Сульфотрансфераза (SULT) DDI изилдөө, метаболизмдин туруктуулугу жана ферментти бөгөт коюу үчүн

Негизги сөздөр: дары-дарылардын өз ара аракеттенүүсү (DDI), сульфотрансфераза (SULT), ферменттин ингибициясы, SULT метаболизми, метаболикалык туруктуулук, адамдын SULT1A1 ферменти, адамдын SULT1A3 ферменти, адамдын SULT1B1 ферменти, адамдын SULT1C2, адамдын SULT1C4 ферменти, адамдын SULT1C4 ферменти, адамдын ферменти

1 IPHASE өндүрөт

2 Дары-дармектерди иштеп чыгуудагы ферменттик изилдөөлөр

Дарыны иштеп чыгууда CYP450, UGT, SULT ж. Метаболикалык фенотипти изилдөө LC - MS/MS технологиясы менен айкалышкан in vitro моделдерин колдонот, негизги метаболизм жолдорун, негизги метаболикалык ферменттерди жана алардын кинетикалык параметрлерин (мисалы, Km/Vmax) дары-дармектерди аныктоо жана ген полиморфизминин жекелештирилген дарыларга таасирин баалоо. Ферменттердин ингибициясын изилдөө дарылардын же кошулмалардын метаболикалык ферменттерге (мисалы, кайтуучу/кайтарымсыз бөгөт коюу) ингибитордук таасирине багытталган, болжолдоо үчүн IC50/Ki маанилерин өлчөйт.дары-дармек менен өз ара аракеттенүү (DDI)тобокелдик. Бул изилдөөлөр дары дизайнын оптималдаштыруу, коопсуздукту баалоо (мисалы, уулуу метаболиттерди аныктоо) жана так дарыларды жетектөө үчүн илимий негизди берет. Негизги маселе in vitro маалыматтарын in vivo маалыматтарына айландыруу жана аз мол метаболиттердин сезгичтигин аныктоодо турат. Келечекте, органоиддер сыяктуу өнүккөн моделдер изилдөө ишенимдүүлүгүн мындан ары жогорулатуу үчүн колдонулушу мүмкүн.

3 Сульфотрансфераза (SULT)

Сульфотрансфераза (SULT)сульфат топторунун өтүшүн катализдөөчү трансферазанын бир түрү болуп саналат жана эндогендик кошулмалардын (мисалы, гормондор жана нейротрансмиттерлер) жана экзогендик бирикмелердин (мисалы, дары-дармектер жана айлана-чөйрөнү булгоочу заттар) алмашуусуна катышат. Сульфотрансферазалар негизинен цитоплазмада жана Гольджи аппаратында жайгашып, майда молекулалуу субстраттарды (мисалы, дарылар, гормондор, нейротрансмиттерлер) жана чоң молекулаларды (пептиддер, белоктор, липиддер, гликозаминогликандар) сульфациялоого катышат. Сульфотрансферазалар негизинен SULT1, SULT2 жана SULT4 сыяктуу бир нече түргө ээ экендиги аныкталган. Сульфотрансферазанын дисфункциясы дары-дармектин нормалдуу эмес метаболизмине, ракка, эндокриндик ооруларга жана неврологиялык ооруларга алып келиши мүмкүн.

4 Сульфация/сульфонация метаболизми

Sulfation метаболизми (ошондой эле sulfation метаболизми деп аталат) дары-дармектерди in vivo утилдештирүүдө маанилүү ролду ойнойт жана жаңы дары иштеп чыгуу жана рационалдуу клиникалык дары колдонуу үчүн маанилүү негиз болуп саналат. Адамдын сульфотрансферазасы (ошондой эле сульфатаза деп аталат) организмде негизинен боор, ичке ичеги, бөйрөк жана өпкө сыяктуу органдарда кеңири таралган субстраттарга ээ. Жалпы адамдардын SULTs киретСУЛТ1А1, SULT1A3, СУЛТ1Б1, SULT1C2, жанаSULT1C4 (таблица 1). Көпчүлүк субстраттар үчүн sulfotransferase ортомчу метаболизм көбүнчө субстрат бөгөт коюунун типтүү мүнөздөмөлөрүн көрсөтөт; Төмөн субстрат концентрациясынын деңгээли, адатта, ферменттин экспрессиясын жаратат.

