index

Momwe mungakonzekerere malo ogulitsira a Condey?

Momwe mungakonzekerere malo ogulitsira

AConde, omwe amadziwikanso kuti ndi wosakwatiwa - cell gel ectrophoresis, ndi njira yokhazikika komanso yosiyanasiyana yopanga DNA yowonongeka maselo amodzi. Kukonzekera Kwambiri - MtunduChovala akugwiras ndi gawo lotsutsa lomwe limatsimikizira kudalirika ndi kubereka kwa zotsatirazo. Nkhaniyi ikufuna kupereka chitsogozo chokwanira pokonzekera slidet a comtay, kuphatikiza kuzindikira kuchokera kwa akatswiri m'munda. Tiziphimba gawo lililonse lofunikira, kuchokera ku kusankha kwa maselo kutanthauzira deta, ndikuonetsetsa kuti mukwaniritsa zabwino zonse.

Mafala Akutoma Nawo Cold ndi Kufunika Kwake

● Mwachidule za Conde Tay

Wosankhika, wopangidwa kumapeto kwa ma 1980s, ndi chida champhamvu chofuna kudziwa kusiyana kwa DNA kumatha m'maselo amodzi. Amagwiritsidwa ntchito kwambiri m'minda ngati kuyesa kwa genokoxicity, exoxulal epidemiology, ndi kubereka zachilengedwe. Mfundo ya munthu wosankha imaphatikizapo maselo ku Agarose, ndikuwayimba kuti achotse ma nembanemba ndi mapuloteni, kenako ndikuyika DNA ya Elcophyroresis. Chithunzicho, chofanana ndi condet, chimalola kuchuluka kwa kuwonongeka kwa DNA.

● Mapulogalamu mu DNA Kuzindikira kwa DNA

Chovala chofunika kwambiri ndichofunika kwambiri pakuwona kuwonongeka kwa DNA chifukwa cha poizoni, ma radiation, ndi mankhwala. Amagwiranso gawo lofunikira pakuwunika momwe ma DNA amathandizira pamitundu yosiyanasiyana ya maselo. Ofufuzawo amagwiritsa ntchito katswiri wofufuza khansa, kukalamba, ndi matenda ena olumikizidwa ndi kuwonongeka kwa DNA.

● Kufunika koyesedwa kwa genotoxicity

Kuwongolera ndi kufufuza kafukufuku wa chiwonetsero cha Stat sangathe kuwonekera. Amakhala ngati chida choyambirira choyambirira chodziwitsa zinthu zomwe zingatheke. Zotsatira zochokera pamalingaliro awa zitha kukopa chisankho - kupanga njira mu mankhwala osokoneza bongo ndi kusinthika kwachilengedwe.

Kusankhidwa kwa maselo oyenerera a Couttay

● Mitundu ya maselo omwe amagwiritsidwa ntchito

Kusankhidwa kwa maselo kumatha kukhudza zotsatira za wovomerezeka. Maselo omwe amagwiritsidwa ntchito kwambiri amaphatikizira ku lymphocytes, maselo a Buccal, ndi mizere yosiyanasiyana yam'manja. Ofufuzawo nthawi zambiri amasankha mitundu ya khungu kutengera zolinga za Phunziroli ndi kuperewera kwa zitsanzo.

● Maganizo pa kusankha kwa cell

Mukamasankha maselo, onani zinthu monga kupezeka kwa foni, kuwonongeka kwa DNA, ndi kufunikira kwa funso. Mwachitsanzo, lymphocytes amapezeka mosavuta kuchokera m'magazi ndipo amafunikira kwa othandizira a genotoxic, kuwapanga kukhala chisankho chabwino kwa kafukufuku ambiri.

● Zokhudza zotsatira

Zomwe adachokera komanso momwe maselo amathandizira kuwonongeka kwa DNA ndi kuyankha kwa cell pom mankhwala. Chifukwa chake, kusankhana kwa maselo ndi magwiridwe antchito ndikofunikira kuti athe kupeza zotsatira zodalirika komanso zobereka mu litams.

