Хүний дархлаа судлалын судалгаанд PBMC-ээс CD19 B эсийн тусгаарлалт

Түлхүүр үгс: CD19 В эс, хүний CD19, В эсийн тусгаарлалт, эерэг сонголт, сөрөг сонголт, соронзон ирмэгийн ялгарал, MACS тусгаарлалт, В эсийг баяжуулах, PBMC тусгаарлалт, дархлааны эсийг тусгаарлах, хөлдөөсөн эсийн иж бүрдэл, хөлдөөсөн PBMC иж бүрдэл, CD19 эерэг сонголт, CD19 сөрөг сонголт, хүний В лимфоцитыг ялгах, B эсийн эсрэг биеийг ялгах, иж бүрдэл, лимфоцитын тусгаарлалт, дархлаа соронзон тусгаарлалт

IPHASE бүтээгдэхүүн

CD19 В эсүүд нь хүний ​​дархлааны тогтолцооны лимфоцитын гол хэсэг бөгөөд суурь судалгаа болон орчуулгын судалгаанд өргөн хэрэглэгддэг. Ихэнх туршилтын ажлын урсгалд CD19 В эсийг PBMC-ээс гаргаж авдаг бөгөөд PBMC нь В эсийг баяжуулах анхдагч материал болдог. CD19 В эсүүд нь PBMC-ийн харьцангуй бага хэсгийг төлөөлдөг боловч эсрэгбие үйлдвэрлэх, дархлааны зохицуулалт, өвчний загварчлалд маш чухал юм. Ийм учраас CD19 В эсийг ихэвчлэн өндөр цэвэршилт, үйл ажиллагааны бүрэн бүтэн байдлыг хангахын тулд дархлаа соронзон технологи ашиглан тусгаарладаг.

PBMC нь CD19 В эсийн үндсэн эх үүсвэр юм

PBMC нь Т эсүүд, NK эсүүд, моноцитууд, CD19 В эсүүд зэрэг мононуклеар дархлааны эсийн гетероген популяцийг агуулдаг. Энэ хольцын дотор CD19 В эсүүд ихэвчлэн бага давтамжтай байдаг бөгөөд энэ нь урьдчилан баяжуулахгүйгээр шууд шинжилгээ хийхэд хэцүү болгодог. Тиймээс PBMC нь CD19 B эсийг тусгаарлах стандарт эх материал болдог. Ихэнх лабораторийн ажлын урсгалд CD19 В эсийг урсгалын цитометр, РНХ-ийн дараалал, функциональ шинжилгээ гэх мэт хэрэглээний програмуудад ашиглахын өмнө эхлээд PBMC-ээс баяжуулдаг.

PBMC ба CD19 B эсийн хоорондын хамаарал нь дархлаа судлалын судалгааны үндэс суурь юм. PBMC нь эсийн контекстийг өгдөг бол CD19 В эсүүд нь энэ системээс гаргаж авсан зорилтот популяцийг төлөөлдөг. Тиймээс CD19 В эсийг PBMC-ээс үр дүнтэй салгах нь найдвартай туршилтын өгөгдөл гаргахад зайлшгүй шаардлагатай.

CD19 B эсийн соронзон ирмэгийн тусгаарлах стратеги

CD19 B эсийн тусгаарлалтыг ихэвчлэн соронзон ирмэгт суурилсан тусгаарлах технологи ашиглан гүйцэтгэдэг. Эдгээр системүүд нь PBMC доторх CD19 В эсүүдтэй тусгайлан холбогддог эсрэгбие-коньюгат бөмбөлгүүдэд тулгуурладаг. Шошгологдсоны дараа CD19 В эсийг соронзон орон ашиглан салгаж, тоног төхөөрөмжийн хамгийн бага шаардлагаар хурдан баяжуулах боломжтой.

