CGT ohuru ohuru - Lentivirus - ụgbọ ala na-emekọ ihe - mkpụrụ ndụ na-alụmgwụ

CGT ohuru ohuru - Lentivirus - ụgbọ ala na-emekọ ihe - mkpụrụ ndụ na-alụmgwụ

Usoro ọgwụgwọ sel ahụ bụ ọgwụgwọ ọrịa kansa nke na-eme ka usoro ahụ na-eme ka ahụ gharazie isi wee gbapụ sel cell cell. Mpempe akwụkwọ dị iche iche gụnyere cytokine na-egbu egbu, t - ọgwụgwọ sel, na ụgbọ ala - t sel cell. Cargbọ ala - T Ọgwụgwọ na-agụnye Rectogram Cels iji gosipụta ndị na-ahụ maka nje na-ebugharị (na-egosi nnukwu ihe ịga nke ọma na cals cancers Hematiological dị ka ọrịa leukemia na lymphoma na lymphoma.

Keywords: ụgbọ ala - t, lentivipal, ventivural vector, tracer lentivirus

Nkwadebe nke ugbo ala - TE cell

Na mkpokọta, usoro dị mkpa iji kwadebe ụgbọ ala - mkpụrụ ndụ T dị ka ndị a:

Isi mmalite: Dana - Creater Institute - Carr t - Ọgwụgwọ Cell Cell na-enyere ọtụtụ ndị ọrịa Miloma na-alọghachi ahụike

1. 1.Jorting (t - Cell na-agagharị)

Nzọụkwụ mbụ n'ịkwadebe ụgbọ ala - cels trts na-agagharị t - mkpụrụ ndụ si na mkpụrụ ndụ ọbara ọcha na ọbara nke onye ọrịa na-eme ihe na-enweghị atụ. A na-ejikarị usoro dị ka mkpofu bead ma ọ bụ na-agbapụta cytometry na-adọkpụ CD3 + - ọgaranya t na ọbara. Iji hụ na ịdị ọcha cell, usoro nhazi ahụ kwesịrị ịdị nkenke, na-ejide na ọnụ ọgụgụ zuru ezu nke dị elu - A na-enweta mkpụrụ ndụ.

2. 2stimulation (t - sel arụ ọrụ)

Ndị ewepụtara T - mkpụrụ ndụ na-arụ ọrụ na vitro, na-ejikarị aCD3 / CD28 T - Cells na-arụ ọrụ / Mwepụta Kit. Mkpụrụ ndụ t na-arụ ọrụ na-abanye na steeti na-arụ ọrụ, na-akwadebe ha maka inyefe Gene. Site na usoro a, ọrụ mkpụrụ ndụ na-akawanye nkwalite, na-enyere aka ịgbanwe mgbanwe nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na nzọpụta.

3. 3.Transfection (Gene deziting)

Mkpụrụ ndụ t na-eme ka mkpụrụ ndụ na-eme ihe iji gosipụta ihe na-enye nje na chimerier (ụgbọ ala). Usoro a na-eji yaVector Vectoriji wepụta mkpụrụ ndụ carres n'ime sel t. Lentivirus bu ihe eji eme ihe nke oma, site na uru nke ihe omuma a na - ejikota ihe eji eme ihe (dika car) n'ime sel sel. Site na oria cell na nbufe cell cell n'ime t cell DNA, Lentivirus na - enyere mkpụrụ ndụ aka iji gosipụta ụgbọ ala ogologo - Oge. Cargbọ ala ahụ gụnyere otu mpempe akwụkwọ mpịakọta (SCFV) nke antibud na-enyere mkpụrụ osisi na-enyere aka na mkpụrụ ndụ TEUM ma na-amalite mmeghachi omume nke mkpụrụ ndụ T. Dị ka egosiri na eserese 2

Isi mmalite: Singapore ụgbọ ala - Tel Cell

4. 4.Mgbe (cell proolifation)

Mgbe inyefe, ụgbọ ala - Ty Cells na-abanye Emplification Firm, ebe uto dị kaIl -na-agbakwunye iji kwalite nkwalite. Ebumnuche nke usoro a bụ iji hụ na ọnụ ọgụgụ zuru ezu nke ụgbọ ala - A na-enweta mkpụrụ ndụ t na-adị maka ndị ọrịa. A ga-eduzi usoro nchekwa ahụ n'okpuru ọnọdụ ndị na-enweghị atụ iji kwere nkwa sel na ọnụọgụ.

5. 2. Dabere na njikwa (QC)
6. Tupu imeghachi ya n'ime onye ọrịa, njikwa dị mma dị mkpa n'oge usoro nkwadebe. Cargbọ ala a kwadebere - Cell na-eme nnwale siri ikeGbaa mbọ hụ na ha dị ọcha, ọrụ, arụmọrụ ntụgharị, na nnabata ụkpụrụ ọgwụgwọ. Ọzọkwa, nnwale maka mmeru mmeghe ma ọ bụ mmeghachi omume ọjọọ dị mkpa iji hụ na nchekwa na nrụpụta ọgwụgwọ nke sel ndị ahụ mgbe ọ na-enwe onye ọrịa.