Kukonzekera kwa Agarose Gels

● Mitundu ya Agarose kugwiritsa ntchito

Kusankha A Karose yoyenera ndikofunikira kuti umpaki umphumphu. Malo ocheperako agarose amasankhidwa chifukwa chimakhazikika mwachangu ndikuchepetsa kuwonongeka kwa DNA pakukonzekera. Okwera - Agarse yapamwamba yochokera kwa omwe amamupatsa, monga ochokera ku Wokhulupirira Wodalirika kapena Wogulitsa, akulimbikitsidwa wopanga, akulimbikitsidwa.

● Agarose acrose ndikukonzekera masitepe

Nthawi zambiri, 1% yotsika kwambiri yosungunuka agarose. Sungunulani Agarose mu buffer woyenera, muzitenthetsa mpaka madzi osungunuka kwathunthu, kenako ozizira kutentha omwe ali otetezeka kwa cell kubzala. Onetsetsani kuti Agarose ndi mfulu kwa thovu ndi zinyalala kuti mupewe zinthu zonena.

● Kuonetsetsa kuti mulingo wabwino kwambiri

Mtundu wa Agarose gel amatha kukopa chidwi cha malingaliro ndi kubereka. Njira zoyenera zogwiritsira ntchito ndi kukonzekera ndizofunikira kupanga gel homogenous gel osasinthika magawo osiyanasiyana. Izi zikuwonetsetsa kuti mapangidwe a Codes and Kuwona ndi yunifolomu.

Kuyimitsidwa kwa maselo ndi ma cell ku Agarose

● Kukonzekera kuyimitsidwa kwa cell

Yambani ndikupeza mmodzi - kuyimitsidwa kwa maselo. Kwa maselo opembedza, izi zimaphatikizapo tryirpsinization, kutsatiridwa ndi kutumizirana ndi kusambitsa. Maselo oyambilira ngati lympucytes, centrifugation ndi kubwereketsa mu buffer yoyenera ndikofunikira. Gwiritsani ntchito hemocytometer kuti muwonetsetse kuti khungu laselo lizikhala ndi zaka pafupifupi 1 x 10 ... maselo 5 / ml.

● Kuchotsa maselo osokoneza bongo otsika agarose

Sakanizani kuyimitsidwa kwa cell ndi pre ne - FredED Fring Point Agarose pamlingo womwe umatsimikizira kugawa yunifolomu. Mwachangu ma piptte osakaniza pa Pres - Wolemba Cones Assay Slides, omwe amatha kugulidwa kuchokera ku fakitale ya Stumer Slider kapena wogulitsa wodalirika. Gwiritsani ntchito chipilala chofalitsa agarose makamaka ndikuletsa thovu.

● Kufalitsa maselo ku slide

Agarose atafalikira, lolani kuti ziwongolere bwino kuziziritsa ndikulimba pamtunda wozizira kapena malo owiritsa. Gawoli liyenera kuchitidwa bwino kuti agarose azikhala osagwirizana, zomwe zingakhudze mawonekedwe a makonda pakuwunika.

Makisi a ma cell

● Funlis Yankho

Njira yothetsera fumbi nthawi zambiri imakhala ndi mchere wambiri komanso zotchinga, monga mtedza, edta, ndi triton x - 100

● Njira ya Lysis ndi Mikhalidwe

Ikani ma slider mu lysis yankho la phosis ndikusintha pa 4 ° C kwa ola limodzi, ngakhale kutalika kwa nthawi nthawi zambiri amakonda. Onetsetsani kuti nsalu ya lysis imakutidwa kuti isapewe ndi kuipitsidwa. Zochitika za phostisis zimapangitsa kuti tichotse magulu am'manja popanda kuvulaza DNA.

● Kufunika kwa ma cell ma cell lysis

Ulusa wosakwanira umatha kubweretsa mapangidwe osavomerezeka ndi deta yosadalirika. Chifukwa chake, ndikofunikira kutsatira protocol mokwanira, kuonetsetsa njira yothetsera vutoli ndi nthawi youmirira ndi nthawi yokwanira kuti musokoneze maselo.