Таблица 1 Адам денесиндеги жарым-жартылай SULT супер үй-бүлөсүнүн таралышы жана функциясы

5 SULTтин дарыларды иштеп чыгуудагы негизги колдонмолору

5.1 Metabolism негизинде DDI In vitro баалоо

SULT ортомчу DDIге in vitro баа берүү негизинен тандалма ингибиторлор (мисалы, quercetin, DCNP) же адамдын боор цитоплазмасындагы рекомбинантты фермент системалары же SULTтин белгилүү субтиптерин билдирген клетка моделдери аркылуу жүргүзүлөт. Эксперименттик дизайн, адатта, төмөнкүлөрдү камтыйт:

Метаболикалык фенотип анализи: LC-MS/MS тарабынан сульфаттуу метаболиттин пайда болуу ылдамдыгын сандык аныктоо жана бөгөт коюу ылдамдыгын (IC50/Ki мааниси) эсептөө.

Клиникалык тобокелдикти болжолдоо: Эгерде ингибитор метаболиттерди өндүрүүнү олуттуу түрдө төмөндөтсө (тоскоолдук көрсөткүчү>50%), ал SULT метаболизмине көз каранды болгон дары-дармектердин тазаланышына тоскоол болушу мүмкүн жана андан ары in vivo валидация талап кылынат.

5.2 SULT метаболикалык туруктуулугун изилдөө

Дарыны иштеп чыгууда SULT метаболизминин туруктуулугун изилдөө LC - MS/MS анализи менен айкалышкан in vitro инкубациялоо (боор цитоплазмасы/АПС) аркылуу жүргүзүлөт, дары сульфациясынын ылдамдыгын жана метаболиттин генерациясын аныктоо, SULT субтипинин негизги салымдарын аныктоо, метаболизмдик клиренс тобокелдиктерин баалоо жана структуралык оптималдаштырууну жетектөө.

5.3 Метаболикалык субстрат изилдөө

SULTтин субстрат изилдөө ыкмасы (метаболикалык жолду аныктоо ыкмасы) CYP энзимдеринин дизайнына түздөн-түз кайрыла алат, ал адегенде тиешелүү субтиптерди текшерүү үчүн химиялык бөгөттү колдонот, андан кийин аларды ген рекомбиназалары менен текшерет жана алардын салыштырмалуу салымын эсептейт.

SULT химиялык ингибиторунун тестинин негизги принциби жана техникалык жолу адамдын боор цитоплазмасынын системасында SULTтин селективдүү ингибиторлору Quercetin жана DCNP модификациялоо аркылуу эненин метаболизми же метаболит өндүрүшү бөгөттөлөөрүн баалоо болуп саналат.

5.4 Ферменттердин бөгөт коюу изилдөөлөрү

SULT көптөгөн эндогендик заттардын жана дарылардын метаболизмине катышат. Эгерде дары-дармектер SULT активдүүлүгүнө бөгөт коюу үчүн иштелип чыкса, дарыларды бөлүшүүдө коопсуздук боюнча потенциалдуу көйгөйлөр болушу мүмкүн. SULT энзиминин ингибиторунун анализинин негизги принциби жана техникалык жолу - SULT таза фермент системасын колдонуу p-nitrophenol сульфатынын метаболитинин өндүрүшү изилденүүчү дарыларды жана p-nitrophenol сыяктуу зонд субстраттарын кошуу менен бөгөттөлгөндүгүн аныктоо.

6 Корутунду

Сульфотрансфераза (SULT) дары зат алмашууда, дары-дармек менен өз ара аракеттенүүдө (DDI) жана коопсуздукту баалоодо маанилүү ролду ойнойт. Ал ортомчулук кылган сульфация метаболизми дары-дармектин тазаланышына, активдештирилишине же уулуулугуна (мисалы, гормондук препараттардын жана айлана-чөйрөнү булгоочу заттардын метаболизмине) таасирин тийгизет, ал эми ферменттерди бөгөт коюу боюнча изилдөөлөр клиникалык DDI коркунучун алдын ала айта алат. In vitro моделдерин (боор цитоплазмасы, рекомбинантты ферменттер) LC-MS/MS технологиясы менен айкалыштыруу менен, SULT субтиптеринин (мисалы, SULT1A1, SULT2A1 сыяктуу) метаболизмдик салымдарын тактоого болот, дары түзүмүн оптималдаштырууну жана жекелештирилген дарыларды жетектейт. Келечекте, органоиддер сыяктуу өнүккөн моделдер SULT изилдөөлөрүнүн котормо маанисин дагы жогорулатып, дары-дармектерди иштеп чыгууда метаболизмдин туруктуулугу жана коопсуздугу үчүн тагыраак баа берүү критерийлерин камсыз кылат.

Шилтеме

Li, Y., Lindsay, J., Wang, L. L., & Zhou, S. F. (2008). Адамдын цитозолдук сульфотрансферазаларынын түзүлүшү, кызматы жана полиморфизми. Учурдагы дары метаболизми, 9(2), 99-105.