Lüsosoomid (tritosoomid): ennustav in vitro katsesüsteem katabolismi või lüsosomaalse stabiilsuse uuringute jaoks

Ifaasitooted

SissejuhatusLüsosoomid
Lüsosoomi avastas Christian Deduve 1950ndatel ja see loodi raku lagunemise ja ainevahetuse keskseks organelleks. Lüsosoomid on üksikud - membraan, dünaamilised, heterogeensed organellid, mille asukoht, morfoloogia, suurus, ensüümide sisaldus ja substraadid varieeruvad. Lüsosomaalne membraan sisaldab sadu perifeerseid membraanivalke, sealhulgas mitmesuguseidtransporteridja ioonkanalid. Lüsosomaalne multi - subühik V - ATPaas säilitab happelise lüsosomaalse valendiku. See madal pH (4,5 - 5,5) aktiveerib> 50 lüsosomaalseid hüdrolaase, mis seedivad makromolekule, sealhulgas valke, nukleiinhappeid, lipiide ja süsivesikuid. Lüsosoomid saavad ja seedivad väikeseid molekule ja endotsütoositud materjale, kaasake suuri osakesi nagu apoptootilised rakukoorid ja patogeensed bakterid või autofagotsütoos tsütoplasmaatiline sisaldus, sealhulgas kahjustatud mitokondrid, endoplasmaatiline retculum ja lüsosoomid. Seetõttu on lüsosoome pikka aega peetud raku "ringlussevõtu prügikasti".

Tritosoom

Tritosoomid on spetsiaalsed subtsellulaarsed struktuurid, mis on seotud erinevates rakuprotsessides, eriti metaboolsete radade reguleerimisel ja raku homöostaasi säilitamisel. Tritosoome uuritakse sageli nende rolli kontekstis konkreetsetes organismimudelites. Nende struktuuride määratlev aspekt on nende ainulaadne kompositsioon, mis võimaldab neil täita keerulisi funktsioone, mis on rakkude ellujäämiseks ja õigeks toimimiseks kriitilised. Rottide maksatritoomid on maksa lüsosoomid mis on laaditud tyloksapoliga (Triton WR 1339), mitte - ioonse pindaktiivse ainega. Tülosapoli sisaldavatel lüsosoomidel on vähenenud tihedus, neid saab tõhusamalt mitokondritest eraldada ja saastatavad organellid, mis kattuvad loodusliku lüsosomaalse tihedusega.

Lüsosoomide rakendamine
· Väikesed nukleiinhapperavimid ja lüsosoomid
Väikesed nukleiinhapperavimid viitavad väikestele spetsiifiliste järjestustega nukleotiidide fragmentidele, mis võivad seostuda spetsiifiliste mRNA -dega ja häirida mRNA -de translatsiooni efektiivsust, et saavutada lõpuks terapeutilised mõjud. Väikeste nukleiinhapperavimite hulka kuuluvad antisenss -oligonukleotiidid (ASO -d), väikese segava RNA (siRNA), mikroRNA (miRNA), RNA aptameerid jne. Nende hulgas on ASO ja siRNA väikeste nukleiinhapete ravimite praegused peauuringute suunad.

Pärast manustamist peavad väikesed nukleiinhapperavimid kõigepealt vältima plasma ja kudede nukleaaside lagunemist, immuunsussüsteemi hõivamist, edukalt sihtkoesse jõudmist, raku sisenema endotsütoosi kaudu ja põgenege enne endosoomiga ühendamist lüsosoomiga, sisenege tsütoplasmaga ja kombineerida sihtrühmaga, et saavutada geenide puhkemine. Lüsosoome saab kasutada tõhusa katsesüsteemina modifitseeritud väikeste nukleiinhapperavimite stabiilsuse muutuste hindamiseks pärast lüsosoomide toimet in vitro, pakkudes andmeid väikeste nukleiinhapete uurimiseks.

· Antikeha - ravimkonjugaat (ADC) ja lüsosoomid
Antikeha - ravimkonjugaat (ADC) on uut tüüpi biotehnoloogia ravim, mis ühendab väikeste molekuliühendusi sihipäraste antikehade või antikehade fragmentidega linkerite kaudu. See võib parandada ravimite sihtimist ja stabiilsust, vähendada kliinilist toksilisust ja kõrvaltoimeid ning parandada terapeutilist indeksit. Sellel on nii traditsiooniliste väikeste molekulide ravimite tapmine kui ka antikehade ravimite sihtimine. Seda kasutatakse peamiselt Anti - kasvaja või muude haiguste suunatud ravis.

Pärast kehasse sisenemist võivad ADC molekulid siduda monoklonaalsete antikehade juhendamise kaudu sihtrakkude pinnal olevate antigeenidega ja kaduda veelgi sihtrakkudesse. Rakkudesse sisenevad ADC molekulid (peamiselt lüsosoomides) võivad keemilise ja/või/või/või ensümaatilise toime kaudu vabastada väikeste molekuliliste toksiinide ja/või toksiini analoogide (s.o efektormolekulid). ADC nõuab funktsionaalseid lüsosoome, et lagundada ja vabastada väikeste molekulravimeid, mis avaldavad nende efektiivsust, tungivad läbi lüsosomaalse membraani või transportimise lüsosoomidest välja ja interakteeruvad tsütoplasmas või tuumas molekulaarsete sihtmärkidega. ADC ja lüsosoomide in vitro katsed saavad hinnata, kas linkerit saab lüsosoomid tõhusalt lõigata, et vabastada kantavad väikesed molekulravimid, pakkudes in vitro hindamisvahendit ADC linkerite kavandamiseks.

Ifaasi kohta
Juhtiva in vitro bioloogiliste reagentide tarnijana ravimite väljatöötamiseks on ifaas käivitanud pideva optimeerimise ja testimise kaudu viie liigi, sealhulgas inimese, ahvi, koera, roti ja hiire, maksa lüsosoomproduktid, tuginedes oma professionaalsele teadus- ja arendustegevuse meeskonnale ja tootmismeeskonnale ravimite väljatöötamisel.
· Kõrge ensüümi aktiivsus: Ifaasi maksa lüsosoome on testitud katepsiin B ja happe fosfataasi aktiivsuse suhtes ning ensüümi aktiivsus on võrreldav sarnaste imporditud toodetega või kõrgem.
· Partii tootmine: partii tootmine võetakse kasutusele ja inventar on piisav, et tagada sama toodete partii pakkumine.
· Lühike tarneaeg: sõltumatu teadus- ja arendus, mitu ladu laos, et tagada klientide kasutamise vajadused.