Tes Ames standar
Tes Ames minangka assay sing digunakake kanggo ndeteksi potensial mutagen ing senyawa kimia, kalebu N - Nitrosaminines. Sanajan makna ing skrining toksikologis, tes Ames standar duwe sawetara watesan, utamane nalika senyawa ngevaluasi mbutuhake aktifitas metabolik.
Watesan tes standar standar
Dene tes Ames tetep dadi tanduk ing tes mutagenitas, duwe watesan tartamtu:
- Aktivitas metabolis winates:
Tes standar biasane nggunakake ati s9 sing standar, sing kurang enzim manungsa (cyp) sing ana ing kene - Iki bisa nyebabake undactivation procarcinogen (e.g., sawetara n - nitrosaminin) utawa overactivation of non - bebaya manungsa. Tuladha: Rat S9 misa metabolisasi n - nitrosodiethyllamine (nitrosodiethyllamine (nitos) dibandhingake enzim manungsa, risiko negatives palsu.
- Deteksi spektrum mutasi winates:
Galur standar (E.G., TA98, TA100) ndeteksi jinis mutasi tartamtu (rangka, dhasar - pengganti pasangan), sing ilang clastogens utawa karsinogen ilang.
- Liwat - Ketemu sistem bakteri:
Wiwit tes nggunakake Salmonella Typhimurium, ora kalebu kanggo mekanisme ndandani DNA sing ana ing sel mamalia, potensial ilang sawetara efek mutagenis.
- Positif lan negatip palsu:
Sawetara senyawa non - Mutagenic bisa ngasilake asil positif amarga tanggapan stres bakteri, dene sawetara mutagens sing mbutuhake aktifitas metabolik sing bisa uga ora bisa dilacak.
Tes Ames sing ditingkatake
Pelekasan paling anyar Q & minangka pandhuan negara nyatakake amarga sensitivitas sithik saka sawetara n - nitrosaminines (contone tes Ames sing diwenehake dening Pusat Nasional Ames, NCTR) disaranake. FDA wis rampung yen cara standar sing digunakake kanggo tes Ames bisa uga ora cukup kanggo menehi potensial potensial mutagenic saka mutagen, lan ing sawetara kasus bisa ngasilake asil negatif kanggo nitagenapan mutagenic. Nanggepi, Pusat Penelitian Toxicologis wis nyoba macem-macem kahanan kanggo ngembangake tes Amas sing ditingkatake, sing dimaksud kanggo menehi penilaian mutagenam.
Ing ngisor iki kahanan Uji (Mangan) sing diwenehake dening FDA
|
Galur tes |
Kalebu Salmonella Typhimurium TA98, TA100. TA1535, TA1537 lan Escherichia coli WP2 UVRA (PKM101) Strain |
|
Cara tes lan balan - wektu insulasi |
Prafik lan non - cara flatbedding kudu digunakake, sing disaranake ing - wektu insulasi 30 menit. |
|
S9 JENIS lan Konsentrasi S9 |
Tes AMES sing ditingkatake kudu ditindakake kanthi ngemot 30% ati S9 lan 30%Hamster Liver S9Waca rangkeng-. Suparants Hamster Desmosomal (S9S) kudu disiapake saka ati rodent sing diobatiEnzim Cytochrome P450Kèndêl ingsun - zat sing nyebabake (e.g., kombinasi fenobarbital lan β - naphthoflavone). |
|
Kontrol Negatif (Solvent / EXPIPIENT) |
Pelarut sing digunakake kudu kompatibel karo tes Ames miturutOECD 471Pandhuan. Penolar sing kasedhiya kalebu, nanging ora diwatesi: (1) banyu; (2) pelarut organik kayata Acetonitrile, Methanol, lan Dimethyl Sulfoxide (DMSO). Nalika pelarut organik digunakake, volume paling murah ing PLE - Campuran sing dicampur kudu digunakake lan kudu dituduhake manawa jumlah pelarut organik sing digunakake ora ngganggu metabolis n - nitrosaminines. |
|
Kontrol Positif |
Miturut pedoman OECD 471, saring - kontrol positif khusus kudu ditindakake kanthi bebarengan. Ing ngarsane S9, Loro N - Nitrosamin sing dikenal dadi Mutagenic uga kudu digunakake minangka kontrol positif. Kasedhiya n - Kontrol Positif Nitrosamine kalebu: NDMA, 1 - Cyplopentyl - 4 - Ndris Ndsris. |
|
Kabeh rekomendasi liyane babagan tekad Ames kudu ngetutake pedoman OECD 471 |
|
Kauntungan unik saka fraksi hamster ati S9
Fraksi hamster ati S9 utamane ditrapake ing uji amas amarga kemampuan sing luwih unggul kanggo ngaktifake tartamtu n - Nuduhake profil metabolik sing cedhak karo enzim ati manungsa, dadi luwih relevan kanggo penilaian risiko manungsa. Kajaba iku, hamster ati S9 ngemot enzim cytochrome P450 spesifik, sing penting kanggo biaptivasi mutagen. Iki nyebabake sensitivitas sing apik lan suda palsu - tarif negatif, ngidini deteksi mutagens sing bisa uga ora bisa dilacak kanthi ati-ati s9.
Kesimpulan
Nalika tes Ames standar tetep dadi alat dhasar kanggo netepke mutagenitas, watesan kudu luwih akurasi luwih apik. Tes Ames sing ditingkatake, utamane karo inklusi fraksi hamster ati S9, kanthi signifikan nambah deteksi mutagens kaya n - nitrosamin, bakteri lan mamalia metabolisme. Pamrikasan iki menehi cara sing luwih dipercaya kanggo ngevaluasi karsinogen manungsa sing potensi lan ndhukung keputusan pangaturan sing luwih apik -.
Tembung kunci: n - nitrosaminines, ndsris, oek, tesis ames, hamster ati s9, enzim mutochrome p450, tes mutasi
Wektu kirim: 2025 - 03 - 12 09:22:09