CD19 B frumueinangrun frá PBMC í rannsóknum á ónæmisfræði manna

Leitarorð: CD19 B frumur, CD19 úr mönnum, einangrun B frumna, jákvætt val, neikvætt val, flokkun segulkorna, MACS einangrun, B frumu auðgun, PBMC einangrun, aðskilnaður ónæmisfrumu, frystar frumusett, frosið PBMC sett, CD19 jákvætt val, CD19 neikvætt val, B eitilfrumur úr mönnum, B frumu einangrun eitilfrumuflokkunarsett, mótefnaval eitilfrumuflokkunar, mótefnaval ónæmissegulfræðilegur aðskilnaður

IPHASE vörur

CD19 B frumur eru stór eitilfruma undirhópur í ónæmiskerfi manna og eru mikið notaðar bæði í grunnrannsóknum og þýðingarrannsóknum. Í flestum tilraunavinnuflæði eru CD19 B frumur unnar úr PBMC, sem gerir PBMC að aðal upphafsefni fyrir auðgun B frumna. CD19 B frumur tákna tiltölulega lítið brot af PBMC, en þær eru mjög mikilvægar fyrir mótefnaframleiðslu, ónæmisstjórnun og sjúkdómsgerð. Vegna þessa eru CD19 B frumur oft einangraðar með því að nota ónæmissegultækni til að tryggja mikinn hreinleika og virkan heilleika.

PBMC sem aðal uppspretta CD19 B frumna

PBMC inniheldur misleitan hóp einkjarna ónæmisfrumna, þar á meðal T frumur, NK frumur, einfrumur og CD19 B frumur. Innan þessarar blöndu eru CD19 B frumur venjulega til staðar á lágri tíðni, sem gerir beina greiningu erfiða án undangenginnar auðgunar. Þess vegna þjónar PBMC sem staðlað upprunaefni fyrir CD19 B frumu einangrun. Í flestum vinnuflæði á rannsóknarstofum eru CD19 B frumur fyrst auðgaðar úr PBMC áður en þær eru notaðar í niðurstreymisnotkun eins og frumuflæðismælingu, RNA raðgreiningu eða starfrænar prófanir.

Tengsl PBMC og CD19 B frumna eru grundvallaratriði í rannsóknum á ónæmisfræði. PBMC veitir frumusamhengið en CD19 B frumur tákna markhópinn sem dreginn er út úr þessu kerfi. Skilvirkur aðskilnaður CD19 B frumna frá PBMC er því nauðsynlegur til að framleiða áreiðanleg tilraunagögn.

CD19 B frumu segulperlur einangrunaráætlun

CD19 B frumu einangrun er almennt framkvæmd með því að nota segulmagnaðir perlur - aðskilnaðartækni. Þessi kerfi reiða sig á mótefna-tengdar perlur sem bindast sérstaklega CD19 B frumum innan PBMC. Þegar þær hafa verið merktar er hægt að aðskilja CD19 B frumur með segulsviði, sem gerir hraða auðgun kleift með lágmarkskröfum um búnað.

Í þessu samhengi er hægt að framkvæma einangrun CD19 B frumna með annað hvort jákvæðu vali eða neikvæðu vali. Jákvætt val fangar CD19 B frumur beint frá PBMC með því að nota CD19-miðaða segulperlur. Þessi aðferð leiðir til mjög auðgaðra CD19 B frumna sem henta flestum downstream forritum. Aftur á móti fjarlægir neikvætt val non-B frumur úr PBMC og skilur eftir ósnortnar CD19 B frumur í upprunalegu ástandi. Báðar aðferðirnar eru mikið notaðar, allt eftir því hvort niðurstreymistilraunir krefjast viðtakaheilleika eða hámarkshreinleika.

Jákvætt val og neikvætt val á CD19 B frumum

CD19 B frumu jákvætt val er mjög skilvirkt til að fá hreina B frumu íbúa. Í þessari nálgun eru CD19 B frumur beint merktar og haldið í segulsviði, sem gerir hraða auðgun frá PBMC. Þessi aðferð er sérstaklega gagnleg þegar mikils hreinleika er krafist, eins og í CD19 B frumu virkniprófum eða umritunarsniði.

Neikvætt val á CD19 B frumum er aftur á móti hannað til að varðveita CD19 B frumur án beinrar mótefnabindingar. Í þessari aðferð eru aðrar ónæmisfrumugerðir tæmdar af PBMC, þar á meðal T frumur, NK frumur og einfrumur, en CD19 B frumur eru óbreyttar. Þessi aðferð er ákjósanleg þegar verið er að rannsaka CD19 B frumuvirkjun, boðleiðir eða mótefnavakaviðbrögð, þar sem hún dregur úr virkni gerviviðtaka.

