Poboljšani ames test

Standardni ames test

Ames test je široko iskorišten test za otkrivanje mutagenskog potencijala u hemijskim spojevima, uključujući n - nitrozamine. Unatoč svom značaju u toksikološkom projekciji, standardni ames test ima nekoliko ograničenja, posebno prilikom ocjenjivanja spojeva koji zahtijevaju složenu metaboličku aktivaciju.

Ograničenja standardnih ames testa

Dok test Ames ostaje kamen temeljac u testiranju mutagenosti, ima određena ograničenja:

• Ograničena metabolička aktivacija:

Standardni amesni test obično koristi pacov jetra S9, što nema određenog ljudskog - relevantnog enzima za citochrome P450 (CYP). To može dovesti do podzakonjavanja proCarcinogena (npr., Neki n - nitrozamini) ili prekomjernost ne - ljudskih opasnosti. Primjer: štakor S9 slabo metabolizira n - nitrosodietilamin (NDEA) u odnosu na ljudske enzime, riskirajući lažne negativne.

• Ograničena otkrivanje spektra izmerenja:

Standardni sojevi (npr., TA98, TA100) Otkrijte samo specifične tipove mutacije (Framehifts, BASE - zamjenski uređaji), nedostajući klastogeni ili epigenetski karcinogeni.

• Preko - oslanjanje na bakterijske sisteme:

Budući da test koristi Salmonella Tiphimurium, ne čini se za mehanizme za popravak DNK prisutnih u ćelijama sisara, potencijalno nedostaju neki mutagenski efekti.

• Lažni pozitivni i negativi:

Neki non - mutagenski spojevi mogu dati pozitivne rezultate zbog odgovora na bakterijskom stresu, dok neki mutageni koji zahtijevaju složenu metaboličku aktivaciju mogu proći neotkrivene.

Poboljšani test Ames-a

Najnovije izdanje EMA-a Q & kao smjernice navodi da se zbog niske osjetljivosti nekih N - nitrozamina (npr., NDMA) pod uvjetima standardnog ames testa, preporučuju se uvjeti poboljšanog testa amesa koji pružaju Nacionalni centar za toksikološka istraživanja u Amesu (NCTR). FDA je zaključila da se standardne metode korištene za test amesa ne smiju biti dovoljne za karakteriziranje mutagenskog potencijala N - nitrozamina, a u nekim slučajevima mogu proizvesti negativne rezultate za poznate mutagene nitrozamine. Kao odgovor, Nacionalni centar FDA-e za toksikološka istraživanja testira različite uslove za razvijanje poboljšanih testa Ames-a, koji je namijenjen pouzdanijim procjeni mutagenskih potencijala od n - nečistoće nečistoće.

Sljedeći poboljšani ames test (jesti) osiguraju FDA

Jedinstvena prednost frakcije Hrčka jetre S9

Hrmster jetra S9 frakcija posebno je vrijedna u testiranju Amesa zbog vrhunske sposobnosti za aktiviranje određenih n - nitrozamina u odnosu na jetru Rat S9. Dijeli bliže metabolički profil za enzime ljudske jetre, što je relevantnijim za procjenu ljudskog rizika. Uz to, hrčka jetra S9 sadrži viši nivo specifičnih enzima citohrom P450, koji su ključni za bioaktivaciju mutagena. To rezultira poboljšanom osjetljivošću i smanjene lažne - negativne stope, omogućujući bolje otkrivanje mutagena koji inače ne mogu biti neotkriveni sa patrom štakora S9.

Zaključak

Dok standardni ames test ostaje temeljni alat za procjenu mutagenosti, njena ograničenja zahtijevaju poboljšanja za bolju tačnost. Poboljšani test Ames, posebno s uključivanjem frakcije Hrčka jetre S9, značajno poboljšava otkrivanje složenih mutagena poput N - nitrozamina, premoštavajući jaz između metabolizma bakterijskog i sisara. Ovaj napredak pruža pouzdaniju metodu za ocjenu potencijalnih ljudskih karcinogena i podržava bolju regulatornu odluku - donošenjem.

Ključne riječi: n - nitrozamini, NDSris, OECD 471, poboljšani ames test, hrčka jetra S9, enzimi citohrom P450, mutacijski test