An Deuchainn Ames ann an Sgrùdaidhean Genotoxicity: Clach-oisinn de dheuchainn puinnseanta ginteil fo stiùireadh OECD 471

Faclan-luirg:Deuchainn Ames, Deuchainn Ames mini, Deuchainn Ames Microfluctuations, Deuchainn caochlaidhean, Ames II, Induced S9, S9 Mix, siostam gnìomhachaidh metabolach, Deuchainn Ames Meudaichte, Deuchainn Mutation Bacterial Reverse, OECD 471, Deuchainn Mutagenicity, Genotoxicity, Genetic Toxicity

Bathar IPHASE

Ro-ràdh don Deuchainn Ames agus a dhleastanas ann an puinnseanta ginteil

Tha anAmes deuchainn, ris an canar cuideachd anDeuchainn mutation cùl bacteria, na mheasadh bunaiteach ann angenotoxicityagusdeuchainn mutagenicity. Air a leasachadh leis an Dr Bruce Ames anns na 1970n, tha an deuchainn a' lorg comaspuinnseanta ginteille bhith a’ measadh comas stuthan ceimigeach mùthaidhean a bhrosnachadh ann an DNA bacteria. Tha am measadh seo air a thighinn gu bhith na inbhe riaghlaidh air feadh an t-saoghail agus tha e aithnichte fon StiùireadhOECD 471, a bheir seachad am frèam airson an deuchainn a dhèanamh gu earbsach agus gu ath-riochdachadh.

Prionnsabal an Deuchainn Ames ann an Sgrùdaidhean Genotoxicity

Aig a chridhe, tha an Ames Test a’ measadh comas stuth a bhith ag adhbhrachadh mùthaidhean ann an sreathan sònraichte de Salmonella typhimurium no Escherichia coli a tha easbhaidheach ann an synthesis histidine. Chan urrainn dha na gathan bacterial sin fàs ann an histidine - meadhanan easbhaidheach mura h-atharraich mùthadh an comas biosynthetic aca. Nuair a tha mutagen an làthair, bidh e ag àrdachadh ìre an leithid“tionndadh air ais,”a’ nochdadh puinnseanta ginteil a dh’fhaodadh a bhith ann.

Tha an assay seo a’ tabhann dòigh shìmplidh ach chumhachdach airson a bhith a’ ro-innse mutagenity agus carcinogenicity a dh’ fhaodadh a bhith ann an daoine. Mar sin, tha e na phrìomh inneal sgrìonaidh ann an sgrùdaidhean genotoxicity airson ceimigean, cungaidhean-leigheis, cuir-ris bìdh, agus sampallan àrainneachd.

Dleastanas Gnìomhachadh Metabolach: Measgachadh S9 agus S9 air a bhrosnachadh

Is e taobh deatamach de dheuchainn mutagenity sam bith, a’ toirt a-steach Deuchainn Ames, a bhith a’ toirt a-steach asiostam gnìomhachaidh metabollach. Tha mòran de cheimigean nach eil gu dìreach mutagenic ach tha feum aca air cruth-atharrachadh metabolach gus buaidhean genotoxic a nochdadh. Seo far a bheil anS9 Measg-ullachadh de enzyman grùthan, mar as trice a thig bhoair a bhrosnachadh S9bloigh de ghrùthan creimich-a’ tighinn a-steach. Bidh an S9 Mix a ’dèanamh atharrais air metabolism mamalan, a’ toirt seachad measadh nas buntainniche a thaobh eòlas-eòlas air an todhar deuchainn's mutagenic comas.

Bidh riochdairean inntrigidh mar Aroclor 1254 gu tric air an cleachdadh gus susbaint enzyme ann an clò grùthan a chleachdadh airson bloigh S9 ullachadh. Tha toirt a-steach an t-siostam brosnaichte S9 seo a’ dèanamh cinnteach gu bheil promutagens (companaidhean a dh’ fheumas gnìomhachadh) air an atharrachadh gu h-iomchaidh gu na cruthan gnìomhach mutagenic aca rè deuchainn.

