အမြဲမေးလေ့ရှိသောမေးခွန်းများ

Q: ဇီဝဖြစ်စဉ်တည်ငြိမ်မှုလေ့လာမှုများအတွက် microsomes နှင့် hepatocytes များကိုမည်သို့ရွေးချယ်ရမည်နည်း။ လိုအပ်ချက်ကိုဖြည့်ဆည်းရန်သူတို့ထဲကတစ် ဦး တည်းသာရွေးချယ်နိုင်ပါသလား။

ဖြေ။ ။ ဇီဝဗေဒတည်ငြိမ်မှုလေ့လာမှုမှာအသည်းကိုမှန်ဘီလူးဒါမှမဟုတ် Hepatocytes ရွေးချယ်ခြင်းဟာအဓိကအားဖြင့်ဇီဝဖြစ်စဉ်နှုန်းကိုရွေးချယ်ထားသည့်ဒြပ်ပေါင်းများ၏ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာဂုဏ်သတ္တိများပေါ်မူတည်သည်။ ယေဘုယျအားဖြင့်အသည်းကိုဆာပိုးမွှားများပိုမိုနှစ်သက်သည်, အထူးသဖြင့်ပေါင်းစပ်ထားသောမော်လီကျူးများပိုမိုများပြားသည့်အခါပျော်ဝင်ပါက phase metabolism သည် Mainabolic လမ်းကြောင်းသည်အဓိကဇီဝွဖစ်ခြင်းလမ်းကြောင်းဖြစ်သည်။ HepatCytes နှစ်ခု၏သက်သေအထောက်အထားများရှိသည့်အချက်နှစ်ချက်ရှိသည့်အချက်များအရ Mainabolism, Hydabolysis, Hydrosomism, Hydabolysom ​​တွင်အဓိကဇီဝြောမီပရိုတင်းများအဖြစ်ပေါင်းစပ်ထားသည့် Mainabolis Protein နှင့်အသည်းတိုက်ခန်းများတွင်ဇီဝွဖစ်ပျက်မှုမထင်ရှားပါ။ များသောအားဖြင့်ဇီဝဖြစ်စဉ်စနစ်တစ်ခုကိုလိုအပ်ချက်များနှင့်ကိုက်ညီရန်ရွေးချယ်နိုင်သည်။ ရှုထောင့်အားလုံး၏အခြေအနေများသည်ခွင့်ပြုပါကစနစ်နှစ်ခုလုံးကိုတစ်ချိန်တည်းတွင်ရွေးချယ်ခြင်းသည်အကောင်းဆုံးဖြစ်သည်။

မေး။ ။ အင်ဇိုင်း induction asay အတွက်အဓိက Hepatocytes ကိုအသုံးပြုရန်အဘယ်ကြောင့်လိုအပ်သနည်း။

A: cyp adzyme - asayay "ကူးယူခြင်း", "Post - Post - Post - Post - Post - Post - Post - Post - Protein ၏ပြုပြင်မွမ်းမံခြင်း" မှတက်ရန်လိုအပ်သည်။ ထို့ကြောင့်စမ်းသပ်မှုစနစ်သည်အသည်းဆဲလ်များဖြစ်သင့်သည်။

မေး။ ။ အင်ဇိုင်း induction assay အတွက်အလှူရှင်လူ့အကောင်းဆုံး Hepatocytes သုံးအလှူရှင်သုံး ဦး ကိုရွေးချယ်ဖို့ဘာကြောင့်ရွေးချယ်ဖို့လိုသလဲ။

ဖြေ။ ။ မူးယစ်ဆေးဝါးဖြည့်စွက်ခြင်းအတွက်လမ်းညွှန်ချက်များနှင့်မိတ်ဆက်ခြင်းအရအနည်းဆုံးအလှူရှင်သုံး ဦး ကိုအသုံးပြုသင့်ပြီးအလှူရှင်တစ် ဦး ချင်းစီ၏ induction ရလဒ်ကိုသီးခြားစီအကဲဖြတ်သင့်သည်။ စာရင်းအင်းအရသိသာထင်ရှားသောရလဒ်များအပြင်စမ်းသပ်မှုအတွက်အလှူရှင်သုံး ဦး ရွေးချယ်မှုသည်အပြန်အလှန်အားဖြင့်အချင်းချင်းအကဲဖြတ်ရန်ပိုမိုအရေးကြီးသည်။ အနည်းဆုံးအလှူရှင်တစ် ဦး မှရလဒ်သည်ကြိုတင်သတ်မှတ်ထားသောတံခါးခုံကိုကျော်လွန်ပါကမူးယစ်ဆေးဝါးကိုယ်စားလှယ်လောင်းသည်သွေးဆောင်နိုင်ပြီးနောက်ဆက်တွဲအကဲဖြတ်ရန်လိုအပ်သည်။

