Адамның иммунологиясын зерттеудегі PBMC-ден CD19 B жасушаларын оқшаулау

Негізгі сөздер: CD19 B жасушалары, адамның CD19, B жасушаларын оқшаулау, оң таңдау, теріс таңдау, магниттік моншақ сұрыптау, MACS оқшаулау, В жасушасын байыту, PBMC оқшаулау, иммундық жасушаларды бөлу, мұздатылған жасушалар жинағы, мұздатылған PBMC жинағы, CD19 оң таңдау, CD19 теріс таңдау, адамның В лимфоциттерін бөлу, В жасушасына қарсы іріктеу, жинақ, лимфоциттерді оқшаулау, иммуномагниттік сепарация

IPHASE өнімдері

CD19 B жасушалары адамның иммундық жүйесіндегі лимфоциттердің негізгі бөлігі болып табылады және негізгі зерттеулерде де, трансляциялық зерттеулерде де кеңінен қолданылады. Көптеген тәжірибелік жұмыс үрдістерінде CD19 B жасушалары PBMC-ден алынады, бұл PBMC-ті В жасушаларын байыту үшін негізгі бастапқы материал етеді. CD19 B жасушалары PBMC салыстырмалы аз бөлігін құрайды, бірақ олар антиденелерді өндіру, иммундық реттеу және ауруды модельдеу үшін өте маңызды. Осыған байланысты CD19 B жасушалары жоғары тазалық пен функционалдық тұтастықты қамтамасыз ету үшін иммуномагниттік технологияларды қолдану арқылы жиі оқшауланады.

PBMC CD19 B жасушаларының негізгі көзі ретінде

PBMC құрамында мононуклеарлы иммундық жасушалардың гетерогенді популяциясы бар, соның ішінде Т жасушалары, NK жасушалары, моноциттер және CD19 B жасушалары. Бұл қоспаның ішінде CD19 B жасушалары әдетте төмен жиілікте болады, бұл алдын ала байытусыз тікелей талдауды қиындатады. Сондықтан PBMC CD19 B жасушаларын оқшаулау үшін стандартты бастапқы материал ретінде қызмет етеді. Зертханалық жұмыс процестерінің көпшілігінде CD19 B жасушалары ағын цитометриясы, РНҚ реттілігі немесе функционалдық талдаулар сияқты төменгі ағындық қолданбаларда пайдаланбас бұрын алдымен PBMC-ден байытылады.

PBMC және CD19 B жасушалары арасындағы қарым-қатынас иммунология зерттеулерінде іргелі болып табылады. PBMC ұялы контекстті қамтамасыз етеді, ал CD19 B жасушалары осы жүйеден алынған мақсатты популяцияны білдіреді. CD19 B жасушаларының PBMC-ден тиімді бөлінуі сенімді эксперименттік деректерді алу үшін өте маңызды.

CD19 B жасушаларының магниттік моншақтарды оқшаулау стратегиясы

CD19 B жасушаларын оқшаулау әдетте магниттік моншаққа негізделген бөлу технологияларын қолдану арқылы орындалады. Бұл жүйелер PBMC ішіндегі CD19 B жасушаларымен арнайы байланысатын антиденелер-конъюгацияланған моншақтарға сүйенеді. Белгіленгеннен кейін CD19 B жасушаларын магнит өрісі арқылы бөлуге болады, бұл жабдықтың минималды талаптарымен жылдам байытуға мүмкіндік береді.

Осы тұрғыда CD19 B жасушасын оқшаулау оң таңдау немесе теріс таңдау арқылы орындалуы мүмкін. Оң таңдау CD19-бағыттау магниттік моншақтарды пайдаланып PBMC-ден CD19 B жасушаларын тікелей түсіреді. Бұл әдіс төменгі ағынды қолданбалардың көпшілігі үшін қолайлы жоғары байытылған CD19 B жасушаларына әкеледі. Керісінше, теріс таңдау - В емес жасушаларды PBMC-ден алып тастап, CD19 B жасушаларын табиғи күйінде қалдырады. Төменгі тәжірибелер рецепторлардың тұтастығын немесе максималды тазалықты қажет ететініне байланысты екі стратегия да кеңінен қолданылады.

CD19 B жасушаларының оң таңдауы және теріс таңдауы

CD19 В жасушасының оң таңдауы таза В жасуша популяциясын алу үшін жоғары тиімді. Бұл тәсілде CD19 B жасушалары тікелей таңбаланады және магнит өрісінде сақталады, бұл PBMC-тен жылдам байытуға мүмкіндік береді. Бұл әдіс CD19 B жасушаларының функционалдық талдаулары немесе транскриптомиялық профильдеу сияқты жоғары тазалық қажет болғанда өте пайдалы.

CD19 B жасушаларының теріс таңдауы, керісінше, антиденелерді тікелей байланыстырмай CD19 B жасушаларын сақтауға арналған. Бұл әдісте Т-клеткаларды, NK жасушаларын және моноциттерді қоса алғанда, PBMC-ден басқа иммундық жасушалар түрлері таусылады, ал CD19 B жасушалары өзгеріссіз қалады. Бұл әдіс CD19 B жасушаларының белсендірілуін, сигнал беру жолдарын немесе антигеннің жауап беру қабілетін зерттеген кезде қолайлы, өйткені ол жасанды рецепторлардың қосылуын азайтады.