Deuchainn Mini Ames agus Deuchainn Micro-caochlaidhean Ames: Roghainnean eile teann agus èifeachdach

Tha adhartasan o chionn ghoirid air leantainn gu leasachadh chruthan beaga leithid anMini Ames deuchainnagusAmes Microfluctuations Test, ris an canar cuideachd anDeuchainn caochlaidhean. Bidh na cruthan sin a’ lughdachadh gu mòr na tha de stuth deuchainn agus ath-bheachdan a dhìth, gan dèanamh freagarrach airson àrainneachdan tràth - sgrìonadh ìre agus àrd - throughput.

Bidh an Deuchainn caochlaidhean a’ dol an àite plataichean agar le cultaran leaghaidh ann am pleitean microtiter agus a’ tomhas atharrachaidhean pH mar chomharradh air fàs bacterial, a’ comasachadh gnìomhachd mutagenic a lorg gu luath, cosg-èifeachdach. Bidh na dòighean ùr-ghnàthach sin a’ gleidheadh ​​​​cruaidh saidheansail an assay traidiseanta agus aig an aon àm a’ leasachadh èifeachdas obrachaidh, gu sònraichte ann a bhith a’ sgrìonadh leabharlannan mòra toinnte.

Ames II: Mothachadh Meudaichte ann an Deuchainn Mutagenicity

Tha anAmes IITha deuchainn a’ riochdachadh mean-fhàs eile ann an deuchainn mutagenicity, air a dhealbhadh gus cugallachd lorg a mheudachadh airson mutagens nas laige. Bidh e a’ cothlamadh frèam traidiseanta Ames Test le cultaran crochaidh leaghaidh, a leigeas le dùmhlachd cealla nas àirde agus amannan nochdaidh fada. Tha an stèidheachadh seo a’ cur ris a’ choltas gun tèid buaidhean mutagenic seòlta a ghlacadh, a’ leasachadh cruinneas measaidh cunnairt, gu sònraichte airson genotoxins dòs ìosal no crìche.

Deuchainn Ames Meudaichte agus an Deuchainn Mutation Bacterial Reverse fo OECD 471

Tha anDeuchainn Ames Leasaichte, uaireannan air ainmeachadh mar an Bacterial Reverse Mutation Test, a rèir an stiùireadh eadar-nàiseanta fo OECD 471. Tha an stiùireadh seo a 'mìneachadh an dòigh àbhaisteach airson a bhith a' dèanamh measadh Ames, a 'gabhail a-steach taghadh strain, cleachdadh gnìomhachd metabollach, mìneachadh dàta, agus mion-sgrùdadh staitistigeil.

Tha gèilleadh ri OECD 471 a’ dèanamh cinnteach à creideas agus ath-riochdachadh nan toraidhean deuchainn, gan dèanamh iomchaidh do bhuidhnean riaghlaidh leithid an FDA, EMA, agus EPA. Bidh an Deuchainn Ames Leasaichte gu tric a’ toirt a-steach grunn shreathan, an dà chuid le agus às aonais siostam gnìomhachaidh metabollach S9, gus làn - measadh mutagenicity speactram a thoirt seachad.

Co-dhùnadh: Luach maireannach deuchainn Ames ann am measadh puinnseanta ginteil

Ann an cruth-tìre deuchainn puinnseanta ginteil, tha an Ames Test agus na toraidhean ùr-nodha aige fhathast riatanach. Ge bith co-dhiù a thèid a dhèanamh mar assay in-ghabhail truinnsear clasaigeach no mar am mini Ames, Ames II, no Deuchainn Caochlaidhean, bidh e gu cunbhalach a’ lìbhrigeadh dàta earbsach gus taic a thoirt do mheasaidhean sàbhailteachd. Le bhith ag amalachadh gnìomhachd metabolach tro S9 Mix, a’ leantainn inbhean OECD 471, agus a’ faighinn buannachd bho leasachaidhean teicneòlais, tha an Ames Test a’ leantainn air adhart ag atharrachadh a rèir feumalachdan rannsachadh genotoxicity co-aimsireil.