan ilaç metabolizmasını ve toksisitesini tahmin etmek için gereklidir. Özel plakalar üzerinde yapışmaları, metabolik enzim indüksiyonu, faz I/II metabolizması ve taşıyıcı aktivitesinin incelenmesine izin verir.

Sapık olmayan bir formatta,Askıya alma insan hepatositleri Ksenobiyotiklere hızlı bir şekilde yanıt verin, bunları hızlı metabolizma değerlendirmeleri, temizleme çalışmaları ve kısa - toksikolojik test terimi için ideal hale getirin.

Olmayan - insan primat hepatositleri

İnsanlara fizyolojik benzerlik yaparPlatable Cynomolgus maymun hepatositleriVePlatable Rhesus Maymun Hepatositleri İnsan sonuçlarıyla klinik öncesi çalışmaları köprülemek için değerlidir. İlaç metabolizmasını, enzim indüksiyonunu ve türleri - spesifik güvenlik profillerini değerlendirmek için kullanılırlar.

Süspansiyon sinomolgus Maymun hepatositleriVeSüspansiyon rhesus maymun hepatositleri Metabolik fonksiyonların ve akut yanıtların hızlı, karşılaştırmalı değerlendirmelerini etkinleştirin, kısa - terim verileri gerektiğinde kullanışlıdır.

Köpek hepatositleri

Öncelikle veteriner ve çeviri araştırmalarında kullanılır,Patlatılabilir köpek hepatositleriVePlatable Beagle Hepatositlerİlaç ve indüklenen karaciğer hasarını incelemek için in vivo karaciğer fizyolojisi ve veteriner farmasötiklerinin metabolizması.

Bunlar hızlı metabolizma çalışmaları sağlar ve süspansiyon modelindeki hızlı cirodan yararlanan erken - aşama tarama analizlerinde kullanılır.

Sprague - Dawley sıçan hepatositleri

BunlarPlatable Sprague - Dawley sıçan hepatositleriSprague - Dawley farelerinden izole edilir ve yapışkan veya platable bir formatta kültürlenir. Platable yönteminde, hücreler, stabil hücreler arası etkileşimler oluşturmalarını ve uzun süreler için karaciğer - spesifik fonksiyonlarını korumalarını sağlayan kültür yemeğine bağlanır. Bu format, Sprague - Dawley sıçan karaciğer hücrelerini kullanarak uzun - terim metabolik süreçleri, enzim indüksiyonu ve kronik toksikolojik değerlendirmeleri incelemek için özellikle uygundur.

Sapık olmayan bir durumda tutulduğunda,Süspansiyon Sprague - Dawley sıçan hepatositleriöncelikle kısa - terim deneyleri için kullanılır. Süspansiyon formatı, akut ilaç metabolizması çalışmaları ve derhal fonksiyonel yanıtların gerekli olduğu enzim kinetik değerlendirmeleri gibi hızlı testleri kolaylaştırır. Bu mod, farklı türler veya durumlar arasındaki akut metabolik yanıtları karşılaştırırken faydalıdır.

ICR/CD - 1 fare hepatositleri

ICR/CD - 1 farelerden izole edilmiş, bunlar Platable ICR/CD - 1 fare hepatositleriDaha uzun süreler boyunca kilit karaciğer fonksiyonlarını sürdürmelerine izin vererek kültür yemeğine uyun. Araştırmacılar, deneysel gözlemler için kararlı, genişletilmiş bir kültür süresi gerektiğinde ICR/CD - 1 fare hepatositleri için katlanabilir yöntemi tercih ederler.

Buna karşılık, süspansiyon ICR/CD - 1 fare hepatositleri bağlılık olmadan kültürlenir, böylece kısa - terim çalışmaları için uygun yuvarlak bir morfoloji tutulur.Süspansiyon ICR/CD - 1 fare hepatositleriMetabolik yanıtların hızlı bir şekilde değerlendirilmesine izin verir ve özellikle ön taramalarda veya yüksek - verim testine ihtiyaç duyulduğunda yararlıdır. ICR/CD - 1 farelerinde süspansiyon hepatositlerinin kullanılması, başlangıç ​​metabolik profillerini hızlı bir şekilde oluşturmaya ve bunları diğer türlerle veya farklı deney koşullarıyla karşılaştırmaya yardımcı olur.

Kedi hepatositleri

Platable format özellikle kronik toksisite değerlendirmeleri ve enzim indüksiyon deneyleri gibi sürekli karaciğer - spesifik fonksiyonlar gerektiren uzun süreli çalışmalar için kullanışlıdır. Kedi karaciğer hastalıklarına, ilaç - kaynaklı karaciğer hasarına ve kedilere özgü metabolik bozukluklara odaklanan çalışmalarda,Platable kedi hepatositleriSağlam bir model sunun. Onların bağlılıkları aynı zamanda morfolojik ve fonksiyonel uç noktaların tekrarlanabilirliğini arttırır, bu da onları veteriner farmakoloji ve hepatoloji araştırmalarında tercih edilen bir model haline getirir.

