Siostaman inneal còmhdhail dhrogaichean airson riaghladh - a’ gèilleadh ri sgrùdaidhean còmhdhail Vitro

Faclan-luirg:Bileagan còmhdhail ABC, bileagan MDR1, bileagan BCRP, bileagan BSEP, HEK293, bileagan smachd còmhdhail, efflux neach-còmhdhail ABC, Efflux Transporter, Measadh Còmhdhail Soitheach, pasgan bileagan còmhdhail Efflux, sgrùdaidhean eadar-obrachadh dhrugaichean, drogaichean - eadar-obrachadh dhrugaichean (DDI), ICH -

Bathar IPHASE

 Nota: A’ cleachdadh meadhanan cultar cealla agus polylysine - pleitean còmhdaichte gus taic a thoirt do stèidheachadh agus cumail suas shiostaman faireachdainn leithid HEK293, còmhla ri bufairean còmhdhail aig diofar luachan pH agus HBSS gus àrainneachd measaidh còmhdhail a riaghladh, agus tuilleadh amalachadh bufairean ath-bhualadh vesicle, siostaman lùth MgATP / MgAMP, a bharrachd air sìoltachain microporous agus a’ cur bacadh air bufairean còmhdhail bho shruth-obrach iomlan. crìochnachadh, dealachadh, agus lorg, agus mar sin a’ ceadachadh measadh àbhaisteach in vitro air gnìomhachd còmhdhail efflux (a’ toirt a-steach MDR1, BCRP, agus BSEP) agus cunnart eadar-obrachadh dhrogaichean - dhrogaichean (DDI).

Bileagan còmhdhail ABC, a’ toirt a-steach bileagan MDR1, bileagan BCRP, agus bileagan BSEP, a’ toirt seachad àrd-ùrlar in vitro àbhaisteach airson a bhith a’ measadh gnìomhachd efflux còmhdhail ABC ann an HEK293 - siostaman faireachdainn stèidhichte. Tha na siostaman sin air an cleachdadh gu farsaing ann an cruthan measaidh còmhdhail vesicular gus dòighean còmhdhail membran a sgrùdadh fo chumhachan deuchainneach fo smachd. Bidh cruthan pasgan inneal còmhdhail Efflux, còmhla ri Transporter Control Vesicles, a’ dèanamh cinnteach à sònrachas assay, ath-riochdachadh, agus gèilleadh riaghlaidh. Bidh Iphase a’ toirt seachad siostaman còmhdhail dhrogaichean a tha a’ cumail ri Stiùireadh FDA agus EMA airson Sgrùdaidhean Eadar-obrachadh Dhrugaichean.

Bileagan MDR1 ann an efflux còmhdhail ABC agus assay còmhdhail vesicular

MDR1 bileaganair an cleachdadh gu farsaing gus gnìomhachd efflux còmhdhail ABC a chomharrachadh ann an siostaman measaidh còmhdhail vesicular. Ann an HEK293 - modalan faireachdainn stèidhichte, bidh bileagan MDR1 gu gnìomhach a ’meadhanachadh às-mhalairt substrate, a’ riochdachadh prìomh inneal efflux a tha an sàs ann an suidheachadh dhrogaichean agus strì.

Tha bileagan MDR1 nan innealan riatanach airson a bhith a’ sgrùdadh giùlan luchd-còmhdhail efflux agus sònrachas substrate. Tha iad air an cur an sàs gu farsaing ann an sgrùdaidhean eadar-obrachadh dhrugaichean gus measadh a dhèanamh air comas eadar-obrachadh dhrogaichean - dhrogaichean (DDI) aig ìre thràth - leasachadh dhrogaichean.

Bidh cruthan pasgan inneal còmhdhail Efflux anns a bheil bileagan MDR1 a’ toirt seachad siostaman àbhaisteach agus ath-ghintinn airson measadh gnìomh còmhdhail.

Bileagan BCRP ann an siostaman pasgan bileagan còmhdhail efflux

Bileagan BCRPnam pàirtean cudromach de shiostaman efflux còmhdhail ABC ann an HEK293 - àrd-ùrlaran measaidh còmhdhail vesicular stèidhichte. Mar phrìomh neach-còmhdhail efflux, tha BCRP a’ toirt buaidh mhòr air bith-ruigsinneachd dhrogaichean agus cuairteachadh clò.