Q: Cyp Indzyme induction ကိုဘာကြောင့်သာအာရုံစိုက်ရတာလဲ။

A: Cypase Induction ကိုအာရုံစိုက်ရခြင်း၏အကြောင်းပြချက်မှာ Cypsase Induction ၏ယန္တရားကိုပိုမိုရှင်းလင်းစွာလေ့လာခဲ့ခြင်းဖြစ်သည်။ တစ်နည်းပြောရလျှင် Ugtase induction လေ့လာမှုမလိုအပ်သည့်အကြောင်းပြချက်မှာယန္တရားသည်မရှင်းလင်းသေးပါ။ သို့သော်, ဤအချက်သည် Ugtase ကိုသွေးဆောင်မည်မဟုတ်ဟုမဆိုလိုပါ။ လမ်းညွှန်ချက်များအရသယ်ယူပို့ဆောင်ရေးနှင့်အဆင့် 2 ဇီဝွဖစ်ခြင်းအင်ဇိုင်းများနှင့်အတူ invucks သို့မဟုတ် inhibitors များအတွက်စံသတ်မှတ်ထားသောခွဲခြားစနစ်မရှိပါ။

မေး။ ။ ပြန်လည်အသက်သွင်းပြီးနောက်မှာထပ်ပြီးအဓိက Hepatocytes ဘယ်လိုနေရတယ်,

A: Pasteurized မူလတန်း hypatocytes များကိုယေဘုယျအားဖြင့်အင်ဇိုင်း induction asay များအတွက်အသုံးပြုသည်။ ဆဲလ်ပြန်လည်ထူထောင်ရေးပြီးနောက်ဆဲလ်များကိုဖြည့်စွက်ထားသောအလတ်စားများနှင့်သင့်လျော်သောအာရုံစူးစိုက်မှုနှင့်အတူဆိုင်းငံ့ထားသည်။ capates; ထို့နောက်ဆဲလ်များကို 4 မှ 6 နာရီအတွင်း pasteurize လုပ်နိုင်သည်။ ဆဲလ်များကိုနံရံနှင့်ကပ်ထားပြီးနောက် Maintenance အလတ်စားကို 18 နာရီကိုပြန်လည်တည်ထောင်ရန် 18 H ကိုအစားထိုးခြင်းနှင့်ထိန်းသိမ်းထားသည်။ ထို့နောက်အင်ဇိုင်း induction assay ကိုဇီဝဖြစ်စဉ်လှုပ်ရှားမှုနှင့် MRNA induction leven ကိုရှာဖွေရန်လုပ်ဆောင်နိုင်သည်။ သံသရာတစ်ခုလုံး၏ရှုထောင့်ရှုထောင့်မှကြည့်လျှင် HepatCytes များကိုနံရံကပ်ဘက်လိုက်ပြီးနောက် 6 ရက်မှ 7 ရက်အထိထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။ အချိန်ကုန်လွန်လာသည်နှင့်အမျှဆဲလ်နံရံလိုက်နာမှုပြည်နယ်သည်ယိုယွင်းလာပြီးဆဲလ်များက ဆက်. ရပ်ဆိုင်းထားလိမ့်မည်။

အကယ်. Adherement Hepatocytes များသည်ယဉ်ကျေးမှုမဟုတ်လျှင် 4 နာရီမှ 6 နာရီအတွင်း၎င်းတို့အားကောင်းမွန်သောအခြေအနေတွင်ထိန်းသိမ်းထားနိုင်ကြောင်းအတည်ပြုပြီးပါ။ ကျနော်တို့ကပိုရှည်ကာလအတွက်စိစစ်အတည်ပြုလွှဲမခံကြပြီမဟုတ်။

