Fa'aaogāga ole su'a ole Cerebrospinal Fluid (ACSF) ile Patch Clamp Technology

upu autu:Suavai Cerebrospinal Fa'agaga, ACSF, CSF Fa'afua, Sua o le cerebrospinal Synthetic, CSF Fausia, CSF, CSF fa'atusa, Patch Clamp Technology

Oloa IPHASE

Folasaga

Mo tagata suʻesuʻe i le neurophysiology, Artificial Cerebrospinal Fluid (ACSF) o se tasi o mea sili ona taua ma masani ona faʻaaogaina reagents i faʻataʻitaʻiga patch clamp. E ese mai i le avea o se faʻamatalaga faʻapitoa, Artificial CSF o loʻo faʻamatalaina le taua tele extracellular milieu e fuafua ai le mautu, toe faʻaleleia, ma le talafeagai o le physiological o faʻamaumauga eletise.

O le fa'amoemoega o fa'ata'ita'iga fa'apipi'i fa'apipi'i o le toe gaosia, i le latalata e mafai ai, le tulaga fa'atinoina o neu i vivo i lalo o tulaga fa'apitoa. I lena faʻataʻitaʻiga, o le Artificial CSF o loʻo avea ma faiga lagolago autu. O lona tuufaatasiga o le ionic, le gafatia e puipuia, osmolarity, ma le paleni o le kesi e a'afia sa'o ai le malosi o le membrane malolo o le neuronal, gaioiga e mafai ona fana, synaptic transmission, ma le ala gating amioga.

Le Fa'avae Fa'aletino o le Suavai Cerebrospinal Native

O fa'ata'ita'iga uma ma fa'aogaga o le Artificial CSF o lo'o fausia i luga o le malamalama sa'o o galuega fa'aletino o le sua o le cerebrospinal.

O le sua o le cerebrospinal native o le sua fa'aletino manino lea o lo'o si'osi'omia ai le fatugalemu o le tino, e maua ai se microenvironment mautu e mana'omia mo gaioiga masani o le neuronal. Ae ui i lea, ona o le fesuisuiai o le tuufaatasiga ma le utiuti o le avanoa, e le mafai ona faʻalagolago le CSF i totonu o faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga. Ina ia faʻatalanoaina lenei mea, ua atiaʻe le sua o le cerebrospinal Synthetic e toe faʻataʻitaʻia ai mea taua o le physicochemical o le CSF, e mafai ai e tagata suʻesuʻe ona faʻamautu tulaga faʻapitoa, physiologically talafeagai i suʻesuʻega in vitro ma ex vivo.

ACSF e fai ma Reagent Taua i Fa'ata'ita'iga Patch Clamp

I fa'ata'ita'iga fa'apipi'i fa'apipi'i, o le su'esu'e o le Cerebrospinal Fluid o le vaifofo pito sili lea. O neurons ma sela glial i totonu o le fatugalemu o le tino o loʻo faʻaauau pea ona faatofuina i totonu o le CSF moni i totonu o vivo, ma o latou manava malolo, gaioiga gafatia gaioiga, kinetics ala o le ion, ma le tuʻuina atu o le synaptic vesicle e faʻalagolago tele i faʻamautu o le ion, pH, osmolarity, ma le malosi.

O le sini o le fa'amauina o le fa'amauina o le fa'amauina o le fa'atupuina lea o le tulaga fa'aletino i vivo i le fa'amaoni e mafai ai i lalo o tulaga fa'aalia. I le avea ai o se faʻataʻitaʻiga faʻapitoa o le CSF, Artificial CSF e tuʻuina atu ai se microenvironment mautu mo neural tuʻufua ma sela, ma i le tele o le electrophysiology workflows e le mafai ona suia e ala masani masani po o saline faigofie.

Talosaga ile Patch Clamp Technology

O lo'o fa'aogaina le CSF fa'akomepiuta i le taimi atoa o fa'ata'ita'iga o fa'ata'ita'iga fa'apipi'i fa'apipi'i, mai le tapenaga o mea'ai e o'o atu i le pu'eina ma le togafiti fa'afoma'i.

1. 1) Fa'ata'ita'iga Clamp Patch Slice Brain Slice

I le taimi o le vavaeina o le faiʻai ma le tipiina, e tatau ona vave faʻafeiloaʻi le meaʻai i le aisa - malulu, ACSF faʻasalaina (95% O₂ / 5% CO₂). O le maualalo o le vevela e fesoasoani e faʻagesegese le metabolism o le neuronal, ae o le paleni lelei o le kesi e tumau ai le mautu o le pH ma faʻaitiitia ai le faaleagaina o le hypoxic.

A maeʻa le tipi, o vaega ole faiʻai e masani lava ona faʻapipiʻiina ile ACSF faʻasalaina ile 32-34 ° C mo le 1-1.5 itula e faʻatagaina ai le toe faʻaleleia o galuega. I lenei laʻasaga, o le tuʻufaʻatasiga o le ionic, osmolarity, ma le sapalai o le malosi (faʻataʻitaʻiga, kulukose) o le Artificial CSF e taua tele mo le faʻasaoina o le amio saʻo ma le gafatia o le sela.

