Perchè NOD SCID Mouse Plasma hè criticu per u mudellu immunodeficiente - Ricerca preclinica basata

Parole chjave:Mouse NOD SCID, plasma di mouse NOD SCID, matrice bianca, mouse immunodeficiente, Bioanalisi, sviluppu di metudi, farmacocinetica, ricerca preclinica, Sviluppu di Metodi Analitici

Pruduttu IPHASE:

Introduzione

NOD SCID mghjacciu sò unu di i più utilizati mouse immunodeficiente ceppi inricerca preclinica. Questi topi portanu una mutazione in uPrkdcgene, chì si traduce in una severa immunodeficienza cumminata è l'assenza di linfociti T è B funzionali. Inoltre, u fondu geneticu NOD porta un allele Sirpα d'alta affinità, chì si lega à u CD47 umanu in modu efficiente per inibisce a fagocitosi di i macrofagi di e cellule umane, è ancu rende u plasma liberu di fattori d'interferenza endogeni cunnessi à macrofagi chì sò cumuni in plasma da altre ceppi di mouse immunodeficienti.

A causa di queste caratteristiche, i topi NOD SCID sò comunmente usati instudi di xenograft, a ricerca di trasplante, è u sviluppu umanu di mudelli di mouse. U so fondu immune altamente permissive li rende soprattuttu utili per esperimenti chì necessitanu l'engraftment o a sopravvivenza di cellule straniere. In questu cuntestu, i materiali biologichi derivati ​​da i topi NOD SCID, cumpresu u plasma, ponu ghjucà un rolu impurtante in u sviluppu di l'analisi è l'analisi preclinica.

Perchè NOD SCID Mouse Plasma hè impurtante

In i flussi di travagliu bioanaliticu, a scelta di a matrice pò influenzà assai u rendiment di l'analisi. U plasma ùn hè micca solu un tipu di mostra passiva; hè parte di u sistema analiticu è pò influenzà a ricuperazione, l'effetti di a matrice, a precisione è a robustezza generale di l'assay. Per studii custruiti intornu à u mudellu NOD SCID, usenduNOD SCID plasma di mouse cum'è amatrice bianca pò aiutà à assicurà chì i normi, i cuntrolli è i campioni di studiu sò allinati cù u fondu biologicu di l'esperimentu.

A cuntrariu di u plasma di topi immunocompetenti normali (cum'è BALB/c, C57BL/6), u plasma di mouse NOD SCID hà livelli estremamente bassi di immunoglobuline endogene, cumpunenti di cumplementari, è citochine immuno-relatate, chì ponu riduce notevolmente l'associazione non specifica, l'effetti di matrice, è l'interferenza di segnali di fondo in l'immunoglobuline./MS.

Per i studii basati nantu à i mudelli NOD SCID, sta matrice di strain-matched pò evità completamente errori sistematichi causati da un background biologicu inconsistente trà i standard di calibrazione è i campioni di studiu attuali.

Applicazioni cumuni

NOD SCID mouse plasma hè spessu usatu in una varietà di paràmetri di ricerca preclinica. Unu di i so usi più cumuni hè cum'è una matrice in biancu per quantitativebioanalisi. In questu rolu, pò esse usatu per preparà standard di calibrazione è campioni di cuntrollu di qualità per LC - MS / MS, immunoassay, o altre piattaforme quantitative.

Hè ancu utile insviluppu di metudu, induve i circadori anu bisognu di valutà se un analisi pò misurà in modu precisu è coerente un analite in un fondo biologicu pertinente. Duranti sta tappa, l'effetti di a matrice, a ricuperazione è a riproducibilità sò spessu punti critichi di valutazione.

Un'altra applicazione impurtante hè instudi di farmacocinetica (PK).. Siccomu l'analisi PK dipende assai da a qualità di a matrice biologica, un campione di plasma coherente è adattatu hè essenziale per ottene una concentrazione significativa - dati di tempu. In studii chì implicanu i topi NOD SCID, l'usu di a stessa cepa - fondo di plasma specificu pò migliurà a coerenza analitica è aiuta à riduce a variabilità evitabile.