မေး။

A: အစိုင်အခဲတစ်သျှူးများနှင့်ကိုယ်တွင်းအင်္ဂါများမှဆဲလ်အများစုကိုနံရံကပ်ထားသော်လည်းယဉ်ကျေးမှုတွင်ရှိသည့်အချိန်တွင်ဆဲလ်များအားလုံးမထားပါ။ Vitro ။ ဆဲလ်များသည်နံရံများရှိ, တစ်ချိန်တည်းမှာပင်တစ်ချိန်တည်းတွင်နံရံများဆက်ရှိနေသည့်ဆဲလ်များသည်တိကျသောယဉ်ကျေးမှုအလတ်စားနှင့်အထူး Pro, Laminin, Phaminnogelinogen, Pamininin; နိဂုံးချုပ်အနေဖြင့်နောက်လိုက်ဆဲလ်များကိုဆိုင်းငံ့ဆဲလ်များအဖြစ်အသုံးပြုနိုင်သည်။

မေး။ ။ Adherent Wall Call Design Discovering HepatCytes ကိုအသုံးပြုခြင်း၏အားသာချက်များ / အားနည်းချက်များသည်အဘယ်နည်း။ ဆုံးဖြတ်ချက်သတ်မှတ်ချက်ကဘာတွေလဲ။

A: HepatCytes ကိုအထီးကျန်ပြီးတဲ့နောက်မှာသူတို့ကိုဆိုင်းငံ့ထားခြင်း, CytoChrome P450 ၏လုပ်ဆောင်မှုကိုဆိုင်းငံ့ထားသည့်အဓိကအားဖြင့်အဓိက Hepatocytes မှ Cytochrome P45ME ၏လုပ်ဆောင်မှုသည်ပထမ ဦး ဆုံး 4 မှ ~ 6H အတွက် Vivo သည်အစဉ်အလာတွင်အများဆုံးနှင့်ကိုက်ညီသည်။ Vivo သည်အချိန်ကြာမြင့်စွာနှင့်အတူလျင်မြန်စွာလျော့နည်းသွားသည်။ ထို့ကြောင့်ဆိုင်းငံ့ခြင်း HepAtCytes များကိုယေဘုယျအားဖြင့်ဇီဝဖြစ်စဉ်တည်ငြိမ်မှုလေ့လာမှုသို့မဟုတ်မက်ဖီးလ်လိုပရိုဖိုင်းလေ့လာမှုအတွက်အသုံးပြုသည်။ Adherent Wall တွင်ယဉ်ကျေးမှုရှိအဓိက Hepatocytes များသည်ပုံမှန် hepatocytes ၏ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာလက္ခဏာများနှင့်ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာလုပ်ဆောင်မှုကိုထိန်းသိမ်းရန်အတွက်ပျက်စီးဆုံးရှုံးမှုများမှပြန်လည်နာလန်ထူရန်အချိန်အလုံအလောက်ရှိသည်။ ထို့ကြောင့်၎င်းတို့ကိုယေဘုယျအားဖြင့်အင်ဇိုင်းအညွှန်းလေ့လာမှုများ, မူးယစ်ဆေးဝါး cytotoxicity လေ့လာမှုများ, ဆေးဘက်ဆိုင်ရာတည်ငြိမ်မှုများ,

လောလောဆယ်ကျွန်ုပ်တို့သည်ဝက်ဘ်စာမျက်နှာအွန်လိုင်းဝယ်ယူမှု 0 န်ဆောင်မှုကိုမပေးပါ။ မှတ်ပုံတင်ပြီးနောက်တွင်စျေးဝယ်ခြင်းနှင့် 0 င်ရောက်ပြီး 0 င်ရောက်ရန်အတွက်ကုန်ပစ္စည်းများသည်ရည်ညွှန်းသည်။ အကယ်. သင်၏ကုန်ပစ္စည်းများကို 0 ယ်ရန်လိုအပ်ပါကဆက်သွယ်ရန်အချက်အလက်များကိုဆက်သွယ်ရန်အချက်အလက်များကိုဆက်သွယ်ပါ။ ကျွန်ုပ်တို့၏ 0 န်ဆောင်မှုများကိုပြီးစီးရန်အချိန်မီကျွန်ုပ်တို့နှင့်ဆက်သွယ်ပါမည်။

Q: တိကျသောပရိုတိန်း Binding သည် Protein Binding သည်စမ်းသပ်မှုရလဒ်များကိုမည်သို့အကျိုးသက်ရောက်သနည်း။

