ان ويٽرو ڊرگ ٽرانسپورٽر جي ويٽرو تشخيص ۾: اي بي سي ويزيڪلز ۽ ايس ايل سي ٽرانسپورٽر سيلز جي ڪردار جي ڳولا

Keywords: ATP-بائنڊنگ ڪيسٽ(ABC)، ABC ٽرانسپورٽر، SLC ٽرانسپورٽر، Membrane Vesicle، MDR1(P-gp), BSEP, BCRP, MATE1, MATE2-K, OAT1, OATP1B1, MDCK II, Caco-2, Transporter Inhibition, Transporter Inhibition, ICH2 ICH2 Subdentification, DICH 2. رابطي جو مطالعو، HEK293 MOCK، MOCK SLC ٽرانسپورٽر.

IPHASE مصنوعات

پس منظر

ڪلينڪل ايپليڪيشنن ۾ مريض اڪثر ڪري هڪ ئي وقت ڪيترن ئي دوائن کي استعمال ڪندا آهن، ۽ اهي دوائون پيدا ڪري سگھن ٿيون دوا - دوا جي تعامل (DDI) جيڪي سنجيده منفي ردعمل پيدا ڪرڻ يا علاج جي اثرائتي کي تبديل ڪرڻ جي صلاحيت رکن ٿيون. ڊي ڊي آءِ جي تشخيص عام طور تي ان ويٽرو ٽيسٽنگ سان شروع ٿيندي آهي ان فڪٽرن کي سڃاڻڻ لاءِ جيڪي منشيات جي روڪٿام تي اثرانداز ٿي سگهن ٿيون ته جيئن امڪاني ڊي ڊي آءِ ميڪانيزم کي واضح ڪري سگهجي ۽ وڌيڪ مطالعي لاءِ متحرڪ پيٽرولر حاصل ڪري سگهجي. دوا جي ميٽابولائيزنگ اينزيميمس ڊگھي عرصي کان ڊي ڊي آئي تحقيق جو ڌيان ڏنو ويو آهي. تازن سالن ۾، ماليڪيولر بايولوجي ٽيڪنالاجي جي ترقي سان، ويٽرو ڊرگ ٽرانسپورٽرز جي مطالعي ۾ اهم ترقي ڪئي وئي آهي، ۽ ٽرانسپورٽر جي بنياد تي ڊي ڊي آئي جي ويٽرو تشخيص جي اهميت وڌندڙ ڌيان کي وڌايو آهي.

ٽرانسپورٽر ۽ سندن ڪردار

ٽرانسپورٽر مختلف بافتن جي سيل جھلي ۾ ٽرانسميبرن پروٽينن ڏانهن اشارو ڪري ٿو جيڪي بايولوجيڪل جھلي جي اندر ۽ ٻاهر نڪرڻ واري اندروني يا خارجي مادي جي داخل ٿيڻ ۽ نڪرڻ ۾ وچولي ڪن ٿا. ان ويٽرو ڊرگ ٽرانسپورٽر پروٽين لاءِ هڪ عام اصطلاح آهي جيڪي دوائن کي ذيلي ذخيري طور وٺن ٿا، ٽشوز يا عضون جي سيل جھلي جي مٿاڇري تي موجود آهن، ۽ ٽرانسميبرن ڊرگ ٽرانسپورٽ جو ڪم ڪن ٿا، خاص طور تي ٻه خاندان شامل آهن: ATP-بائنڊنگ ڪيسٽ (ABC)superfamily ۽ solute carrier superfamily (SLC ٽرانسپورٽ)، جيڪو transmembrane منشيات جي ٽرانسپورٽ جي عمل تي غالب آهي.

ABC ٽرانسپورٽرزATP-انحصار ٽرانسپورٽر آهن جيڪي فعال طور تي مختلف ذيلي ذيلي ذخيري (مثال طور، آئنز، لپڊس، ۽ منشيات) کي سيل جھلين جي وچ ۾ منتقل ڪن ٿا، اڪثر ڪري ڪنسنٽريشن گريڊينٽس جي خلاف. اهي منشيات جي مزاحمت، ميٽابولزم، ۽ سيلولر detoxification ۾ اهم ڪردار ادا ڪن ٿا.SLC ٽرانسپورٽرزگهڻو ڪري ثانوي فعال يا سهولت ڏيندڙ ٽرانسپورٽر آهن جيڪي محلولن جي حرڪت ۾ ثالث ڪن ٿا جهڙوڪ گلوڪوز، امينو اسيد، ۽ نيوروٽانسميٽر. ABC ٽرانسپورٽرن جي برعڪس، انهن کي سڌو سنئون اي ٽي پي جي ضرورت ناهي پر آئن گريجوئيٽ تي ڀروسو آهي.

