Ames Tès pou N-Nitrosamines: Evalye mutagenicity

Entwodiksyon tès Ames la

Tès Ames la, ke yo rele tou Tès Mitasyon Ranvèse Bakteri, se yon tès ki lajman itilize pou tès byolojik ki evalye potansyèl mutajenik konpoze chimik yo, ki gen ladan N-Nitrosamines. Devlope pa Dr Bruce Ames nan ane 1970 yo, tès sa a itilize tansyon espesifik nan bakteri Salmonella typhimurium ki pote mitasyon nan jèn ki enplike nan sentèz histidine. Tès la detèmine si yon sibstans ka lakòz mitasyon nan ADN bakteri, bay yon endikasyon de potansyèl kanserojèn nan imen.

Enpòtans Tès Ames pou N-Nitrosamines

N-Nitrosamines yo konnen pou pwopriyete jenotoksik ak kanserojèn yo, paske yo ka pwovoke domaj ADN atravè alkilasyon ak estrès oksidatif. Tès Ames la patikilyèman itil nan detekte efè mutagenic yo, paske anpil N-Nitrosamines mande pou aktivasyon metabolik atravè konvèsyon anzimatik pou fòme entèmedyè elektwofil trè reyaktif ki kapab kominike avèk ADN. Aktivasyon sa a anjeneral rive nan fwa a atravè anzim cytochrome P450. Pou repwodui konvèsyon metabolik sa a nan vitro, tès la souvan fèt ak ak san aktivasyon metabolik lè l sèvi avèk melanj S9, yon preparasyon anzim fwa ki sòti nan rat, ki imite metabolis mamifè ak amelyore deteksyon nan aktivite mutagenic.

Metodoloji tès Ames la

Pwosedi estanda tès Ames la enplike etap sa yo:

1. 1. Preparasyon tansyon tès yo: Yo itilize tansyon Salmonella typhimurium ak mitasyon ki deja egziste nan jèn sentèz histidine. Tansyon sa yo pa ka grandi san yon sous histidine ekstèn sof si yon mitasyon ranvèse retabli fonksyon.
2. 2. Ekspozisyon a N-Nitrosamines: Kilti bakteri an melanje ak konpoze tès la (N-Nitrosamine) sou yon plak agar minim ki gen yon ti kantite histidine.
3. 3. Aktivasyon metabolik (S9 Mix Adisyon): Pou kont pou konvèsyon metabolik nan kò imen an, kèk echantiyon tès yo enkli fraksyon S9, yon ekstrè anzimatik ki soti nan mikrosòm fwa rat.
4. 4. Enkubasyon ak Kwasans: Plak yo enkube a 37 ° C pou 48 èdtan, sa ki pèmèt koloni bakteri yo grandi si mitasyon yo rive ki retabli sentèz histidine.
5. 5. Konte koloni ak analiz: Kantite koloni revertant (bakteri ki te reprann kapasite pou pwodui histidine) yo konte epi konpare ak plak kontwòl yo.
6. Entèpretasyon rezilta yo

• Tès Ames pozitif: Yon ogmantasyon siyifikatif nan koloni revertant konpare ak kontwòl la sijere konpoze an pwovoke mitasyon, sa ki vle di pwopriyete mutajenik ak potansyèlman kanserojèn.
• Tès Ames Negatif: Si yo pa obsève okenn ogmantasyon enpòtan, gen anpil chans pou konpoze an pa mutagen nan kondisyon tès yo.
• Relasyon Dòz-Repons: Dòz ki pi wo ki mennen nan ogmante pousantaj mitasyon ranfòse prèv mutajenisite.

Konklizyon

Tès Ames la se yon metòd rapid ak pri-efikas pou evalye mutagenisite N-Nitrosamines. Etandone asosyasyon yo ak kansè, idantifye pwopriyete mutagenic yo atravè tès sa a enpòtan anpil pou kontwòl regilasyon ak evalyasyon risk. Tès sa a rete yon poto nan tès depistaj toksikolojik ak evalyasyon sekirite chimik.

Mo kle: N-Nitrosamines, NDSRIs, OECD 471, Enhanced Ames tès, fwa amstè S9, Cytochrome P450 anzim, tès mitasyon