স্ট্যান্ডার্ড এএমইএস পরীক্ষা
এএমইএস পরীক্ষাটি এন - নাইট্রোসামাইন সহ রাসায়নিক যৌগগুলিতে মিউটেজেনিক সম্ভাবনা সনাক্ত করার জন্য একটি বহুল ব্যবহৃত অ্যাস। বিষাক্ত স্ক্রিনিংয়ে এর তাত্পর্য সত্ত্বেও, স্ট্যান্ডার্ড এএমইএস পরীক্ষার বেশ কয়েকটি সীমাবদ্ধতা রয়েছে, বিশেষত জটিল বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন প্রয়োজন যৌগগুলির মূল্যায়ন করার সময়।
স্ট্যান্ডার্ড এএমইএস পরীক্ষার সীমাবদ্ধতা
যদিও এএমইএস পরীক্ষাটি মিউটেজেনসিটি পরীক্ষায় একটি ভিত্তি হিসাবে রয়ে গেছে, এর কিছু সীমাবদ্ধতা রয়েছে:
- সীমিত বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন:
স্ট্যান্ডার্ড এএমইএস পরীক্ষায় সাধারণত ইঁদুর লিভার এস 9 ব্যবহার করে, যার নির্দিষ্ট মানুষের অভাব রয়েছে - প্রাসঙ্গিক সাইটোক্রোম পি 450 (সিওয়াইপি) এনজাইমগুলি। এটি প্রোকারকিনোজেনগুলির অন্তর্নিহিতকরণ (উদাঃ, কিছু এন - নাইট্রোসামাইনস) বা নন - মানব বিপদের অত্যধিক ক্রিয়াকলাপের দিকে পরিচালিত করতে পারে। উদাহরণ: ইঁদুর এস 9 দুর্বল নেতিবাচক ঝুঁকিপূর্ণ, মানব এনজাইমগুলির তুলনায় এন - নাইট্রোসোডাইথাইলামাইন (এনডিইএ) দুর্বলভাবে বিপাক করে।
- সীমিত মিউটেশন বর্ণালী সনাক্তকরণ:
স্ট্যান্ডার্ড স্ট্রেনগুলি (উদাঃ, টিএ 98, টিএ 100) কেবলমাত্র নির্দিষ্ট মিউটেশন প্রকারগুলি (ফ্রেমশিফ্টস, বেস - জুটির বিকল্প), অনুপস্থিত ক্লাস্টোজেন বা এপিগনেটিক কার্সিনোজেনগুলি সনাক্ত করে।
- ওভার - ব্যাকটিরিয়া সিস্টেমগুলির উপর নির্ভরতা:
যেহেতু পরীক্ষাটি সালমোনেলা টাইফিমিউরিয়াম ব্যবহার করে, তাই এটি স্তন্যপায়ী কোষগুলিতে উপস্থিত ডিএনএ মেরামত ব্যবস্থার জন্য অ্যাকাউন্ট করে না, সম্ভবত কিছু মিউটেজেনিক প্রভাব অনুপস্থিত।
- মিথ্যা ইতিবাচক এবং নেতিবাচক:
কিছু নন - মিউটেজেনিক যৌগগুলি ব্যাকটিরিয়া স্ট্রেস প্রতিক্রিয়াগুলির কারণে ইতিবাচক ফলাফল অর্জন করতে পারে, যখন জটিল বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন প্রয়োজন এমন কিছু মিউটেজেনগুলি সনাক্ত করা যায় না।
বর্ধিত ames পরীক্ষা