I le taimi e pu'eina ai le electrophysiological, e tatau ona fa'aauau pea ona fa'ainu le sua o le cerebrospinal e fa'atumauina ai se si'osi'omaga mautu extracellular. Ole mea lea e fa'amautinoa ai le tumau o le pH, paleni o le ion, ma le vevela, a'o le aveesea o otaota, mulimuli ane lagolagoina le mauaina o faʻamaumauga faʻalagolago ma toe gaosia.

2. 2) Fa'ata'ita'iga Fa'ata'ita'i Fa'apipi'i Fa'amau o Neuron Tu'ufa'atasi

Mo fa'alavelave fa'afuase'i neura, e masani ona fa'amama le aano o fai'ai ma fa'apolote'e. O le vaifofo enzymatic e masani lava ona saunia i luga o le faʻavae o le sua o le cerebrospinal Artificial ina ia faʻasaoina le fausaga o le membrane ma le faʻaogaina o alalaupapa ion i le taimi o le gaogao. A maeʻa le faʻafefeteina ma le faʻaogaina o masini, e fufulu faʻatasi neu tuʻufua i le ACSF e aveese ai le enzyme totoe ona toe faʻaleleia lea i le ACSF mo le malolo poʻo le pipii. Osmolarity mautu ma le pH e taua i lenei faagasologa e puipuia ai manuʻa sela ma apoptosis.

3. 3) Fa'aleaganu'u Cells ma Cell Lines

Mo tulaga masani atoa - pu'e sela ma le tasi - alavai pu'eina, e mafai ona fa'aoga sa'o le sua o le cerebrospinal fa'akomepiuta e fai ma vaifofo extracellular e fa'asao ai le malosi o le membrane ma le tulaga fa'aletino o alavai ion.

Mo le tu'u'ese'esega fa'apitoa o a'ave fa'aioni fa'apitoa, e masani ona fa'aleleia le fa'avae Artificial CSF. Mo se faʻataʻitaʻiga, pe a faʻamauina galu o le calcium, o se vaega o le NaCl e mafai ona sui i le TEA - Cl e poloka ai ala o le potassium, poʻo le sodium e mafai ona aveese e taofiofia ai le sodium. A'o fa'amauina le NMDA fa'afeiloa'i-fa'asalalauga fa'aoso, extracellular Mg2+ e mafai ona fa'ate'aina e fa'amama ai poloka alalaupapa. I tulaga uma, e tatau ona tumau le mautu o mea tau physicochemical o le fofo.

4. 4) Su'esu'ega Fa'atino Tu'ufa'atasi

O le sua o le cerebrospinal gaogao e fa'aaogaina e saunia ai fofo galue mo le fa'aogaina o le ion channel modulators ma neuroactive compounds i su'esu'ega fa'afoma'i, ona fa'aogaina lea e ala i se faiga fa'apa'u. O suiga i le pH po'o le ionic composition e mafai ona suia ai le solubility o fualaau faasaina, mautu, poʻo le faʻaogaina o polotini taulaʻi, e mafua ai iʻuga le saʻo.

I optogenetic tu'ufa'atasi su'esu'ega pu'e, e fa'aogaina muamua le gaioiga o le neuronal e ala i le fa'aosofia o le malamalama ona mata'ituina lea e le patch clamp. O le faʻaauau pea o le faʻaogaina ma le ACSF e manaʻomia e faʻamautu ai le tulaga eletise eletise, ina ia mafai ona faʻaalia suiga i le optogenetic intervention nai lo le fesuiaiga o le siosiomaga.

Iloiloga Fa'ainisinia ma Fa'ata'ita'iga Autu Fa'ata'ita'iga

I fa'ata'ita'iga fa'apipi'i fa'apipi'i, ole su'esu'e ole Artificial Cerebrospinal Fluid-fa'atatau e tatau ona matua fa'atonutonuina ina ia mautinoa le mautu ma le toe fa'aleleia.

Fa'atasi, o nei mea e fuafua ai le mautu o le fa'amaumauga, le toe gaosia o fa'amaumauga, ma le fa'atatauga fa'aola o fa'ai'uga.

Fa'ai'uga
Ole sua ole cerebrospinal ole mea e sili atu nai lo se vaifofo i tua. I tekonolosi fa'apipi'i, e avea ma fa'avae extracellular si'osi'omaga e lagolago ai le fa'aogaina o le tino, fa'asao mea fa'aletino, ma mafai ai ona fa'atuatuaina su'esu'ega fa'atino. O le fa'aeteete lelei ole tu'ufa'atasiga o le ACSF ma tulaga fa'ata'ita'i e totonugalemu i so'o se su'ega eletise eletise maualuga.

Ina ia lagolagoina nei manaʻoga, ua tuʻuina atu e le IPHASE oloa ACSF maualuga - lelei o loʻo gaosia i lalo o tulaga faʻatonutonu lelei, faʻatasi ai ma le faʻatulafonoina o le ionic composition, osmolarity, ma le pH. Ole mea lea e fa'amautinoa ai le tutusa o le lot-to-lot ma le fa'atuatuaina o le fa'atinoga, e fesoasoani ai i tagata su'esu'e e ausia taunu'uga fa'ata'ita'i mautu ma toe fa'afo'i.