Süspansiyon formatı, ksenobiyotiklere acil hücresel yanıtların ölçülmesini kolaylaştırır, burada bağlanma eksikliği daha uzun vadeli kültürlerde görülen gecikmeyi en aza indirir.Süspansiyon kedi hepatositleri Bu nedenle, yeni bileşiklere maruz kaldıktan sonra erken biyokimyasal değişiklikleri ve potansiyel olumsuz reaksiyonları tanımlamak için çok önemlidir.

Tavuk hepatositleri

Kuş modellerinin temsilcileri olarak,Platable Tavuk Hepatositlerikarşılaştırmalı çalışmalarda, özellikle endokrin bozucu değerlendirmelerinde, karaciğer fonksiyonlarındaki evrimsel farklılıkları anlamak için kullanılır.

Süspansiyon tavuk hepatositleriKuşlarda karaciğer metabolizmasının hızlı, akut - faz çalışmalarını sağlar ve memeli meslektaşlarıyla doğrudan karşılaştırılabilir.

Diğer Türler

Diğer türler için, Platable minipig hepatositleri, Süspansiyon minipig hepatositleri, Platable Yeni Zelanda Beyaz Tavşan Hepatositleri, Süspansiyon Yeni Zelanda Beyaz Tavşan Hepatositleri Hepsi aynı zamanda ilacı tahmin etmek ve açıklamak için yaygın modeller - İlaç etkileşimlerini ve ilaçların sitotoksisitesini incelemek.

Çözüm

Hepatositler metabolizma, detoksifikasyon, safra üretimi ve protein sentezi yoluyla karaciğer fonksiyonunun korunmasında çok önemli bir rol oynar. Makale, primer hepatositler ile bunların kültürlenmiş formları - yerleştirilebilir ve süspansiyon hepatositleri - farklı deneysel hedefler için optimize edilmiş ayrımların altını çizmektedir. Platable hepatositleri, bağlılıkları ve uzun süreli yaşayabilirlikleri ile kronik etkiler, enzim indüksiyonu ve uzun - terim metabolik süreçleri incelemek için kritiktirken, süspansiyon hepatositleri akut analizler için hızlı ve düzgün test koşulları sunar. Ek olarak, analiz, insandan hayvan sistemlerine kadar çeşitli hepatosit modellerinin - ilaç metabolizmasını tahmin etmeye, hepatotoksisitenin değerlendirilmesine ve GalNAc konjugasyonu kullanılarak RNA - temelli müdahaleler gibi hedefli tedavilerin tasarlanmasına ne kadar çeşitli olan türlere kadar uzanır. Bu kapsamlı genel bakış, hepatositlerin hem klinik araştırmalarda hem de farmakolojik gelişimdeki ayrılmaz rolünü göstermektedir, bu da karaciğer fizyolojisi ve ilaç güvenliği ve etkinliğinin altında yatan mekanizmalar hakkında temel bilgiler sağlar.

Anahtar Kelimeler: Hepatositler, Birincil Hepatositler, Platable Hepatositler, Süspansiyon Hepatositleri, Hepatotoksisite, CYP450 Enzim İndüksiyonu, Primer İnsan Hepatositleri, Primer Hepatositler (PHH), Primer Heat, Primer Cynomolgus, Primer Heat, Primer Cynomolgus, Prim İnsan hepatositleri ， Platable Cynomolgus Monkey Hepatositler, Platable Rhesus Monkey Hepatositler, Platable Köpek Hepatositleri, Platable Sprague - Dawley Sıçan Hepatositler, Platable C5/CD - Hepatocytes, Plateable Golden, Syrian Hamster Hepatocytes, Plateable Feline Hepatocytes, Plateable Minipig Hepatocytes, Plateable New Zealand White Rabbit Hepatocytes, Plateable Chicken Hepatocytes, Suspension Human Hepatocytes, Suspension Cynomolgus Monkey Hepatocytes, Suspension Rhesus Monkey Hepatositler, süspansiyon köpeği hepatositler, süspansiyon beagle hepatositler hepatositler, süspansiyon sprague - Dawley sıçan hepatositleri, süspansiyon ICR/CD - 1 fare hepatositleri, süspansiyon C57BL/6 fare hepatositleri, süspansiyon Altın Syrian Hepatocytes, Susma Altın Syrian Hepatocytes, Susma Altın Syrian Hepatositler Hepatositler, süspansiyon minipig hepatositleri, süspansiyon Yeni Zelanda beyaz tavşan hepatositleri, süspansiyon tavuk hepatositleri ，ASGPR, GALNAC - SiRNA, Birincil Hepatosit SiRNA Transfeksiyonu SiRNA Galnac Hepatosit Verimi，Hepatik hedefli teslimat.