CD19 B жасушаларының оң таңдауы және CD19 B жасушаларының теріс таңдауы адамның иммунологиялық зерттеулерінде кеңінен қолданылады және екі тәсіл де бастапқы материал ретінде PBMC-тен басталады.

Иммуномагниттік бөлу және эксперименттік қолдану

Иммуномагниттік бөлу CD19 B жасушаларын оқшаулаудың негізгі технологиясы болып табылады. Ол жоғары өміршеңдігін сақтай отырып, PBMC-тен CD19 B жасушаларын байытудың жылдам және масштабталатын әдісін қамтамасыз етеді. Антиденемен қапталған магниттік моншақтарды пайдалану селективті байланыстыруға мүмкіндік береді, содан кейін магниттік бағандар немесе тіректер арқылы тиімді бөлу.

Оқшауланғаннан кейін CD19 B жасушалары иммундық фенотиптеу, цитокин секрециясын талдау, В жасушаларының рецепторларын зерттеу және антиденелерді табуды қоса алғанда, әртүрлі төменгі ағынды қолданбаларда қолданылуы мүмкін. CD19 B жасушаларының оқшаулану сапасы тәжірибелік қайталануға тікелей әсер етеді, бұл PBMC өңдеу және бөлу протоколдарын оңтайландыруды зерттеудің сәттілігі үшін маңызды етеді.

PBMC-тен CD19 B ұяшықтарына жұмыс үрдісін оңтайландыру

Стандартты зертханалық жұмыс процестерінде PBMC алдымен адам қан үлгілерінен бөлініп алынады, содан кейін CD19 B жасушаларын байыту үшін кіріс ретінде пайдаланылады. CD19 B жасушаларын оқшаулаудың тиімділігі PBMC сапасы, моншақпен байланыстыру тиімділігі және таңдау стратегиясы (оң немесе теріс таңдау) сияқты факторларға байланысты. Жоғары сапалы PBMC препараттары CD19 B жасушаларының шығымдылығы мен тазалығының жақсаруына әкеледі.

Жалпы алғанда, PBMC-ден CD19 B жасушаларын оқшаулау адам иммунологиясындағы негізгі әдіс болып табылады. CD19 B жасушасының оң таңдауын немесе CD19 В жасушасының теріс таңдауын пайдаланса да, зерттеушілер тәжірибелік қолданбалардың кең ауқымы үшін жарамды CD19 B жасушаларының функционалды популяцияларын құрудың маңызды бастапқы нүктесі ретінде PBMC-ге сенеді.

1-сұрақ: CD19 B жасушалары мен PBMC арасында қандай байланыс бар?

CD19 B жасушалары PBMC субпопуляциясы болып табылады. PBMC құрамында Т жасушалары, NK жасушалары, моноциттер және CD19 B жасушалары бар көптеген иммундық жасушалар түрлері бар. CD19 B жасушалары PBMC салыстырмалы аз бөлігін білдіреді және әдетте төменгі ағындық эксперименттер үшін PBMC-ден байытылған.

2-сұрақ: CD19 B жасушасын оқшаулау не үшін қолданылады?

CD19 В жасушаларының оқшаулануы иммунологиялық зерттеулер үшін жоғары тазартылған В жасушаларын алу үшін қолданылады. CD19 B жасушалары әдетте ағын цитометриясы, РНҚ реттілігі, антиденелерді табу және функционалды иммундық талдаулар сияқты қолданбалар үшін PBMC-ден оқшауланады.

3-сұрақ: CD19 B жасушалары үшін оң және теріс таңдаудың айырмашылығы неде?

CD19 B жасушаларының оң таңдауы антиденемен қапталған магниттік моншақтарды пайдаланып CD19 B жасушаларын тікелей түсіреді, нәтижесінде жоғары тазалық болады. CD19 B жасушаларының теріс таңдауы - В емес жасушаларды PBMC-ден алып тастап, CD19 B жасушаларын анағұрлым табиғи күйде қалдырады. Екі әдіс те тәжірибелік талаптарға байланысты кеңінен қолданылады.

4-сұрақ: Неліктен PBMC CD19 B жасушаларын оқшаулау үшін жиі қолданылады?

PBMC стандартты бастапқы материал болып табылады, өйткені ол перифериялық қаннан оңай алынады және барлық негізгі мононуклеарлы иммундық жасушаларды, соның ішінде CD19 B жасушаларын қамтиды. PBMC пайдалану CD19 B жасушаларын магниттік моншаққа негізделген бөлу жүйелері арқылы тиімді байытуға мүмкіндік береді.

5-сұрақ: PBMC-ден оқшауланған CD19 B жасушаларын қандай қолданбалар пайдаланады?

PBMC-ден оқшауланған CD19 B жасушалары иммунологиялық және биомедициналық зерттеулерде, соның ішінде В жасушаларының рецепторларын талдауда, цитокин секрециясын зерттеуде, иммундық профильдеуде және емдік антиденелерді дамытуда кеңінен қолданылады. CD19 B жасушаларының оқшаулану сапасы төменгі ағындағы эксперименттік сенімділікке тікелей әсер етеді.