ইএমএর সর্বশেষ রিলিজ প্রশ্নোত্তর গাইডেন্সে বলা হয়েছে যে স্ট্যান্ডার্ড এএমইএস পরীক্ষার শর্তে কিছু এন - নাইট্রোসামাইনস (উদাঃ, এনডিএমএ) এর কম সংবেদনশীলতার কারণে, এফডিএর জাতীয় কেন্দ্রের জন্য টক্সিকোলজিকাল রিসার্চ (এনসিটিআর) প্রদত্ত বর্ধিত এএমইএস পরীক্ষার শর্তগুলি সুপারিশ করা হয়। এফডিএ এই সিদ্ধান্তে পৌঁছেছে যে এএমইএস পরীক্ষার জন্য ব্যবহৃত স্ট্যান্ডার্ড পদ্ধতিগুলি এন - নাইট্রোসামাইনগুলির মিউটেজেনিক সম্ভাব্যতা চিহ্নিত করার জন্য পর্যাপ্ত নাও হতে পারে এবং কিছু ক্ষেত্রে পরিচিত মিউটেজেনিক নাইট্রোসামাইনগুলির জন্য নেতিবাচক ফলাফল হতে পারে। প্রতিক্রিয়া হিসাবে, এফডিএর জাতীয় বিষাক্ত গবেষণা কেন্দ্র বর্ধিত এএমইএস পরীক্ষা বিকাশের জন্য বিভিন্ন শর্ত পরীক্ষা করে চলেছে, যা এন - নাইট্রোসামাইন অমেধ্যের মিউটেজেনিক সম্ভাবনার আরও নির্ভরযোগ্য মূল্যায়ন সরবরাহ করার উদ্দেশ্যে।
নিম্নলিখিত বর্ধিত এএমইএস টেস্ট (ইএটি) শর্তগুলি এফডিএ দ্বারা সরবরাহ করা হয়
পরীক্ষার স্ট্রেন |
সালমোনেলা টাইফিমিউরিয়াম টিএ 98, টিএ 100 অন্তর্ভুক্ত। TA1535, TA1537 এবং Escherichia Coli ডাব্লুপি 2 ইউভিআরএ (পিকেএম 101) পরীক্ষার স্ট্রেন |
পরীক্ষার পদ্ধতি এবং প্রাক - নিরোধক সময় |
প্রাক - নিরোধক এবং নন - ফ্ল্যাটবেডিং পদ্ধতিগুলি ব্যবহার করা উচিত, 30 মিনিটের একটি প্রস্তাবিত প্রাক - ইনসুলেশন সময় সহ। |
এস 9 টাইপ এবং ঘনত্ব |
বর্ধিত এএমইএস পরীক্ষা 30% ইঁদুর লিভার এস 9 এবং 30% সমন্বিত করা উচিতহামস্টার লিভার এস 9। ইঁদুর এবং হামস্টার ডেসমোসোমাল সুপারেনট্যান্টস (এস 9 এস) এর সাথে চিকিত্সা করা রডেন্ট লাইভার্স থেকে প্রস্তুত করা উচিতসাইটোক্রোম পি 450 এনজাইম- প্ররোচিত পদার্থ (উদাঃ, ফেনোবারবিটাল এবং β - নেফথোফ্লাভোন এর সংমিশ্রণ)। |
নেতিবাচক (দ্রাবক/এক্সপিয়েন্ট) নিয়ন্ত্রণ |
ব্যবহৃত দ্রাবকগুলি অনুযায়ী অ্যামেস পরীক্ষার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ হওয়া উচিতওইসিডি 471নির্দেশিকা। উপলব্ধ দ্রাবকগুলি অন্তর্ভুক্ত, তবে এর মধ্যে সীমাবদ্ধ নয়: (1) জল; (২) জৈব দ্রাবক যেমন এসিটোনাইট্রাইল, মিথেনল এবং ডাইমেথাইল সালফোক্সাইড (ডিএমএসও)। যখন জৈব দ্রাবকগুলি ব্যবহার করা হয়, তখন প্রাক - হোল্ডিং মিশ্রণে সর্বনিম্ন সম্ভাব্য ভলিউম ব্যবহার করা উচিত এবং এটি প্রদর্শিত হবে যে ব্যবহৃত জৈব দ্রাবকের পরিমাণ এন - নাইট্রোসামাইনগুলির বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশনে হস্তক্ষেপ করে না। |
ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ |
ওইসিডি 471 নির্দেশিকা অনুসারে, স্ট্রেন - একই সাথে নির্দিষ্ট ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণগুলি করা উচিত। এস 9 এর উপস্থিতিতে, দুটি এন - নাইট্রোসামাইনগুলিকে মিউটেজেনিক হিসাবে পরিচিত হিসাবেও ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করা উচিত। উপলভ্য এন - নাইট্রোসামাইন পজিটিভ কন্ট্রোলগুলির মধ্যে রয়েছে: এনডিএমএ, 1 - সাইক্লোপেন্টিল - 4 - নাইট্রোসোপাইপেরাজিন এনডিএসআরআইএস。 |
এএমইএস নির্ধারণের অন্যান্য সমস্ত সুপারিশগুলি ওইসিডি 471 নির্দেশিকা অনুসরণ করা উচিত |
হ্যামস্টার লিভার এস 9 ভগ্নাংশের অনন্য সুবিধা
হ্যামস্টার লিভার এস 9 ভগ্নাংশটি ইঁদুর লিভার এস 9 এর তুলনায় নির্দিষ্ট এন - নাইট্রোসামাইনগুলি সক্রিয় করার উচ্চতর দক্ষতার কারণে এমস পরীক্ষায় বিশেষভাবে মূল্যবান। এটি মানব লিভারের এনজাইমগুলিতে একটি ঘনিষ্ঠ বিপাকীয় প্রোফাইল ভাগ করে, এটি মানব ঝুঁকি মূল্যায়নের জন্য আরও প্রাসঙ্গিক করে তোলে। অতিরিক্তভাবে, হ্যামস্টার লিভার এস 9 -তে নির্দিষ্ট সাইটোক্রোম পি 450 এনজাইমগুলির উচ্চ স্তরের রয়েছে, যা মিউটেজেনগুলির জৈব কার্যকারিতার জন্য গুরুত্বপূর্ণ। এর ফলে সংবেদনশীলতা উন্নত হয় এবং মিথ্যা হ্রাস - নেতিবাচক হারগুলি হ্রাস করে, মিউটেজেনগুলির আরও ভাল সনাক্তকরণের অনুমতি দেয় যা অন্যথায় একা ইঁদুর লিভার এস 9 দিয়ে সনাক্ত করতে পারে।
উপসংহার
যদিও স্ট্যান্ডার্ড এএমইএস পরীক্ষা মিউটেজেনসিটি মূল্যায়নের জন্য একটি মৌলিক সরঞ্জাম হিসাবে রয়ে গেছে, এর সীমাবদ্ধতাগুলি আরও ভাল নির্ভুলতার জন্য উন্নতির প্রয়োজন। বর্ধিত এএমইএস পরীক্ষা, বিশেষত হ্যামস্টার লিভার এস 9 ভগ্নাংশের অন্তর্ভুক্তির সাথে, এন - নাইট্রোসামাইনগুলির মতো জটিল মিউটেজেন সনাক্তকরণকে উল্লেখযোগ্যভাবে বাড়িয়ে তোলে, ব্যাকটিরিয়া এবং স্তন্যপায়ী বিপাকের মধ্যে ব্যবধানকে কমিয়ে দেয়। এই অগ্রগতিটি সম্ভাব্য মানব কার্সিনোজেনগুলি মূল্যায়নের জন্য আরও নির্ভরযোগ্য পদ্ধতি সরবরাহ করে এবং আরও ভাল নিয়ন্ত্রক সিদ্ধান্তকে সমর্থন করে।
কীওয়ার্ডস: এন - নাইট্রোসামাইনস, এনডিএসআরআইএস, ওইসিডি 471, বর্ধিত এএমইএস পরীক্ষা, হ্যামস্টার লিভার এস 9, সাইটোক্রোম পি 450 এনজাইমস, মিউটেশন টেস্ট
পোস্ট সময়: 2025 - 03 - 12 09:22:09