Alkaline sauning ndi electrophores mikhalidwe

● Kukonzekera njira ya alkaline

Njira ya alkaline, nthawi zambiri kusakanikirana kwa Naoh ndi Edta, amagwiritsidwa ntchito kuti asayike DNA. Kukonzekera kwake kuyenera kuchitidwa mosamala, kuonetsetsa ph ndi molarity. Mwatsopano konzani mwatsopano yankho kuti musunge bwino.

● Alkaline sazindikira kufunikira ndi nthawi

Tsimikizani masikono mu njira ya alkaline, nthawi zambiri kwa 20 - mphindi 40, kulola kuti DNA imasungunuke. Izi ndizofunikira pakuzindikira zokhazokha - Strand Stofts ndi Alkali - malo a Labile. Konzani nthawi yosagwirizana yotengera pa protocol yanu.

● Kukhazikika kwa ectrophores ndi magawo

Khazikitsani thanki ya electrophores yokhala ndi chimfine cha alkinefis ectiyis. Ikani zingwe mu thanki, kuonetsetsa kuti amizidwa. Ikani magetsi osasinthika (nthawi zambiri mozungulira 25 v) kwa 20 - Mphindi 30. Mikhalidwe ya electrophores, kuphatikiza makulu ndi nthawi, iyenera kuthandizidwa kuti ikwaniritse bwino kwambiri za DNA.

Kulowererapo komanso njira yokhazikika

● Kukonzekera kwa BUTRARY Kukonzekera ndi kugwiritsa ntchito

Pambuyo pa electrophoresis, amasinthanitsa ma slider kuti aletse zomwe wachita ndikukhazikika. Buffer yodziwika bwino kwambiri imakhala ndi Tris pa Ph ya 7.5. Pakangotsuka pang'ono mu buffer iyi kangapo kuti muchotse njira zonse za alkaline.

● Njira zokhala

Kutulutsa kosaloledwa ndi DNA yolumala ndi - utoto womanga, monga ethiidium bromide kapena sybri green. Ethiidium bromider, pomwe apamwamba, amafunika kukonza mosamala chifukwa cha mphamvu yake ya Mutagenic. Sybri green imapereka njira yotetezeka ndi chidwi chachikulu. Pukutsani masikono mu yankho lokhazikika kwa nthawi yoyenera (nthawi zambiri 15 - mphindi 30) mumdima.

● Kuwona kwa DNA DATETS

Mukangoyambitsa, muzimutsuka pang'onopang'ono kuti muchotse banga lambiri. Pendani zitseko pansi pa ma microracescope. Khalidwe la mawonekedwe ndi microscope ya microscope ndilofunikira kuti mupeze zithunzi zomveka bwino za matope.

Ma microscopy ndi chithunzithunzi

● Kusankha ma microscope yoyenera

Ma Microrocope a fluorescence okhala ndi sewero lovomerezeka ndikofunikira kuti powona ku DNA lokhazikika. Sankhani ma microscope omwe ali ndi vuto lalikulu ndipo kamera ya kamera yomwe imatha kugwirizanitsa zithunzi zatsatanetsatane za omwe amapezeka.

● Kulanda - Zithunzi Zake

Zithunzi zojambulira za osachepera 50 pa slide kuti zitsimikizire tanthauzo la manambala. Onetsetsani kuti kuwunikira ndikuyang'ana kuti mupewe zinthu zakale. Katswiri woyenera wa microscope ndi makonda a kamera amatha kukulitsa mawonekedwe.

● Mapulogalamu a kusanthula kwa Comment

Mapulogalamu angapo mapulogalamu amapezeka kuti ayang'anire kuwunika kwa Comtat, monga kolowera ndi casp. Mapulogalamu awa amayeza magawo ngati kutalika kwa mchira, kulimba kwambiri, ndi mphindi yovuta kwambiri pakuwonongeka kwa DNA.

