इन विट्रो हेपेटोसाइट चयापचय मॉडल में नवीनता फार्माकोकाइनेटिक अध्ययन को धीमी गति से चयापचय की सुविधा प्रदान करती है

चूंकि इन विट्रो ऊष्मायन समय के बढ़ने के साथ दवा चयापचय एंजाइम गतिविधियां धीरे-धीरे कम हो जाती हैं, पारंपरिक इन विट्रो चयापचय मॉडल में कम ऊष्मायन समय, कम चयापचय रूपांतरण और पता लगाने की उच्च निचली सीमा (सीएलिंट परख की मात्रात्मक निचली सीमा 2.5 μL / (न्यूनतम 106 कोशिकाएं)) जैसी सीमाएं होती हैं, जो धीरे-धीरे चयापचय वाली दवाओं के क्लिंट की सटीक भविष्यवाणी नहीं कर सकती हैं^[1]. इस बीच,हेपेटोसाइटकी तुलना में ऑक्सीकरण, कमी, हाइड्रोलिसिस और डिमराइजेशन प्रतिक्रियाओं के लिए आवश्यक अधिक एंजाइम होते हैंयकृत माइक्रोसोम, और इन विट्रो सिस्टम में, कई नए मॉडलों को इसके आधार पर अनुकूलित किया जाता हैहेपेटोसाइट प्रणाली और एंजाइम गतिविधि की अवधारण को लम्बा करने के लिए इन विवो वातावरण की नकल करेंहेपेटोसाइटएस, और ऊष्मायन समय का विस्तार धीमी गति से चयापचय करने वाली दवाओं के पर्याप्त चयापचय परिवर्तन की निगरानी करने की संभावना प्रदान करता है^[1,2].

इसे ध्यान में रखते हुए, इन विट्रो अनुसंधान के लिए जैविक अभिकर्मकों में अग्रणी के रूप में, IPHASE ने मानव, बंदर, कुत्ते, चूहे और चूहे आदि सहित विभिन्न प्रजातियों के अनुवर्ती प्राथमिक हेपेटोसाइट्स और स्ट्रोमल कोशिकाओं के अध्ययन के आधार पर हेपाटोमैक्स™ सिस्टम और हेपाटोकॉन™ मीडिया सिस्टम का बीड़ा उठाया है। हेपाटोमैक्स™ सिस्टम और हेपाटोकॉन™ मीडिया सिस्टम अनुवर्ती प्राथमिक मानव का उपयोग करके विकसित किए गए थे।हेपेटोसाइटएक उदाहरण के रूप में, और दोनों प्रणालियों को विशिष्ट एंजाइम प्रकारों की गतिविधि और चयापचय स्थिरता के निर्धारण और सिस्टम को सत्यापित करने के लिए 10 दिनों और 7 दिनों में दवा टोलबुटामाइड के चयापचयों के प्रतिक्रिया मूल्य में वृद्धि के लिए स्थापित किया गया था। मेटाबोलाइट ने 10 दिनों में प्रतिक्रिया मूल्य में वृद्धि की और 7 दिनों में विशिष्ट एंजाइम प्रकारों की गतिविधि और चयापचय स्थिरता को सिस्टम को मान्य करने के लिए निर्धारित किया गया।

• (1) दो व्यवस्थित दवा सत्यापन संस्कृति प्रक्रियाएं इस प्रकार हैं:

  आईपीएचएएसई-हेपेटोमैक्स™जमे हुए दीवारों वाले प्राथमिक मानव हेपेटोसाइट्स और स्ट्रोमल कोशिकाओं की एक सह-संस्कृति प्रणाली है। दवा प्रशासन परख शुरू करने के लिए प्राथमिक मानव हेपेटोसाइट्स को 3 दिनों के लिए हेपाटोप™ माध्यम में स्ट्रोमल कोशिकाओं के साथ पुनर्जीवित और ऊष्मायन किया गया था, और दवा का चयापचय सीरम - मुक्त हेपाटोडो™ माध्यम में किया गया था, जिसे केवल माध्यम को बदले बिना दवा के साथ फिर से भर दिया गया था। दवा देने के कुल 4, 72, 168 और 240 घंटों के बाद, विश्लेषण के लिए दवा मेटाबोलाइट्स का जोड़ा गया मूल्य निर्धारित किया गया था।

 

  IPHASE-HepatoCon™दूसरी ओर, हेपेटोकॉन™ माध्यम में जमे हुए अनुवर्ती प्राथमिक मानव हेपेटोसाइट्स को संवर्धित करने की एक प्रणाली है। प्राथमिक मानव को पुनर्जीवित करने के बादहेपेटोसाइटएस, दवा प्रशासन परख अकेले हेपाटोकॉन™ माध्यम में संस्कृति के 3 दिनों के बाद की गई थी, और प्रशासन के बाद के समय, संस्कृति प्रणाली और परख पद्धति हेपाटोमैक्स™ प्रणाली के समान ही थी।

 