Ann an sgrùdaidhean còmhdhail efflux, thathas a’ cleachdadh bileagan BCRP gus gnìomhachd còmhdhail substrate agus comas casg a thomhas. Tha na measaidhean sin air an cur an sàs gu farsaing ann an sgrùdaidhean eadar-obrachadh dhrugaichean gus measadh a dhèanamh air cunnart eadar-obrachadh dhrogaichean - dhrogaichean (DDI) co-cheangailte ri neach-còmhdhail - cead meadhanach.

Bidh siostaman pasgan inneal còmhdhail Efflux a’ toirt a-steach bileagan BCRP a’ toirt seachad innealan làidir agus so-ruigsinneach airson pròifil cungaidh-leigheis agus còmhdhail.

Bileagan BSEP ann an efflux còmhdhail ABC agus measadh sàbhailteachd

bileagan BSEPair an cleachdadh sa mhòr-chuid gus gnìomhachd efflux còmhdhail hepatic ABC a mheasadh ann an siostaman measaidh còmhdhail vesicular stèidhichte air HEK293. Tha pàirt deatamach aig BSEP ann an còmhdhail searbhag bile agus homeostasis grùthan.

Ann an sgrùdaidhean còmhdhail efflux, thathas a’ cleachdadh bileagan BSEP gus còmhdhail substrate agus casg a mheasadh, a tha riatanach airson ro-innse cunnart leòn grùthan air a bhrosnachadh le drogaichean -. Mar as trice tha feum air na measaidhean sin ann an sgrùdaidhean Eadar-obrachadh Dhrugaichean agus tagraidhean riaghlaidh a rèir stiùireadh ICH - M12.

Bidh siostaman pasgan vesicle còmhdhail Efflux anns a bheil bileagan BSEP a’ toirt seachad innealan àbhaisteach airson measadh sàbhailteachd hepatic.

Ceist agus Freagairt

Q1: Carson a thathas a’ cleachdadh bileagan còmhdhail ABC?
Bithear a’ cleachdadh bileagan còmhdhail ABC gus measadh ATP - gnìomhachd còmhdhail efflux an eisimeil in vitro, a’ toirt taic do sgrùdaidhean air sònrachas substrate, casg luchd-còmhdhail, agus cunnart eadar-obrachadh dhrogaichean - dhrogaichean (DDI) rè leasachadh dhrogaichean.

Q2: Carson a tha feum air MgATP ann am measaidhean còmhdhail vesicular?
Bidh MgATP a’ toirt seachad an lùth a tha riatanach gus luchd-còmhdhail ABC leithid MDR1, BCRP, agus BSEP a chuir an gnìomh, a’ comasachadh còmhdhail substrate gnìomhach; Mar as trice bidh MgAMP air a chleachdadh mar smachd àicheil gus còmhdhail gnìomhach a dhealachadh bho sgaoileadh fulangach.

Q3: Dè an t-àite a th’ aig diofar bhufairean còmhdhail pH anns na measaidhean sin?
Bidh bufairean còmhdhail aig diofar luachan pH a’ cuideachadh le bhith ag atharrachadh gnìomhachd luchd-còmhdhail agus ionachadh substrate, a’ ceadachadh suidheachaidhean as fheàrr agus buntainneach a thaobh eòlas-inntinn, gu sònraichte airson pH - luchd-còmhdhail mothachail mar BCRP.

Q4: Carson a thathas a’ cleachdadh polylysine - pleitean còmhdaichte ann an sgrùdaidhean còmhdhail?
Polylysine - bidh truinnsearan còmhdaichte a’ neartachadh gèilleadh cealla agus seasmhachd, a tha deatamach airson a bhith a’ cumail suas faireachdainn cunbhalach agus gnìomh pròtanan còmhdhail ann an cealla - measaidhean stèidhichte air leithid siostaman HEK293.

Q5: Ciamar a tha measaidhean còmhdhail vesicular a’ toirt taic do riatanasan riaghlaidh leithid ICH M12?
Bidh measaidhean còmhdhail siolandair a’ toirt seachad dàta àbhaisteach, ath-ghinte mu eadar-obrachaidhean drogaichean meadhan-còmhdhail, a tha riatanach airson tagraidhean riaghlaidh fo stiùiridhean FDA, EMA, agus ICH M12 airson measadh cunnairt DDI.