धूमकेतु परख का सिद्धांत
धूमकेतु परख, जिसे एकल के रूप में भी जाना जाता है। सेल जेल वैद्युतकणसंचलन, डीएनए स्ट्रैंड क्षति का पता लगाकर जीनोटॉक्सिसिटी का निर्धारण करने के लिए एक तकनीक है। यह प्रभावी रूप से पता लगा सकता है और मात्रात्मक रूप से कोशिकाओं में डीएनए एकल और डबल स्ट्रैंड निक क्षति की सीमा का विश्लेषण कर सकता है। जब विभिन्न अंतर्जात और बहिर्जात डीएनए क्षति कारक सेलुलर डीएनए स्ट्रैंड टूटने को प्रेरित करते हैं, तो इसकी सुपरहेलिकल संरचना क्षतिग्रस्त हो जाती है, और सेल lysate की कार्रवाई के तहत, कोशिका झिल्ली, परमाणु झिल्ली और अन्य झिल्ली संरचनाएं क्षतिग्रस्त हो जाती हैं, और इंट्रासेल्युलर प्रोटीन, आरएनए, और अन्य घटक जो कि रिटेन्ड में हैं, वे केवल सेल लिसीट में फैल सकते हैं, द्रव्यमान।तटस्थ परिस्थितियों में, डीएनए के टुकड़े जेल में प्रवेश कर सकते हैं और माइग्रेट कर सकते हैं, जबकि क्षारीय इलेक्ट्रोलाइट्स की कार्रवाई के तहत, डीएनए डी है। पेचदार और क्षतिग्रस्त डीएनए टूटे हुए किस्में और टुकड़े जारी किए जाते हैं। इन डीएनए के छोटे सापेक्ष आणविक द्रव्यमान और एकल स्ट्रैंड में क्षारीय विकृतीकरण के कारण, नकारात्मक रूप से चार्ज किए गए डीएनए वैद्युतकणसंचलन के दौरान सकारात्मक ध्रुव की ओर पलायन करने के लिए परमाणु डीएनए को छोड़ देते हैं, जिसके परिणामस्वरूप एक धूमकेतु की तरह छवि होती है, जबकि अघोषित डीएनए भाग गोलाकार रहते हैं। इसलिए, इसे इलेक्ट्रोफोरेसिस बफर के विभिन्न पीएच मानों के अनुसार तटस्थ धूमकेतु परीक्षण (पीएच = 8.4) और क्षारीय धूमकेतु परीक्षण (पीएच> 13) में वर्गीकृत किया जा सकता है। पूर्व का उपयोग मुख्य रूप से डीएनए डबल का पता लगाने के लिए किया जाता है। स्ट्रैंड टूटना क्षति, जबकि बाद वाले में उच्च संवेदनशीलता है और इसका उपयोग छोटी मात्रा में एकल का पता लगाने के लिए किया जा सकता है। स्ट्रैंड और डबल - स्ट्रैंड टूटना क्षति।
आमतौर पर, डीएनए की क्षति जितनी अधिक गंभीर होती है, उतनी ही अधिक स्ट्रैंड और टुकड़ा टूट जाता है, इसकी लंबाई जितनी छोटी होती है, उतनी ही अधिक डीएनए एक ही इलेक्ट्रोफोरेटिक परिस्थितियों में पलायन करती है, और इसकी प्रवासन दूरी जितनी अधिक होती है। इसलिए, व्यक्तिगत कोशिकाओं में डीएनए क्षति की डिग्री डीएनए के माइग्रेटेड हिस्से की ऑप्टिकल घनत्व या लंबाई को मापकर निर्धारित की जा सकती है, इस प्रकार विषय की अभिनय खुराक और डीएनए क्षति प्रभाव के बीच संबंध का निर्धारण किया जा सकता है।
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पोस्ट समय: 2024 - 07 - 26 15:29:08