Prinzip des Comet -Assays
Der Comet -Assay, auch als Single - Cell Gelelektrophorese bekannt, ist eine Technik zur Bestimmung der Genotoxizität durch Nachweis von DNA -Strangschäden. Es kann effektiv das Ausmaß der DNA -Ein- und Doppelstrang -Nick -Schädigung in Zellen nachweisen und quantitativ analysieren. Wenn verschiedene endogene und exogene DNA -Schadensfaktoren zelluläre DNA -Strangbrüche induzieren, ist seine superhelikale Struktur beschädigt, und unter der Wirkung von Zelllysat, die Zellmembran, die Kernmembran und andere Membranstrukturen werden beschädigt, und intrazelluläre Proteine, RNA, und andere Komponenten diffundieren in der Zelle, die sich auf die Zellmolk -Lysat wandte, wobei die Atomkerna -Kernweithäkkulkulkulkulkulkulkulkulkulzes.Unter neutralen Bedingungen können DNA -Fragmente in das Gel eindringen und wandern, während die DNA unter der Wirkung von alkalischen Elektrolyten entlassen wird und beschädigte DNA -gebrochene Stränge und Fragmente freigesetzt werden. Aufgrund der kleinen relativen molekularen Masse dieser DNAs und der alkalischen Denaturierung in einzelne Stränge lassen die negativ geladenen DNAs die nukleare DNA während der Elektrophorese zum positiven Pol wandern, was zu einem comet - ähnlichen Bild führt, während die unbeschädigten DNA -Teile sphärisch bleiben. Daher kann es weiter in den neutralen Komet -Test (pH = 8,4) und den alkalischen Kometentest (pH> 13) gemäß den verschiedenen pH -Werten des Elektrophorese -Puffers eingeteilt werden. Ersteres wird hauptsächlich zum Nachweis von DNA -Double - Strang Breakage -Schäden verwendet, während letztere eine höhere Empfindlichkeit aufweist und verwendet werden kann, um eine geringere Menge an einzelnen - Strang und Doppelschaden zu erfassen.
Je schwerer die DNA -Schädigung, desto mehr Strang und Fragment bricht sie, je kleiner sie ist, desto mehr DNA wandert sie unter den gleichen elektrophoretischen Bedingungen und desto länger wandert der Migrationsabstand. Daher kann der Grad der DNA -Schädigung in einzelnen Zellen durch Messung der optischen Dichte oder Länge des migrierten Teils der DNA bestimmt werden, wodurch die Beziehung zwischen der Wirkungsdosis des Subjekts und dem DNA -Schadenseffekt bestimmt wird.
IPhase -Produkte
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Stabilität: Das Kit ist stabil und leicht transportiert und aufbewahrt.
Breite Anwendung: Es verfügt über eine breite Palette von Anwendungen und kann für genetische Toxikologiestests von Lebensmitteln, Chemikalien, Pestiziden, Desinfektionsmitteln, Lebensmittelzusatzstoffen, Kosmetika, Medizinprodukten und anderen Aspekten verwendet werden.
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Postzeit: 2024 - 07 - 26 15:29:08