A: မူးယစ်ဆေးဝါးကိုယ်စားလှယ်လောင်းကိုမဲပေးလျှင်အထူးသဖြင့် microsomal ပရိုတိန်းများသို့အထူးသဖြင့် Microsomal ပရိုတိန်းများသို့ပြောင်းလဲခြင်းသည်ကွဲပြားသည်။ ပရိုတိန်းအာရုံစူးစိုက်မှုတိုးလာသည်နှင့်အမျှကီလိုမီတာတန်ဖိုးတိုးလာသည်။ ထို့အပြင်ပိုးမွှားများပေါ်ရှိပရိုတင်းများရှိမူးယစ်ဆေးဝါးကိုယ်စားလှယ်များ၏စည်းနှောင်ခြင်းသည်မတူညီသောဓာတ်ခွဲခန်းများနှင့်ကွဲပြားသောစနစ်များမှရလဒ်များအတွက်ကြီးမားသောကွဲပြားမှုများကိုဖြစ်ပေါ်စေနိုင်သည်။

Q: Phase I or Phase II Metabolic Metabolic Metabolic Metabolic Metabolic Metabolic Stabeticatic quite တွင်အသည်းအသင်းပရိုတိန်းကိုအကြံပြုထားသည့်အသည်းအသင်းပရိုတိန်း၏အကြံပြုချက်ကိုအကြံပြုထားသည့် 1 Mg / ML

ဖြေ Hepatic Microsomes ကိုအရင် droute လုပ်ဖို့မလိုပါဘူး, ကိရိယာအစုံရှိ Hepatic mostbices ၏အာရုံစူးစိုက်မှုသည် 20 မီလီဂရမ် / ML နှင့်စမ်းသပ်မှုစနစ်ရှိ Hepatic Microsomes ၏နောက်ဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှုမှာ 0.1 - 1 MG / ML,

မေး။ ရှင်းလင်းရေးတွက်ချက်မှုသည်အသည်းအဆီများနှင့်အတူတူဖြစ်သည်။

A: အဓိက Hepatocyte Metabolic Metabolic Metabolic Metabory Aspactic asay အတွက်အကြံပြုထားသည့်ဆဲလ်သိပ်သည်းဆသည် 0.5 မှ 2 × 10 ဖြစ်သည်⁶ ဆဲလ်များ / ml နှင့်ရှင်းလင်းရေးတွက်ချက်မှုများနှင့် Hepatic Microsomal Metabolic Michabolic Michabolic Michabinic Aspactity Aspaction ၏ရလဒ်များကိုလေ့လာခြင်းသည်တသမတ်တည်းဖြစ်သည်။

Q: PBS Buffer တွင်အဓိကပါဝင်ပစ္စည်းများကဘာလဲ။ က KCL နှင့် NACL ပါ 0 င်ပါသလား။

A: PBS Buffer ၏အဓိကအစိတ်အပိုင်းများသည် K ဖြစ်သည်₂hpp₄ နှင့်ဌ₂PO₄နှင့် KCL နှင့် NACL အခမဲ့ဖြစ်ကြသည်။

မေး။ ။ ဖော့စဖိတ်ခံရသူတွေရဲ့ရည်ရွယ်ချက်ကဘာလဲ။ ဖော့စဖိတ်ကိုဘာကြောင့်လိုအပ်ရတာလဲ။

A: Phosphate Buffer ကိုဇီဝဇီ 0 န်ဆောင်မှုကိုဇီ 0 တ်ထုဝန်းကျင်ကိုတုန့်ပြန်ခြင်းနှင့်ဖော့စဖိတ်သည်ခန္ဓာကိုယ်၏အရည်ပတ်ဝန်းကျင်ကိုထိန်းသိမ်းရန်အတွက်အရေးအကြီးဆုံးကြားခံတစ်ခုဖြစ်သည်။

Q: အင်ဇိုင်းအတွက်ပုံမှန်အတိုင်း setting ကို - Everceptor အာရုံစူးစိုက်မှု? စနစ်စမ်းသပ်ခြင်းခံရဖို့စနစ်၏ပျော်ဝင်မှုအတွက်ဆင်းရဲနွမ်းပါးလျှင်ဖြေရှင်းနည်းရှိပါသလား။