Энэ хүрээнд CD19 В эсийн тусгаарлалтыг эерэг сонголт эсвэл сөрөг сонголтоор хийж болно. Эерэг сонголт нь CD19-онилсон соронзон бөмбөлгүүдийг ашиглан PBMC-ээс CD19 В эсийг шууд авдаг. Энэ арга нь доод урсгалын ихэнх хэрэглээнд тохирсон өндөр баяжуулсан CD19 В эсүүдийг бий болгодог. Үүний эсрэгээр сөрөг сонголт нь-B бус эсүүдийг PBMC-ээс устгаж, CD19 В эсийг унаган төлөв байдалд нь үлдээдэг. Доод урсгалын туршилтууд нь рецепторын бүрэн бүтэн байдал эсвэл дээд зэргийн цэвэршилтийг шаарддаг эсэхээс хамаарч хоёр стратегийг өргөн ашигладаг.

CD19 В эсийн эерэг сонголт ба сөрөг сонголт

CD19 В эсийн эерэг сонголт нь цэвэр В эсийн популяцийг олж авахад өндөр үр дүнтэй байдаг. Энэ аргын хувьд CD19 В эсийг шууд тэмдэглэж, соронзон орон дотор хадгалж, PBMC-ээс хурдан баяжуулах боломжийг олгодог. Энэ арга нь CD19 В эсийн функциональ шинжилгээ эсвэл транскриптомийн профайл хийх гэх мэт өндөр цэвэршилт шаардлагатай үед ялангуяа ашигтай байдаг.

Харин CD19 В эсийн сөрөг сонголт нь эсрэгбиетэй шууд холбоогүй CD19 В эсийг хадгалах зорилготой юм. Энэ аргын үед Т эсүүд, NK эсүүд, моноцитууд зэрэг бусад дархлааны эсүүд PBMC-ээс шавхагдаж, харин CD19 В эсүүд өөрчлөгдөөгүй хэвээр үлддэг. Энэ аргыг CD19 В эсийн идэвхжүүлэлт, дохионы зам эсвэл эсрэгтөрөгчийн хариу урвалыг судлахад илүүд үздэг, учир нь энэ нь хиймэл рецепторын оролцоог багасгадаг.

CD19 B эсийн эерэг сонголт ба CD19 В эсийн сөрөг сонголт хоёулаа хүний ​​дархлаа судлалын судалгаанд өргөн хэрэглэгддэг бөгөөд эдгээр хоёр арга нь PBMC-ээс эхэлдэг.

Дархлаа соронзон тусгаарлалт ба туршилтын хэрэглээ

Дархлаа соронзон тусгаарлалт нь CD19 В эсийг тусгаарлах үндсэн технологи юм. Энэ нь өндөр амьдрах чадварыг хадгалахын зэрэгцээ PBMC-ээс CD19 B эсийг баяжуулах хурдан бөгөөд өргөтгөх боломжтой аргыг өгдөг. Эсрэг биетээр бүрсэн соронзон бөмбөлгүүдийг ашиглах нь сонгомол холбох, дараа нь соронзон багана эсвэл тавиур ашиглан үр дүнтэй тусгаарлах боломжийг олгодог.

Тусгаарлагдсаны дараа CD19 В эсийг дархлааны фенотип тогтоох, цитокины шүүрлийн шинжилгээ, В эсийн рецепторын судалгаа, эсрэгбие илрүүлэх зэрэг янз бүрийн доод түвшний хэрэглээнд ашиглаж болно. CD19 B эсийн тусгаарлах чанар нь туршилтын дахин үржих чадварт шууд нөлөөлж, PBMC-тэй харьцах, тусгаарлах протоколыг оновчтой болгох нь судалгааны амжилтад чухал ач холбогдолтой болгодог.

