ایمس ٹیسٹ میں اضافہ

معیاری ایمس ٹیسٹ

ایمس ٹیسٹ کیمیائی مرکبات میں متغیر صلاحیتوں کا پتہ لگانے کے لئے وسیع پیمانے پر استعمال شدہ پرکھ ہے ، بشمول این - نائٹروسامائنز۔ زہریلا اسکریننگ میں اس کی اہمیت کے باوجود ، معیاری ایمس ٹیسٹ میں کئی حدود ہیں ، خاص طور پر جب پیچیدہ میٹابولک ایکٹیویشن کی ضرورت والے مرکبات کا جائزہ لیں۔

معیاری ایمس ٹیسٹ کی حدود

اگرچہ ایمس ٹیسٹ میوٹجینسیٹی ٹیسٹنگ میں سنگ بنیاد بنی ہوئی ہے ، اس کی کچھ حدود ہیں:

• محدود میٹابولک ایکٹیویشن:

معیاری ایمس ٹیسٹ عام طور پر چوہا جگر S9 کا استعمال کرتا ہے ، جس میں کچھ خاص انسان کی کمی ہوتی ہے - متعلقہ سائٹوکوم P450 (CYP) انزائمز۔ اس سے پروکارسینوجنز (جیسے ، کچھ این - نائٹروسامینز) کو کم کرنے یا غیر - انسانی خطرات کی حد سے زیادہ سرگرمی کا باعث بن سکتا ہے۔ مثال کے طور پر: چوہا S9 غیر تسلی بخش میٹابولائزز N - نائٹروسوڈیتھیلامین (NDEA) انسانی انزائموں کے مقابلے میں ، جھوٹے منفی کو خطرے میں ڈالتا ہے۔

• محدود اتپریورتن سپیکٹرم کا پتہ لگانا:

معیاری تناؤ (جیسے ، TA98 ، TA100) صرف مخصوص اتپریورتن کی اقسام (فریم شفٹ ، بیس - جوڑی کے متبادل) ، گمشدہ کلاسجینز یا ایپیجینیٹک کارسنجینز کا پتہ لگائیں۔

• اوور - بیکٹیریل سسٹم پر انحصار:

چونکہ ٹیسٹ میں سالمونیلا ٹائفیموریم کا استعمال کیا گیا ہے ، لہذا یہ ستنداریوں کے خلیوں میں موجود ڈی این اے کی مرمت کے طریقہ کار کا محاسبہ نہیں کرتا ہے ، جس میں ممکنہ طور پر کچھ متغیر اثرات غائب ہوتے ہیں۔

• غلط مثبت اور منفی:

کچھ نان - mutagenic مرکبات بیکٹیریل تناؤ کے ردعمل کی وجہ سے مثبت نتائج برآمد کر سکتے ہیں ، جبکہ کچھ متغیرات جن میں پیچیدہ میٹابولک ایکٹیویشن کی ضرورت ہوتی ہے اس کا پتہ نہیں چل سکتا ہے۔

بہتر ایمس ٹیسٹ

ای ایم اے کی تازہ ترین ریلیز سوال و جواب کے بطور رہنمائی میں کہا گیا ہے کہ معیاری ایمس ٹیسٹ کی شرائط کے تحت کچھ این - نائٹروسامائنز (جیسے ، این ڈی ایم اے) کی کم حساسیت کی وجہ سے ، ایف ڈی اے کے قومی مرکز برائے زہریلا تحقیق (این سی ٹی آر) کے ذریعہ فراہم کردہ ایمس ٹیسٹ کی شرائط کی سفارش کی جاتی ہے۔ ایف ڈی اے نے یہ نتیجہ اخذ کیا ہے کہ ایمس ٹیسٹ کے لئے استعمال ہونے والے معیاری طریقے N - نائٹروسامائنز کی متغیر صلاحیت کی خصوصیت کے لئے کافی نہیں ہوسکتے ہیں ، اور کچھ معاملات میں معروف mutagenic نائٹروسامائنز کے منفی نتائج پیدا کرسکتے ہیں۔ اس کے جواب میں ، ایف ڈی اے کا نیشنل سینٹر برائے زہریلا تحقیق میں اضافہ شدہ ایمس ٹیسٹ تیار کرنے کے لئے مختلف شرائط کی جانچ کی جارہی ہے ، جس کا مقصد N - نائٹروسامین نجاستوں کی متغیر صلاحیت کا زیادہ قابل اعتماد جائزہ فراہم کرنا ہے۔

مندرجہ ذیل بہتر ایمس ٹیسٹ (EAT) کے حالات ایف ڈی اے کے ذریعہ فراہم کیے گئے ہیں

ہیمسٹر جگر S9 فریکشن کا انوکھا فائدہ

ہیمسٹر جگر ایس 9 فریکشن ایمس کی جانچ میں خاص طور پر قابل قدر ہے جس کی وجہ سے چوہا جگر ایس 9 کے مقابلے میں کچھ N - نائٹروسامائنز کو چالو کرنے کی اعلی صلاحیت ہے۔ یہ انسانی جگر کے خامروں کے لئے قریب سے میٹابولک پروفائل کا اشتراک کرتا ہے ، جس سے یہ انسانی خطرے کی تشخیص کے ل more زیادہ متعلقہ ہوتا ہے۔ مزید برآں ، ہیمسٹر جگر S9 میں مخصوص سائٹوکوم P450 انزائمز کی اعلی سطح ہوتی ہے ، جو میوٹینجینز کے جیو ویکٹیویشن کے لئے اہم ہیں۔ اس کے نتیجے میں حساسیت میں بہتری آتی ہے اور غلط - منفی شرحوں کو کم کیا جاتا ہے ، جس سے متغیرات کا بہتر پتہ لگانے کی اجازت ملتی ہے جو دوسری صورت میں چوہے کے جگر S9 کے ساتھ ہی پتہ نہیں چل سکتا ہے۔

نتیجہ

اگرچہ معیاری ایمس ٹیسٹ متغیریت کا اندازہ لگانے کے لئے ایک بنیادی ذریعہ بنی ہوئی ہے ، لیکن اس کی حدود کو بہتر درستگی کے ل improve بہتری کی ضرورت ہے۔ بڑھا ہوا ایمس ٹیسٹ ، خاص طور پر ہیمسٹر جگر ایس 9 فریکشن کو شامل کرنے کے ساتھ ، نٹیروسامائنز جیسے پیچیدہ مٹگینز کی کھوج میں نمایاں اضافہ کرتا ہے ، جس سے بیکٹیریل اور ستنداریوں کے تحول کے مابین فرق کو دور کیا جاتا ہے۔ یہ پیشرفت ممکنہ انسانی کارسنجنوں کا اندازہ کرنے کے لئے ایک زیادہ قابل اعتماد طریقہ فراہم کرتی ہے اور بہتر ریگولیٹری فیصلے - بنانے کی حمایت کرتی ہے۔

کلیدی الفاظ: n - نائٹروسامائنز ، این ڈی ایس آر آئی ایس ، او ای سی ڈی 471 ، بڑھا ہوا ایمس ٹیسٹ ، ہیمسٹر جگر ایس 9 ، سائٹوکوم پی 450 انزائمز ، اتپریورتن ٹیسٹ