Princíp kométového testu
Comet Assay, tiež známy ako jednobunková gélová elektroforéza, je technika na stanovenie genotoxicity detekciou poškodenia reťazca DNA. Dokáže efektívne detegovať a kvantitatívne analyzovať rozsah poškodenia jednovláknového a dvojvláknového prerezania DNA v bunkách. Keď rôzne endogénne a exogénne faktory poškodenia DNA indukujú zlomy bunkového vlákna DNA, poškodí sa jej superhelikálna štruktúra a pôsobením bunkového lyzátu sa poškodí bunková membrána, jadrová membrána a ďalšie membránové štruktúry a intracelulárne proteíny, RNA a ďalšie zložky difundujú do bunkového lyzátu, zatiaľ čo jadrová DNA sa môže udržať na mieste iba kvôli jej príliš veľkej relatívnej molekulovej hmotnosti.V neutrálnych podmienkach môžu fragmenty DNA vstúpiť do gélu a migrovať, zatiaľ čo pôsobením alkalických elektrolytov sa DNA de-helikalizuje a uvoľňujú sa poškodené vlákna a fragmenty DNA. Kvôli malej relatívnej molekulovej hmotnosti týchto DNA a alkalickej denaturácii na jednotlivé vlákna, negatívne nabité DNA opúšťajú jadrovú DNA, aby migrovali smerom k pozitívnemu pólu počas elektroforézy, čo vedie k obrazu podobnému kométe, zatiaľ čo nepoškodené časti DNA zostávajú sférické. Preto môže byť ďalej kategorizovaný na neutrálny kométový test (PH=8,4) a alkalický kométový test (PH>13) podľa rôznych hodnôt pH elektroforézneho pufra. Prvý z nich sa používa hlavne na detekciu poškodenia dvojvláknovým zlomením DNA, zatiaľ čo druhý má vyššiu citlivosť a možno ho použiť na detekciu menšieho množstva poškodenia jednovláknovým a dvojvláknovým zlomom.
Zvyčajne platí, že čím závažnejšie je poškodenie DNA, tým viac reťazcov a fragmentov vytvára, čím je jej dĺžka menšia, tým viac DNA migruje za rovnakých elektroforetických podmienok a tým dlhšia je jej migračná vzdialenosť. Preto možno stupeň poškodenia DNA v jednotlivých bunkách určiť meraním optickej hustoty alebo dĺžky migrovanej časti DNA, čím sa určí vzťah medzi pôsobiacou dávkou subjektu a účinkom poškodenia DNA.
Produkty IPHASE
Pohodlie: Reagencie a spotrebný materiál potrebný na jednobunkovú gélovú elektroforézu sú k dispozícii a možno ich použiť priamo, čím sa výrazne skráti experimentálny cyklus.Presnosť: Každý komponent súpravy bol podrobený prísnemu testovaniu kvality a experimentálne výsledky sú presné, spoľahlivé a vysoko reprodukovateľné.
Stabilita: súprava je stabilná a ľahko sa prenáša a uchováva.
Široké použitie: Má širokú škálu aplikácií a môže sa použiť na genetické toxikologické testovanie potravín, chemikálií, pesticídov, dezinfekčných prostriedkov, potravinárskych prísad, kozmetiky, zdravotníckych pomôcok a ďalších aspektov.
IPHASE sa už niekoľko rokov intenzívne angažuje v oblasti vedeckých výskumných činidiel a vytvorila sériu medzipoľných a diverzifikovaných špičkových nástrojov vedeckého výskumu s vynikajúcou profesionalitou a inovatívnym duchom. IPHASE poskytuje presné a efektívne skríningové nástroje na urýchlenie zrodu nových liekov; je tiež jasnou hviezdou v obrovskom výskumnom priestore vedy o živote, neustále poskytuje vedcom nové materiály, nové stratégie a nové obzory a vedie každý skok na hraniciach vedeckého výskumu. V sofistikovanej oblasti výskumu genotoxicity IPHASE preukázala mimoriadny prehľad a realizáciu, pričom uviedla na trh sériu pohodlných a efektívnych riešení, aby bol komplexný výskumný proces plynulejší a efektívnejší.
Čas príspevku: 2024-07-26 15:29:08