इस बीच, परिणामों की सटीकता और कठोरता सुनिश्चित करने के लिए, आईपीएचएएसई ने एक ही समय में तीन प्रतिकृति के साथ एक मध्यम नियंत्रण (सेल - मुक्त) और एक स्ट्रोमल सेल नियंत्रण का प्रदर्शन किया, और परिणामों से पता चला किआईपीएचएएसई-हेपेटोमैक्स™ औरIPHASE-HepatoCon™ सिस्टम ने तीसरे दिन के बाद से एक मजबूत शिखर मेटाबोलाइट प्रतिक्रिया उत्पन्न की, और उन दोनों ने एक मजबूत चयापचय टर्नओवर दर दिखाई।

 

 

• (2) दवा चयापचय मुख्य रूप से हेपेटोसाइट पर निर्भर हैCYP450बेहतर जांच के लिए एंजाइम प्रणाली और इसकी गतिविधि को मापा जा सकता है।

दआईपीएचएएसई-हेपेटोमैक्स™ औरIPHASE-HepatoCon™ सिस्टम में अच्छी प्रयोज्यता है.

IPHASE ने मध्यम नियंत्रण (कोई सेल नहीं), हेपाटोमैक्स™, हेपाटोकॉन™ और स्ट्रोमल सेल की चार श्रेणियां स्थापित कीं। दीवार का उपयोग करना-अनुयायी प्राथमिक मानवहेपेटोसाइटउदाहरण के तौर पर, मेटाबोलाइट का मान बढ़ता हैCYP1A2, CYP2B6औरCYP3A4इसके बाद 0, 3 और 7वें दिन सत्यापित किया गयाहेपेटोसाइटसब्सट्रेट के रूप में क्रमशः फ़िनास्टराइड, बुप्रोपियन और मिडज़ोलम का उपयोग करके 3 दिनों तक रिकवरी। मेटाबोलाइट वृद्धि मूल्यों से पता चला कि दोनोंआईपीएचएएसई-हेपेटोमैक्स™ औरIPHASE-HepatoCon™ सिस्टम ने 7वें दिन तक सक्रिय एंजाइम गतिविधि दिखाई, जिससे लगातार सामान्य दवा चयापचय को बढ़ावा मिला।

 

• (3)एंजाइम गतिविधि की मान्यता के अलावा, इन विट्रो मॉडल की उपयोगिता को मान्य करने में अच्छी चयापचय स्थिरता भी एक महत्वपूर्ण और अपरिहार्य कदम है।

IPHASE ने उदाहरण के रूप में अनुवर्ती प्राथमिक मानव हेपेटोसाइट्स का उपयोग करके 80 घंटे की अवधि में टॉलबुटिमाइड की चयापचय स्थिरता निर्धारित करने के लिए हेपाटोमैक्स™, हेपाटोकॉन™ और स्ट्रोमल कोशिकाओं की तीन श्रेणियां स्थापित कीं, जिन्हें प्राथमिक के पुनर्जीवन के 3 दिन बाद प्रशासित किया गया था।हेपेटोसाइटs, और परिणामों से पता चला कि दोनोंआईपीएचएएसई-हेपेटोमैक्स™ औरIPHASE-HepatoCon™ दोनों प्रणालियों ने परख समय के सबसे लंबे समय के भीतर मजबूत चयापचय निकासी गतिविधि दिखाई।

 

संक्षेप में, IPHASE, इन विट्रो बायो-अभिकर्मकों में अग्रणी के रूप में विकसित हुआ हैआईपीएचएएसई हेपेटोमैक्स™ औरIPHASE हेपाटोकोन™ दीवार पर आधारित इन विट्रो मॉडल - प्राथमिक मानव, बंदर, कुत्ते, चूहे और चूहे पर लागूहेपेटोसाइटउत्कृष्ट चयापचय टर्नओवर, सक्रिय एंजाइम गतिविधियों और शक्तिशाली चयापचय निकासी गतिविधियों के साथ विभिन्न जेनेरा की एस और स्ट्रोमल कोशिकाएं, जो हमारे ग्राहकों को कम निकासी वाली दवाओं को विकसित करने के लिए नए विकल्प प्रदान करती हैं, और दवा की खोज को साकार करने के लिए एक अनिवार्य भागीदार हैं! दआईपीएचएएसई हेपेटोमैक्स™ औरIPHASE हेपाटोकोन™ इन विट्रो मॉडल उत्कृष्ट चयापचय टर्नओवर दर, सक्रिय एंजाइम गतिविधियों और मजबूत चयापचय निकासी गतिविधियों की पेशकश करते हैं, ग्राहकों को कम निकासी वाली दवाओं को विकसित करने के लिए नए विकल्प प्रदान करते हैं, और दवा की खोज में एक महत्वपूर्ण भागीदार हैं!

 

संदर्भ:

[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160।

[2] डि एल, ट्रैपा पी, ओबाच आर एस, एट अल। निम्न-निकासी मान निर्धारित करने के लिए एक नवीन रिले विधि[जे]। औषधि चयापचय और स्वभाव, 2012, 40(9): 1860-1865।