Kuvutitsa Nkhani Zofananira

● Mavuto Ambiri

Nkhani zofala mu lingaliro la condet zimaphatikizapo mbiri yabwino kwambiri, mapangidwe otsika, komanso zotsatira zosagwirizana pakati pa slide. Mavutowa amatha kuchokera ku magwero osiyanasiyana, kuphatikizaponso kuchuluka kwa cell, kukonzekera kwa gel gel, ndi ma lysis olakwika kapena electrophoresis.

● Njira zothetsera njira zodzitchinjiriza

Kuti muchepetse bwino kwambiri olankhula bwino, onetsetsani kuti ma reagents onse ndi ma gels ndi omasuka ku zodetsedwa. Kwa mapangidwe otsika, onetsetsani kuti kusintha kwa maselo ndikokwera, ndipo mikhalidwe yam'madzi ndi yoyenera. Kukonzekera kosasinthika kosasintha ndi Protocol moyenera ndi njira zazikulu zodzitetezera.

● kuonetsetsa kuti kubereka ndi kulondola

Kubweretsa Kubereka mu lingaliro la Cout kumafuna kukhazikitsanso ma protocol ndikutsimikizika pafupipafupi kwa gawo lililonse. Zovala za Calbibrary pafupipafupi, gwiritsani ntchito - zolimbitsa thupi;

Kutanthauzira kwa data ndi zotsatira za malipoti

● Kusanthula magawo

Magawo ofunikira pakuwonongeka kwa DNA amaphatikiza kutalika kwa mchira, komwe kumawonetsa kukula kwa DNA kusamukira kwa DNA, mphamvu yakuchira, yomwe imatanthawuza kuchuluka kwa DNA mu mchira. Nthawi ya aolive, muyeso wophatikizika, umagwiritsidwa ntchitonso.

● Kuganizira zowerengera pamawu a deta

Kusanthula kolondola kolondola ndikofunikira kutanthauzira kwa data. Gwiritsani ntchito mayeso oyenera kufanizira ma DNA kuwonongeka kwa DNA pakati pamagulu osiyanasiyana. Onetsetsani kuti deta yochokera ku ma slide ambiri ndi zoyeserera zimakhazikika ku rainicality.

● Kupereka ndi kutanthauzira

Fotokozerani zotsatira zanu momveka bwino komanso mwachidule, pogwiritsa ntchito ma graphs ndi matebulo kuti mufotokozere zazikulu zomwe zapezedwa. Kambiranani tanthauzo la kuchuluka kwa zowonongeka za DNA zomwe zimachitika komanso zomwe zingachitike pazinthu zachilengedwe mukamaphunzira.

Kutsikira: Kukwaniritsa Kwambiri - Chosangalatsa

Kukonzekera kwambiri - CREET CAREET Slides kumaphatikizapo kusamala mosamala kusankha kwa maselo, kukonzekera kwa lysis, electrophoresis, ma bactophoresis, ndi kusanthula chithunzi. Gawo lirilonse liyenera kukonzedwa mosamala komanso lokhazikika kuti muwonetsetse zotsatira zodalirika komanso zowonjezera. Kugawika ndi wovomerezeka wotsatsa kwa ogulitsa ndi opanga amatha kukulitsa mtundu wa malingaliro anu popereka - Zipangizo zaluso komanso thandizo laukadaulo.

● PafupifupiIphaseZambiri

Kumpoto Mu North Wales, Pennsylvania, a Iphase Bioscies ndi "mwapadera, komanso zatsopano - kugulitsa, kugulitsa, kugulitsa mabungwe azachilengedwe. Kukhumba Kuchulukitsa komanso Kukonda kwathu kafukufuku, gulu lathu la asayansi zoposa 50 Kutsata R & D ndi "zopanga zatsopano, kufufuza zamtsogolo"
Post Nthawi: 2024 - 08 - 28:05:21
  • M'mbuyomu:
  • Ena:
  • Kusankha Kusankha