Bæði CD19 B frumu jákvætt val og CD19 B frumu neikvætt val eru mikið notaðar í rannsóknum á ónæmisfræði manna og báðar aðferðir byrja með PBMC sem upphafsefni.

Ónæmissegulfræðilegur aðskilnaður og tilraunaforrit

Ónæmissegulfræðileg aðskilnaður er kjarnatækni á bak við einangrun CD19 B frumna. Það veitir hraðvirka og stigstærða aðferð til að auðga CD19 B frumur frá PBMC en viðhalda mikilli lífvænleika. Notkun mótefna-húðaðra segulkorna gerir sértæka bindingu kleift, fylgt eftir með skilvirkum aðskilnaði með segulsúlum eða rekki.

Eftir einangrun er hægt að nota CD19 B frumur í margvíslegum niðurstreymisnotkunum, þar með talið ónæmissvipgerð, frumuseytingargreiningu, B-frumuviðtakarannsóknum og mótefnauppgötvun. Gæði einangrunar CD19 B frumna hafa bein áhrif á endurgerð tilrauna, sem gerir hagræðingu PBMC meðhöndlunar og aðskilnaðaraðferða mikilvæg fyrir árangur í rannsóknum.

Hagræðing vinnuflæðis frá PBMC í CD19 B frumur

Í stöðluðu verkflæði á rannsóknarstofu er PBMC fyrst einangrað úr blóðsýnum úr mönnum og síðan notað sem inntak fyrir auðgun CD19 B frumna. Skilvirkni einangrunar CD19 B frumna fer eftir þáttum eins og PBMC gæðum, skilvirkni perlubindingar og valstefnu (jákvætt eða neikvætt val). Hágæða PBMC efnablöndur leiða til bættrar CD19 B frumuuppskeru og hreinleika.

Á heildina litið er einangrun CD19 B frumna frá PBMC hornsteinstækni í ónæmisfræði manna. Hvort sem þeir nota CD19 B frumu jákvætt val eða CD19 B frumu neikvætt val, treysta vísindamenn á PBMC sem nauðsynlegan upphafspunkt til að búa til starfhæfa CD19 B frumuhópa sem henta fyrir fjölbreytt úrval tilrauna.

Q1: Hvert er sambandið á milli CD19 B frumna og PBMC?

CD19 B frumur eru undirhópur PBMC. PBMC inniheldur margar ónæmisfrumugerðir, þar á meðal T frumur, NK frumur, einfrumur og CD19 B frumur. CD19 B frumur tákna tiltölulega lítið brot af PBMC og eru venjulega auðgað úr PBMC fyrir tilraunir neðanstreymis.

Spurning 2: Til hvers er CD19 B frumu einangrun notuð?

CD19 B frumu einangrun er notuð til að fá mjög hreinsaðar B frumur til rannsókna á ónæmisfræði. CD19 B frumur eru almennt einangraðar frá PBMC fyrir notkun eins og frumuflæðisgreiningu, RNA raðgreiningu, mótefnauppgötvun og virka ónæmispróf.

Spurning 3: Hver er munurinn á jákvæðu og neikvæðu vali fyrir CD19 B frumur?

CD19 B frumu jákvætt val fangar CD19 B frumur beint með því að nota mótefni-húðaðar segulperlur, sem leiðir til mikils hreinleika. Neikvætt val á CD19 B frumum fjarlægir non-B frumur úr PBMC og skilur eftir ósnortnar CD19 B frumur í innfæddra ástandi. Báðar aðferðirnar eru mikið notaðar eftir tilraunakröfum.

Spurning 4: Hvers vegna er PBMC almennt notað til að einangra CD19 B frumur?

PBMC er staðlað upphafsefnið vegna þess að það fæst auðveldlega úr útæðablóði og inniheldur allar helstu einkjarna ónæmisfrumur, þar á meðal CD19 B frumur. Notkun PBMC gerir kleift að auðga CD19 B frumur á skilvirkan hátt í gegnum segulmagnaðir perlur-aðskilnaðarkerfi.

Q5: Hvaða forrit nota CD19 B frumur einangraðar frá PBMC?

CD19 B frumur einangraðar frá PBMC eru mikið notaðar í ónæmisfræðilegum og lífeðlisfræðilegum rannsóknum, þar með talið B frumuviðtakagreiningu, frumufrumuseytingarrannsóknum, ónæmissniði og lækningamótefnaþróun. Gæði einangrunar CD19 B frumna hafa bein áhrif á áreiðanleika tilrauna á eftirleiðis.