Inoltre, u plasma di u mouse NOD SCID pò esse utile in a ricerca di traduzzione, in particulare in studii chì implicanu l'oncologia, a terapia cellulare è i mudelli immune - Siccomu più prughjetti preclinici si basanu in sistemi di mouse immunodeficienti, a necessità di materiale biologicu currispundente di ceppi affidabili cuntinueghja à cresce.

Considerazioni per a manipulazione di campioni

Cum'è cù qualsiasi matrice biologica, a manipulazione curretta hè impurtante per priservà l'integrità di a mostra. U plasma di u mouse NOD SCID deve esse almacenatu è processatu in cundizioni cuntrullate per minimizzà a degradazione è a variabilità. I cicli ripetuti di congelazione - scongelu deve esse evitati ogni volta chì hè pussibule, postu chì ponu influenzà a qualità di mostra è a riproducibilità analitica.

Hè ancu impurtante di mantene e cundizioni di cullizzioni è di trasfurmazioni coerenti trà i batch. Fattori cum'è u tipu d'anticoagulante, e cundizioni di centrifugazione, a temperatura di almacenamento è a prucedura di scongelu ponu influenzà a qualità finale di u plasma. Per u sviluppu di u metudu è a validazione, a cunsistenza in queste variàbili hè spessu cusì impurtante cum'è a fonte biologica stessu.

I ricercatori anu ancu attentu à l'apparenza di mostra. Emolyzed, lipemic, o altrimenti cumprumessi plasma pò intruduce interferenze innecessarii in l'assay è deve esse valutatu cù cura prima di l'usu.

Vantaggi per u sviluppu di l'analisi

Utilizà un mudellu - matrice di plasma abbinata pò simplificà u sviluppu di l'analisi in parechje manere. Prima, furnisce un sfondate più pertinente per a valutazione di u cumpurtamentu di l'analite in u sistema sperimentale previstu. Siconda, permette à i circadori di identificà è cuntrullà i prublemi di matrix-liate prima in u flussu di travagliu. Terzu, migliurà a comparabilità trà standard, cuntrolli è campioni di studiu.

Per i laboratorii chì sviluppanu saggi per mudelli di mouse immunodeficienti, u plasma di mouse NOD SCID pò esse particularmente praticu perchè sustene un ambiente analiticu più realistu. Questu hè particularmente preziosu per studii induve a prestazione di l'analisi deve esse stabile in parechje corse o in diversi lotti di mostra.

In i paràmetri di ricerca regulati o semi-regulati, a riproducibilità è a tracciabilità sò ancu impurtanti. Una matrice di plasma ben - carattarizata pò cuntribuisce à una documentazione di metudu più pulita è à un prucessu di validazione più simplice.

Valore di ricerca più largu

Al di là di a bioanalisi di rutina, u plasma di mouse NOD SCID pò ancu esse pertinente in una gamma più larga di applicazioni precliniche. Siccomu i mudelli immunodeficienti cuntinueghjanu à esse aduprati in l'oncologia, l'immunologia è u sviluppu terapèuticu avanzatu, e matrici biologiche specifiche sò diventate sempre più impurtanti per sustene u travagliu analiticu downstream.

Per esempiu, in a terapia di cellula o studi di mudellu umanizatu, i circadori puderanu bisognu di una matrice di plasma chì hè cumpatibile cù u fondu di u mudellu è a piattaforma analitica. In questi casi, l'usu di u plasma di u mouse adattatu pò aiutà à cunnette u mudellu biologicu cù l'assay quantitatiu in una manera più significativa.

Cunclusioni

U plasma di mouse NOD SCID hè una matrice biologica preziosa per i laboratorii implicati in a ricerca preclinica, bioanalisi è studi farmacocinetici. U so vantaghju principali si trova in a so pertinenza di u mudellu: furnisce una matrice in biancu chì currisponde à u fondu biologicu di u sistema NOD SCID è sustene flussi di travagliu analitici più affidabili.

Per i circadori chì travaglianu cù mudelli di mouse immunodeficienti, sistemi di xenograft, o studii preclinici di traduzzione, u plasma di mouse NOD SCID pò esse una scelta pratica è utile per u sviluppu di u metudu, a calibrazione è l'analisi di mostra.