PBMC-ээс CD19 B эсүүд хүртэлх ажлын урсгалыг оновчтой болгох

Стандарт лабораторийн ажлын урсгалд PBMC-ийг эхлээд хүний цусны дээжээс ялгаж аваад дараа нь CD19 В эсийг баяжуулах орц болгон ашигладаг. CD19 B эсийг тусгаарлах үр ашиг нь PBMC чанар, ирмэгийг холбох үр ашиг, сонгох стратеги (эерэг эсвэл сөрөг сонголт) зэрэг хүчин зүйлээс хамаарна. Өндөр чанартай PBMC бэлдмэлүүд нь CD19 B эсийн гарц, цэвэршилтийг сайжруулдаг.

Ерөнхийдөө PBMC-ээс CD19 B эсийг тусгаарлах нь хүний ​​дархлаа судлалын тулгын чулууны арга юм. CD19 B эсийн эерэг сонголт эсвэл CD19 В эсийн сөрөг сонголтыг ашиглаж байгаа эсэхээс үл хамааран судлаачид PBMC-ийг олон төрлийн туршилтын хэрэглээнд тохиромжтой CD19 В эсийн популяцийг бий болгох чухал эхлэлийн цэг гэж үздэг.

Асуулт 1: CD19 B эсүүд болон PBMC хооронд ямар хамааралтай вэ?

CD19 В эсүүд нь PBMC-ийн дэд популяци юм. PBMC нь Т эс, NK эс, моноцит, CD19 В эс зэрэг олон төрлийн дархлааны эсийг агуулдаг. CD19 В эсүүд нь PBMC-ийн харьцангуй бага хэсгийг төлөөлдөг бөгөөд гол төлөв доод урсгалын туршилтуудад зориулж PBMC-ээс баяжуулдаг.

Асуулт 2: CD19 B эсийн тусгаарлалтыг юунд ашигладаг вэ?

CD19 В эсийн тусгаарлалт нь дархлаа судлалын судалгаанд өндөр цэвэршүүлсэн В эсийг авахад ашиглагддаг. CD19 В эсүүд нь урсгалын цитометр, РНХ-ийн дараалал, эсрэгбие илрүүлэх, функциональ дархлааны шинжилгээ зэрэг хэрэглээнд зориулж PBMC-ээс тусгаарлагддаг.

Асуулт 3: CD19 В эсийн эерэг ба сөрөг сонголтын хооронд ямар ялгаа байдаг вэ?

CD19 В эсийн эерэг сонголт нь эсрэгбие-бүрсэн соронзон бөмбөлгүүдийг ашиглан CD19 В эсийг шууд барьж, өндөр цэвэршилттэй болгодог. CD19 B эсийн сөрөг сонголт нь-B бус эсүүдийг PBMC-ээс устгаж, CD19 B эсийг илүү унаган байдалд нь үлдээдэг. Туршилтын шаардлагаас хамааран хоёр аргыг өргөн ашигладаг.

Асуулт 4: Яагаад PBMC-ийг CD19 B эсийн тусгаарлалтад ихэвчлэн ашигладаг вэ?

PBMC нь захын цуснаас амархан гаргаж авдаг бөгөөд CD19 В эсийг багтаасан бүх үндсэн мононуклеар дархлааны эсүүдийг агуулдаг тул стандарт эхлэлийн материал юм. PBMC ашиглах нь соронзон ирмэгт суурилсан тусгаарлах системээр дамжуулан CD19 В эсийг үр ашигтай баяжуулах боломжийг олгодог.

Асуулт 5: PBMC-ээс тусгаарлагдсан CD19 B эсийг ямар программууд ашигладаг вэ?

PBMC-ээс тусгаарлагдсан CD19 В эсүүд нь В эсийн рецепторын шинжилгээ, цитокины шүүрлийн судалгаа, дархлаа тогтоох, эмчилгээний эсрэгбие боловсруулах зэрэг дархлаа судлалын болон биоанагаахын судалгаанд өргөн хэрэглэгддэг. CD19 B эсийн тусгаарлах чанар нь туршилтын найдвартай байдалд шууд нөлөөлдөг.