Estanda Ames Tès
Tès la Ames se yon tès lajman itilize pou detekte potansyèl mutagèn nan konpoze chimik, ki gen ladan n - nitrosamin. Malgre siyifikasyon li yo nan tès depistaj toksikolojik, tès la estanda Ames gen plizyè limit, patikilyèman lè evalye konpoze ki mande konplèks metabolik aktivasyon.
Limit nan tès la estanda Ames
Pandan ke tès la Ames rete yon poto nan tès mutagenicity, li gen sèten limit:
- Limite aktivasyon metabolik:
Tès la Ames estanda tipikman sèvi ak rat fwa S9, ki manke sèten imen - ki enpòtan sitokrom P450 (CYP) anzim. Sa a ka mennen nan underactivation nan procarcinogens (eg, kèk n - nitrosamin) oswa overactivation nan ki pa - danje moun. Egzanp: rat S9 mal metabolize N - nitrosodiethylamine (NDEA) konpare ak anzim moun, riske fo negatif.
- Deteksyon limite spectre mitasyon:
Tansyon estanda (eg, TA98, TA100) detekte sèlman kalite mitasyon espesifik (frameshifts, baz - pè ranplasman), ki manke clastogens oswa karsinojèn epigenetik.
- Plis pase - depandans sou sistèm bakteri:
Depi tès la sèvi ak Salmonèl typhimurium, li pa kont pou mekanis reparasyon ADN prezan nan selil mamifè yo, ki kapab manke kèk efè mutagèn.
- Fo positifs ak negatif:
Gen kèk konpoze ki pa - mutagèn ka bay rezilta pozitif akòz repons estrès bakteri, pandan ke kèk mutagens ki mande konplèks aktivasyon metabolik ka ale detèkte.
Tès la Ames ranfòse
Dènye lage EMA a & kòm konsèy eta yo ki akòz sansiblite a ki ba nan kèk n - nitrosamin (eg, NDMA) anba kondisyon ki nan tès la estanda Ames, kondisyon sa yo nan tès la Ames ranfòse ki ofri pa Sant Nasyonal FDA a pou rechèch toksikolojik (NCTR) yo rekòmande. FDA a te konkli ke metòd estanda yo itilize pou tès Ames la ka pa ase pou karakterize potansyèl mutagèn nan n - nitrosamin, ak nan kèk ka ka pwodwi rezilta negatif pou nitrosamin mutagèn li te ye. Nan repons, Sant Nasyonal FDA a pou rechèch toksikolojik te teste kondisyon diferan yo devlope ranfòse tès la Ames, ki se gen entansyon bay yon evalyasyon plis serye nan potansyèl la mutagèn nan N - enpurte nitrosamine.
Kondisyon sa yo ranfòse Ames Ames (manje) kondisyon yo bay pa FDA la
|
Tès tansyon |
Gen ladan Salmonèl Typhimurium TA98, TA100. TA1535, TA1537 ak Escherichia coli WP2 UVRA (PKM101) Tès souch |
|
Metòd tès ak pre - tan izolasyon |
Pre - izolasyon ak metòd ki pa - flatbedding yo ta dwe itilize, ak yon rekòmande pre - tan izolasyon nan 30 minit. |
|
S9 kalite ak konsantrasyon |
Yo ta dwe fè tès la Ames ranfòse dwe fèt nan ki gen 30% rat S9 fwa ak 30%Amstè fwa s9. Rat ak amstè desmosomal supernatants (S9s) yo ta dwe prepare soti nan fwa wonjè trete akCytochrome P450 anzim- sibstans ki sou pwovoke (eg, yon konbinezon de phenobarbital ak β - naphthoflavone). |
|
Kontwòl negatif (sòlvan/excipient) |
Solvang yo itilize yo ta dwe konpatib ak tès la Ames selonOECD 471Gid. Solvang ki disponib yo enkli, men yo pa limite a: (1) dlo; (2) Solvang òganik tankou acetonitrile, methanol, ak dimetil sulfoxide (DMSO). Lè yo te itilize solvants òganik, yo ta dwe itilize volim ki pi ba posib nan pre - kenbe melanj lan epi li ta dwe demontre ke kantite lajan an nan sòlvan òganik itilize pa entèfere ak aktivasyon an metabolik nan n - nitrosamin. |
|
Kontwòl pozitif |
Dapre OECD 471 direktiv, souch - kontwòl espesifik pozitif yo ta dwe fèt an menm tan an. Nan prezans S9, de n - nitrosamin yo konnen yo dwe mutagèn ta dwe tou itilize kòm kontwòl pozitif. Disponib N - Nitrosamine kontwòl pozitif yo enkli: NDMA, 1 - cyclopentyl - 4 - nitrosopiperazine ndsris。 |
|
Tout lòt rekòmandasyon sou detèminasyon Ames ta dwe swiv OECD 471 direktiv |
|
Avantaj inik nan fraksyon amstè S9 fwa
Fraksyon nan fwa amstè S9 se patikilyèman valab nan tès Ames akòz kapasite siperyè li yo aktive sèten n - nitrosamin konpare ak rat S9 fwa. Li pataje yon pi pre pwofil metabolik nan anzim fwa imen, fè li pi enpòtan pou evalyasyon risk moun. Anplis de sa, amstè fwa S9 gen pi wo nivo nan sitokrom espesifik P450 anzim yo, ki se kritik pou bioactivation nan mutagens. Sa rezilta nan amelyore sansiblite ak redwi fo - pousantaj negatif, sa ki pèmèt pi bon deteksyon nan mutagens ki ka otreman ale detèkte ak rat fwa S9 pou kont li.
Konklizyon
Pandan ke tès la Ames estanda rete yon zouti fondamantal pou evalye mutagenicity, limit li yo nesesè amelyorasyon pou pi bon presizyon. Tès la Ames ranfòse, patikilyèman ak enklizyon nan fraksyon amstè S9 fwa, siyifikativman amelyore deteksyon an nan mutagens konplèks tankou N - nitrosamin, pon an diferans ki genyen ant bakteri ak mamifè metabolis. Avansman sa a bay yon metòd plis serye pou evalye potansyèl karsinojèn imen ak sipòte pi bon desizyon regilasyon - fè.
Mo kle: N - Nitrosamin, NDSRIS, OECD 471, Enhanced Ames tès, amstè fwa S9, sitokrom P450 anzim, tès mitasyon
Post tan: 2025 - 03 - 12 09:22:09