ဖြေ။ ။ အင်ဇိုင်းအညွှန်းကိန်းတွေဟာကွဲပြားခြားနားသောပြင်းအား 3 ခုဖြင့်တပ်ဆင်ထားရန်လိုအပ်သည်။ အကယ်. aqueous အဆင့်ရှိပျော်ဝင်မှုသည်ဆင်းရဲနွမ်းပါးလျှင်အော်ဂဲနစ်အရည်ပျော်ပစ္စည်းကိုအရည်ပျော်ပစ္စည်းအဖြစ်ရွေးချယ်နိုင်သည်။ DMSO, သို့သော် system ထဲသို့ထည့်သွင်းအော်ဂဲနစ်အရည်ပျော်ပစ္စည်းကိုထိန်းချုပ်ရန်လိုအပ်သည်။

မေး။ ။ ဇီဝဖြစ်စဉ်တည်ငြိမ်မှုလေ့လာမှုများတွင်စမ်းသပ်ခြင်းစနစ်နှစ်ခု, အသည်းတိုက်များနှင့်အဓိက HepatCytes များကိုစမ်းသပ်ရန်လိုအပ်သည်။

A: Hepatic Microsomes များသည်အလင်းရောင်အမြှေးပါးများဖြစ်သည်။ ကိုယ့်ကိုယ်ကိုဖွဲ့စည်းထားသောအဆောက်အအုံများကိုဖွဲ့စည်းထားသောအဆောက်အအုံများ, အဓိက HepatCytes (PHCS) သည်အသည်း၏ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာလုပ်ဆောင်မှုများကိုထိန်းသိမ်းထားသောတိရိစ္ဆာန်များနှင့်တိုက်ရိုက်အထီးကျန်ပြီးနောက်ချက်ချင်းပင်ယဉ်ကျေးမှုများယဉ်ကျေးမှုဖြစ်သည်။ ဇီဝဖြစ်စဉ်တည်ငြိမ်မှုလေ့လာမှုတွင်ကုန်ကျစရိတ်ကိုစဉ်းစားရန်မလိုအပ်ပါ, စမ်းသပ်မှုစနစ်နှစ်ခုကိုတစ်ချိန်တည်းတွင်စစ်ဆေးရန်ရွေးချယ်နိုင်သည်။ သို့မဟုတ်သင့်လျော်သောစမ်းသပ်စနစ်ကိုပေါင်းစပ်ထားသောဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာဂုဏ်သတ္တိများနှင့်အညီရွေးချယ်နိုင်ပါသည်။ ယေဘုယျအားဖြင့်အသည်းကိုဆာပိုးမွှားများသည်သန့်စင်မော်လီကျူးများပိုမိုများပြားလာသည့်အခါအကောင်းဆုံးရွေးချယ်မှုဖြစ်သည်။ ပျော်ဝင်နိုင်သည်။ နှစ်ခု - အဆင့် 2 တွင် Phase Metabolism သည်အဓိကလမ်းကြောင်းဖြစ်သည်, Hydrosis သည်အဓိကဇီဝြောကျသောလမ်းကြောင်းသည်အလွန်မြင့်မားသည်။

မေး။ ။ microsomes ရဲ့အာရုံစူးစိုက်မှုဟာဇီဝဖြစ်စဉ်တည်ငြိမ်မှုစမ်းသပ်မှုမှာဆန်းစစ်နေသလား။ အလွန်မြင့်မားသောသို့မဟုတ်အလွန်နိမ့်ခြင်း၏အကျိုးသက်ရောက်မှုကဘာလဲ။

A: ဇီဝဖြစ်စဉ်တည်ငြိမ်မှုစမ်းသပ်မှုတွင်ပရိုတင်းစုစုစုဒုံသည်ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာနှုန်းကိုသက်ရောက်စေလိမ့်မည်။ အလွန်မြင့်မားသော microsomal ပရိုတိန်း၏အာရုံစူးစိုက်မှုကအာရုံစူးစိုက်မှုကမလွယ်ကူပါလိမ့်မယ်။ အနိမ့်အနိမ့်အနိမ့်အမြင့်ကိုအာရုံစူးစိုက်မှုအလွန်အမင်းအာရုံစူးစိုက်မှုကမူးယစ်ဆေးဝါး၏အရေးမပါဇီဝွဖစ်နိုင်မှုကို ဦး ဆောင်လမ်းပြပေးနိုင်သည်။