IMkpọnye nke Lentivirus na mkpụrụ ndụ na-enweghị ike

Teknụzụ nke Transferl dị mkpa na ọgwụgwọ sel na-egbochi ya, ọkachasị maka idezi na injinia na-edezi. A na-ejikarị vaịp ndị na-arịa ọrịa nje HIV - Ha nwere ike bute ihe abụọ na-esighi ike na nke na-abụghị mkpụrụ ndụ, na nchekwa ha ka mma site na usoro mkpụrụ ndụ ihe ndị na-agbanwe agbanwe iji gbochie ịmegharị. A na-ejikarị ọrụ ndị a na usoro ọgwụgwọ ihe ọmụmụ ihe, Gene deziting, na selogy bayoloji maka arụmọrụ na ịdị anya na-ekwupụta.

Isi mmalite: ObiOsh.com/products/ atụmatụ nchịkọta nke usoro nkwakọ ngwaahịa Lentivirus na sel na 293t

1. IFFEFEFADEFACGURA

Vector vector nwere ike ịrụ ọrụ nke ọma, dịka mkpụrụ ndụ ihe nketa, dị ka ụgbọ mmiri na-egbochi ya, na-etinye mkpụrụ ndụ ihe ndị a na mkpụrụ ndụ ahụ na-aga n'ihu na-aga n'ihu na cell sel na nká. Nke a dị elu - Enwere ike ịgbaghasị ikike transbiliction bụ isi ihe ịga nke ọma na ebe obibi.

1.Larenididididishion 

Tụnyere Vector ndị ọzọ na-efe efe, lentiviurses nwere obere ọgwụ. N'ihi ya, mgbe a na-eji lentiverys na-eji mkpụrụ ndụ na-egbochi ọrịa na-egbochi ya, usoro ahụ ji alụso ọrịa ọgụ na-ebute nzaghachi na-esighi ike na nje. Nke a na - enyere aka belata mmeghachi omume ọjọọ, karịsịa n'ogologo - Oge nlanarị nke mkpụrụ ndụ mgbe infusion, si na gbochie ịjụbiga ike ọgwụgwụ.

3.Hapịa ntụgharị iji gbochie mkpụrụ ndụ

Ventiviral vector nwere ike ịrụ ọrụ nke ọma ụdị mkpụrụ ndụ na-enweghị mgbochi dị iche iche,tumadi celks na sel nk. Site na Tenteviral transbiction, mkpụrụ ndụ na-eme ọgwụ mgbochi nwere ike ịnweta tumo dị iche iche, otú ahụ ka ha na-eme ka ikike ha lekwasịrị anya ma gbuo mkpụrụ ndụ tumo.

4.Reciation nke CeldDed Cell na Nkwado Cell 

Na Mindorcherapy,Mkpụrụ ndụ transdedNa-ezo aka na mkpụrụ ndụ na-enweghị mgbochi nke, mgbe ntụgharị, a na-ekwupụta ma na-eme ihe mgbochi - ime ememe. Ventiviral vector vectors nwere ike kpọpụta ụgbọ mmiri n'ime sel ndị a, na-enyere ha aka ịmata ma lekwasị sel tumo.Mkpụrụ ndụ iche ichebụ mkpụrụ ndụ akpụ nke a na - eme ma bibie ya site na mkpụrụ ndụ ndị a. Site na Tententiral transbiction, mkpụrụ ndụ na-eme ọgwụ mgbochi nwere ike ịkwalite usoro ha na ịghọta mkpụrụ ndụ, si otú ahụ na-eme ka nrụpụta ọgwụgwọ.

N'ebe a, iphase, onye ndu n'ime vitro Resert Regings na Lentivirus tafrations iji mee ka ihe dị mfe nke transbiced nke nje na-eme ka ọ dịkwuo mfe ma melite ọnụego nke ịghasa nke mkpokọta. Ngwaahịa ndị a na-enye otu a - Kwụsị ụgwọ maka ndị ahịa.

Iphase lentivirusProducts

Kitphase na-emekọ ihenwere ihe niile dị mkpa chọrọ makankwakọ ngwaahịa lentivirus, N'ụzọ dị mfe iji mfe ịmịpụta oge na ịchekwa oge na mgbalị. Kit a gụnyere:

• Ngwakọta nkwakọ ngwaahịa Lentivirus
• Transfect regrent
• egfp plasmid
• Ipherase lentivirus ịta nri

Kit a na-egbulite nnwale ahụ! Na-enweghị mkpa ịkwadebe ihe dị mgbagwoju anya, enwere ike ịmechaa nkwakọ ngwaahịa nke ọma site na naanị ịgbaso ntuziaka gụnyere.Uru nkwakọ ngwaahịa pụrụ iche na-agụnye obere oge nkwakọ ngwaahịa, na-enwe oke ngwụcha, na ọrụ dị mfe, na-eme ka ọ dị mma maka ndị mbido na nkwakọ ngwaahịa Lentivirus. Ihe ndị na-agụ ihe ọ bụla na-eme ka ọ dị mma iji hụ na ọfụma, tụkwasị obi, na nguzosi ike nke nje vil, si otú ahụ na-enye nkwado nka na ụzụ maka nkwadebe teknụzụ.