ٽرانسپورٽر جيڪي دوا جي وهڪري جي وچ ۾ مداخلت ڪن ٿا انهن ۾ شامل آهن P-glycoprotein (P-gp)، يا ملٽي - دوا جي مزاحمت 1 پروٽين (MDR1)، چھاتی جي ڪينسر جي مزاحمتي پروٽين (BCRP). اهي ATP-بائنڊنگ ڪيسٽ(ABC) ٽرانسپورٽر خاندان جا ميمبر آهن، جيڪي هائيڊولائيزڊ ATP جي توانائي استعمال ڪن ٿا دوائن جي نقل و حمل لاءِ ۽ اندريون شيون. ٽرانسپورٽر جيڪي سيل ۾ منشيات جي داخل ٿيڻ جي وچ ۾ ثالثي ڪن ٿا، فارماسولوجي اثرات کي وڌائڻ لاء ٽارگيٽ سائيٽ تي ذيلي ذخيرو وٺي سگهن ٿا، ۽ محلول ٽرانسپورٽر خاندان جي ميمبرن سان تعلق رکن ٿا، خاص طور تي آرگنڪ آئن ٽرانسپورٽ پوليپيپٽائيڊ (OATPs)، آرگنڪ آئن ٽرانسپورٽر (OATs)، Multidrug and toxin extrusion proteins (CMTOATEs)، وغيره.

اهم ٽرانسپورٽر ۽ انهن جا ڪردار:

• -بي ايس پي(بائل سالٽ ايڪسپورٽ پمپ):جگر ۾ بائل ايسڊ جي رطوبت لاءِ نازڪ، بي ايس اي پي جي خرابي cholestatic جگر جي بيماري سان ڳنڍيل آهي. دوا-Induced --BSEP inhibition hepatotoxicity سبب ٿي سگھي ٿي.
• -بي سي آر پي(بريسٽ ڪينسر جي مزاحمتي پروٽين):BCRP کيموٿراپيوٽڪس ۽ اينٽي وائرلز جي حياتياتي دستيابي کي متاثر ڪري ٿو، سيلز مان ذيلي ذخيرو برآمد ڪري ٿو ۽ پلاسينٽل ۽ رت کي متاثر ڪري ٿو- دماغ جي رڪاوٽ جي دخول.
• -MATE1/MATE2-K(Multidrug and Toxin Extrusion Proteins):رينل ۽ هيپاٽڪ ٽشوز ۾ واقع آهن، MATE1 ۽ MATE2-K ڪيٽيونڪ دوائون خارج ڪن ٿيون، او سي ٽي 2 سان هم آهنگيءَ سان ڪم ڪن ٿيون رينل جي رطوبت جي وچ ۾.
• -OATP1B1(SLCO1B1):هيپاٽڪ اپٽيڪ ٽرانسپورٽر اسٽيٽين ڪليئرنس لاءِ اهم آهي. OATP1B1 هڪ اهم ڪردار ادا ڪري ٿو ثالثي ڪرڻ ۾ ثالثي ڪرڻ ۾ ثالثي مرکبات جهڙوڪ bilirubic acid, bilirubin, steroid- coupled compounds, and thyroid hormones, as well as hepatic clearance of a wide range of clinical drugs like statins, antibiotics, anticercan drugs, and anticercan drugs.
• -OAT1(SLC22A6):انين جي رينل اپٽيڪ کي وچولي ڪري ٿو، بشمول اينٽي وائرلز ۽ NSAIDs، نيفروٽوڪسائيٽي خطري کي متاثر ڪري ٿو.

ٽرانسپورٽر جي نمائش ۽ ڊي ڊي آئي

ٽرانسپورٽر جي پابنديدوا جي ترقي جو هڪ لازمي حصو آهي. ٽرانسپورٽر جي روڪٿام منشيات ۾ هڪ اهم ڪردار ادا ڪري ٿو - منشيات جي تعامل (DDI) جذب، تقسيم، ميٽابولزم، ۽ گڏيل انتظامي دوائن جي اخراج کي متاثر ڪندي. Eflux ٽرانسپورٽرن جي روڪٿام جهڙوڪ MDR1 (P-gp) ۽ BCRP منشيات جي سيلولر خارج ٿيڻ کي گھٽائي سگھي ٿي، ممڪن طور تي اعلي اندروني ۽ سسٽماتي ڪنسنٽريشن جي ڪري. اهڙي طرح، OATP1B1 وانگر اپٽيڪ ٽرانسپورٽرن کي روڪي سگھي ٿي هيپاٽڪ منشي جي منظوري کي گھٽائي سگھي ٿي، جڏهن ته بي ايس اي پي جي نمائش بائل ايسڊ ٽرانسپورٽ سان مداخلت ڪري سگهي ٿي، کولسٽاسس جي خطري کي وڌائي سگھي ٿو. اضافي طور تي، ٽرانسپورٽر جهڙوڪ MATE1، MATE2-K، ۽ OAT1، جيڪي رينل منشيات جي خاتمي لاء اهم آهن، جڏهن روڪيل آهن، رينل خارج ٿيڻ کي تبديل ڪري سگهن ٿا ۽ منشيات جي جمع ڪرڻ ۾ مدد ڪري سگهن ٿيون. ويٽرو ماڊل ۾، بشمولMDCK II۽ڪاڪو-2سيل لائينون، وڏي پيماني تي استعمال ڪيا ويا آھن انھن ٽرانسپورٽر رابطي جو جائزو وٺڻ لاء، دوا جي ترقي دوران ڊي ڊي آئي جي صلاحيت ۾ ضروري بصيرت مهيا ڪن ٿا.