Ọzọkwa, iji nyere ndị ahịa aka ichekwa ego, IPhase emeela ka ha mepụta ma mepụta usoro nri Lentivirus, na-enye ngwa ngwa ngwọta ngwa ngwa.Site n'ịgwakọta na-enweghị atụ na ịta nri, na-esochi ya dị nkenke na centrifugation site na iji ọkọlọtọ centriftion, irighiri ihe na-edozi ahụ nwere ike itinye aka na ngwa ngwa. Usoro a anaghị achọ ihe dị mma ma na-eri ihe dị mma ma na-eri ego - Irè nhọrọ maka ndị ọrụ ụlọ nyocha kachasị.

Na mkpirikpi, imps lentivirus intration bụghị naanị nke ukwuu na-eme ka arụmọrụ ntụgharị dị elu mana na-enyekwa nkwado dị elu - ogo nje viotor maka nkwadebe cell. Ọ bụ ngwaahịa dị mkpa maka nyocha usoro usoro a na-eme, nyocha na-adịgide adịgide, na mpaghara ndị ọzọ.

Na nchịkọta, ịgba egwu, ọkachasị ụgbọ ala - T sel - T sel na ụgbọ - na-anọchite anya nduzi ọhụrụ na ọgwụgwọ ọrịa kansa ọgbara ọhụrụ. Site na usoro ziri ezi dị ka ịhazi sel, ịgbasa, mgbasawanye, na njikwa ahụike na-enweghị nsogbu na nke dị mma na nke na-enweghị mma maka ọgwụgwọ kansa.Lentiviral transbition, dị ka teknụzụ core, na-arụ ọrụ dị oke mkpa na nkwadebe nke ụgbọ ala - T na ụgbọ ala - mkpụrụ ndụ n'ihi arụmọrụ ya dị elu na nkwụsi ike.Site n'ọmụmụ ihe teknụzụ na-aga n'ihu, na-egbochi ike ịnye ndị ọzọ ọgwụgwọ ọhụụ maka ọtụtụ ndị ọrịa, na-enye ezigbo uru. N'ọdịniihu, a na-atụ anya na a na-eme ka ihe a na-atụgharị uche na-echebara ndị ọrịa kansa.

Iji gboo mkpa nke usoro nke Gene Transduction, ngosipụta, na nyocha ọrịa, nke iphase na-enye ndị na-ejikọ nri ndị na-eme achịcha na-enye ya, na ndị na-etinye uche. A na-etinye protein a na-acha akwụkwọ ndụ na-acha akwụkwọ ndụ, gfp), na gucuorescent protein protein, na luciferase, na-eme ka akụkụ sel dị mfe ma na vivo.

Na mgbakwunye, iphase nwekwara ike inye mmadụ abụọ tupu - ngwugwu tracer lentivuuses: gfp & lucifase na mtrer & luciferase. Enwere ike ịhọrọ ma ọ bụ jikọtara ya na mkpa nnwale, na-arụ ọrụ na-arụ ọrụ ma mee ka arụmọrụ dị adị - Oge nsuso na nlele nke sel.

IphaseIMmunatheryRkeeleredProducts

Na mgbakwunye na Lentivirus - Ngwaahịa metụtara metụtara ụgbọ ala - t ma ọ bụ ụgbọ ala - Inwe ihe omuma nke vitro, dika onye isi na CGT (Cell na Gene) na ubi ihe ndi ozo. Iphase etolitela ma mepụta leukocytes na pbmcs (akwara ọbara mononuclear) dịpụrụ iche site na leukapheris, yana mkpụrụ ndụ na-enweghị ike, iji kwado mmepe ngwa ngwa nke ọghọm.

Iphase ngwaahịa na-enye uru ndị na-esonụ, naAsambodo nke nyocha (Coa)Verified site na iphase dị maka ogbe ọ bụla.

Nzerendo 

A na-etinye ngwaahịa nke iphase site na ndị na-enye onyinye dị mma / anụmanụ ndị nwere ntụle nke ọma - nyocha, na nsonaazụ na-adịghị mma maka nyocha nje (HIV - HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV, HCV

Nruweisi  

IFEPAS na-enye ụdị enyemaka nke ndị na-enye onyinye site na nkwenye dị iche iche ma na-enweghị ihe doro anya na nke na-enweghị ihe.

Okwukwe

Ngwaahịa ndị ahụ nyere IFASAS, nwetara site na Leukapheresis, site n'aka ndị ọkachamara zụrụ azụ. A na-etinye ya nke ọma site na coa nkeonwe, na ngwaahịa ndị ahụ na-ebugharị ya n'okpuru ọnụ oyi siri ike iji hụ na nchekwa, nnyefe ngwa ngwa, na mmesi obi ike.

Ndị ọrụ nlekọta ndị ahịa

Impis na-enye elu dị elu - Ogo mgbe ị ga-ere ahịa, na-enyere aka dị mma na enweghị njedebe na usoro ikpe.