ٽرانسپورٽر مطالعي لاء ويٽرو ماڊلز ۾

ٽرانسپورٽر جي ڪم کي سمجهڻ ۽ ٽرانسپورٽر جي اڳڪٿي ڪرڻ محقق استعمال ڪن ٿاHEK293 موڪسيلز هڪ منفي ڪنٽرول جي طور تي، يقيني بڻائڻ ته ڪنهن به مشاهدو ٽرانسپورٽ مخصوص ٽرانسپورٽر جي سبب آهي. HEK293 MOCK هڪ مسلسل پس منظر مهيا ڪري ٿو، جڏهن ته HEK293 MOCK تجرباتي خاصيتن جي تصديق ڪرڻ لاء مرڪزي رهي ٿو. ھڪڙو طريقو استعمال ڪري ٿوجھلي vesiclesسيلز کان اوور ايڪسپريسنگ ٽرانسپورٽرز، اڪثر ڪري HEK293 MOCK سيلز کان الڳ ٿيل آهن. ساڳي طرح،MOCK SLC ٽرانسپورٽرماڊل خاص ٽرانسپورٽر جي سرگرمي کي غير مخصوص اپٽيڪ کان ڌار ڪرڻ لاء اهم آهن. MOCK SLC Transporter assays تصديق ڪن ٿا ته مشاهدو ٿيل سبسٽرٽ حرڪت ٽرانسپورٽر آهي - انحصار، ۽ MOCK SLC ٽرانسپورٽر تجربا ماڊل جي اعتبار کي مضبوط ڪن ٿا. هي ٻٽي طريقو HEK293 MOCK ۽ MOCK SLC ٽرانسپورٽر استعمال ڪندي اسان جي قابليت کي وڌائي ٿو ATP-انحصار ٽرانسپورٽ جو مطالعو ڪرڻ جي بغير سيلولر ميٽابولزم جي مداخلت کان.

Caco-2 سيل لائن، انساني ڪولن ڪارڪينوما مان نڪتل آهي، هڪ ٻيو معياري نمونو آهي جيڪو آنت جي دوا جي جذب کي نقل ڪرڻ لاء استعمال ڪيو ويندو آهي. ان جي انٽروڪائيٽ ۾ فرق ڪرڻ جي صلاحيت-جيئن سيلز جيڪي مختلف ٽرانسپورٽرن کي ظاهر ڪن ٿا- جهڙوڪ P-gp ۽ BCRP- ان کي دوائن جي پارمميتا ۽ امڪاني رابطي جو جائزو وٺڻ لاءِ انمول بڻائي ٿو.

ان کان علاوه، ٽرانسپورٽر-مخصوص ماڊل جهڙوڪ انساني BCRP ايڪسپريسنگ سيلز سبسٽريٽ جي خاصيت جي تحقيقات کي فعال ڪن ٿا، منشي جي نقل و حمل جي متحرڪ رويي، ۽ ان حد تائين جنهن کي روڪيندڙ ٽرانسپورٽر سرگرمي کي ماڊل ڪري سگهن ٿا. جڏهن vesicular assays جي ڊيٽا سان گڏ، اهي سيلولر سسٽم ٽرانسپورٽر جي متحرڪات ۾ جامع بصيرت مهيا ڪن ٿا - ثالثي دوا جي ترتيب.

نتيجو

خلاصو، سمجھڻ ٽرانسپورٽر رابطي کي دوا جي حفاظت ۽ افاديت کي بهتر ڪرڻ لاء ضروري آهي. ٽرانسپورٽر جهڙوڪ MDR1(P-gp)، BCRP، ۽ BSEP گڏوگڏ اپٽيڪ ٽرانسپورٽرز جهڙوڪ OATP 1B1 ۽ OAT1 slc ٽرانسپورٽر منشيات جي دواسازي ۾ اهم ڪردار ادا ڪن ٿا. ان ويٽرو ماڊلز جو استعمال بشمول MDCK II, Caco-2, Human BCRP Expressing Cells, and Human MDR1 Knockin MDCK II Cells هڪ مضبوط فريم ورڪ مهيا ڪري ٿو سمجھڻ لاءِ ته ڪيئن ٽرانسپورٽر جي روڪٿام منشيات-منشيات جي رابطي ۽ مجموعي طور تي منشيات جي روڪٿام کي متاثر ڪري سگھي ٿي. اهي بصيرت ڪلينڪ سيٽنگون ۾ دوا جي افاديت ۽ حفاظت کي بهتر ڪرڻ لاء انمول آهن.