DDI පර්යේෂණ, පරිවෘත්තීය ස්ථායීතාවය සහ එන්සයිම නිෂේධනය සඳහා Sulfotransferase(SULT)

මූලික වචන: ඖෂධ-ඖෂධ අන්තර්ක්‍රියා (DDI), සල්ෆොට්‍රාන්ස්ෆෙරේස් (SULT), එන්සයිම නිෂේධනය, SULT පරිවෘත්තීය, පරිවෘත්තීය ස්ථායීතාවය, මානව SULT1A1 එන්සයිමය, මානව SULT1A3 එන්සයිමය, මානව SULT1B1 එන්සයිමය, මානව SULT1C2, මානව SULT1C4 enzyme, මානව SULT1C4 SULT2A1 එන්සයිමය

1 IPHASE නිෂ්පාදනය කරයි

2 ඖෂධ සංවර්ධනය පිළිබඳ එන්සයිම පර්යේෂණ

ඖෂධ සංවර්ධනයේදී, CYP450, UGT, SULT වැනි පරිවෘත්තීය එන්සයිමවල පරිවෘත්තීය ෆීනෝටයිප් සහ එන්සයිම නිෂේධනය පිළිබඳ අධ්‍යයනය ඉතා වැදගත් වේ. ප්‍රධාන පරිවෘත්තීය මාර්ග, ප්‍රධාන පරිවෘත්තීය එන්සයිම සහ ඖෂධවල චාලක පරාමිතීන් (Km/Vmax වැනි) හඳුනා ගැනීමට සහ පුද්ගලාරෝපිත ඖෂධ මත ජාන බහුරූපතාවේ බලපෑම ඇගයීමට LC-MS/MS තාක්ෂණය සමඟ ඒකාබද්ධව පරිවෘත්තීය සංසිද්ධි පර්යේෂණ මගින් vitro ආකෘති භාවිතා කරයි. එන්සයිම නිෂේධන පර්යේෂණය පුරෝකථනය කිරීමට IC50/Ki අගයන් මැනීම, පරිවෘත්තීය එන්සයිම (ප්‍රතිවර්ත කළ හැකි/ආපසු හැරවිය නොහැකි නිෂේධනය වැනි) මත ඖෂධ හෝ සංයෝගවල නිෂේධනීය බලපෑම් කෙරෙහි අවධානය යොමු කරයි.මත්ද්රව්ය-මත්ද්රව්ය අන්තර්ක්රියා (DDI)අවදානම. මෙම අධ්‍යයනයන් ඖෂධ නිර්මාණය ප්‍රශස්ත කිරීම සඳහා විද්‍යාත්මක පදනමක් සපයයි, ආරක්ෂාව ඇගයීම (විෂ පරිවෘත්තීය හඳුනා ගැනීම වැනි) සහ නිරවද්‍ය ඖෂධ මඟ පෙන්වීම. මූලික අභියෝගය වන්නේ in vitro in vivo දත්ත බවට පරිවර්තනය කිරීම සහ අඩු බහුල පරිවෘත්තීය හඳුනාගැනීමේ සංවේදීතාවයි. අනාගතයේදී, පර්යේෂණ විශ්වසනීයත්වය තවදුරටත් ඉහළ නැංවීම සඳහා organoids වැනි උසස් මාදිලි භාවිතා කළ හැකිය.

3 Sulfotransferase (SULT)

Sulfotransferase (SULT)සල්ෆේට් කාණ්ඩ මාරු කිරීම උත්ප්‍රේරකයක් වන අතර එය අන්තරාසර්ග සංයෝග (හෝමෝන සහ ස්නායු සම්ප්‍රේෂක වැනි) සහ බාහිර සංයෝග (ඖෂධ සහ පාරිසරික දූෂක වැනි) පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියට සම්බන්ධ වේ. Sulfotransferases ප්‍රධාන වශයෙන් කුඩා අණු උපස්ථර (ඖෂධ, හෝමෝන, ස්නායු සම්ප්‍රේෂක වැනි) සහ විශාල අණු (පෙප්ටයිඩ, ප්‍රෝටීන, ලිපිඩ, glycosaminoglycans වැනි) සල්ෆේටනයට සම්බන්ධ වන සයිටොප්ලාස්ම් සහ ගොල්ගි උපකරණවල පිහිටා ඇත. Sulfotransferases ප්‍රධාන වශයෙන් SULT1, SULT2 සහ SULT4 ඇතුළු බහුවිධ උප වර්ග ඇති බව හඳුනාගෙන ඇත. sulfotransferase හි අක්රිය වීම අසාමාන්ය ඖෂධ පරිවෘත්තිය, පිළිකා, අන්තරාසර්ග ආබාධ සහ ස්නායු ආබාධ ඇති විය හැක.

4 Sulfation/Sulfonation පරිවෘත්තීය

සල්ෆනේෂන් පරිවෘත්තීය (සල්ෆේෂන් පරිවෘත්තීය ලෙසද හැඳින්වේ) ඖෂධ vivo බැහැර කිරීමේදී වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරන අතර නව ඖෂධ සංවර්ධනය සහ තාර්කික සායනික ඖෂධ භාවිතය සඳහා වැදගත් පදනමකි. Human sulfotransferase (sulfatase ලෙසද හැඳින්වේ) ශරීරයේ පුළුල් පරාසයක උපස්ථර ඇත, ප්‍රධාන වශයෙන් අක්මාව, කුඩා අන්ත්‍රය, වකුගඩු සහ පෙනහළු වැනි අවයවවල බෙදා හරිනු ලැබේ. පොදු මානව SULTs ඇතුළත් වේSULT1A1, SULT1A3, SULT1B1, SULT1C2, සහSULT1C4 (වගුව 1). බොහෝ උපස්ථර සඳහා, sulfotransferase මැදිහත් පරිවෘත්තීය බොහෝ විට සාමාන්ය උපස්ථර නිෂේධන ලක්ෂණ පෙන්නුම් කරයි; අඩු උපස්ථර සාන්ද්‍රණ මට්ටම් සාමාන්‍යයෙන් එන්සයිම ප්‍රකාශනය ඇති කරයි.

වගුව 1 මිනිස් සිරුරේ අර්ධ වශයෙන් SULT සුපිරි පවුලෙහි ව්‍යාප්තිය සහ ක්‍රියාකාරිත්වය

5 ඖෂධ සංවර්ධනයේ SULT හි ප්‍රධාන යෙදුම්

5.1 පරිවෘත්තීය මත පදනම්ව DDI හි Vitro ඇගයීම

SULT මැදිහත් වූ DDI හි in vitro ඇගයීම ප්‍රධාන වශයෙන් සිදු කරනු ලබන්නේ තෝරාගත් නිෂේධක (quercetin, DCNP වැනි) හෝ මානව රක්තපාත සයිටොප්ලාස්මයේ ඇති ප්‍රතිසංයෝජන එන්සයිම පද්ධති හෝ විශේෂිත SULT උප වර්ග ප්‍රකාශ කරන සෛල ආකෘති හරහාය. පර්යේෂණාත්මක නිර්මාණයට සාමාන්‍යයෙන් ඇතුළත් වන්නේ:

පරිවෘත්තීය ෆීනෝටයිප් විශ්ලේෂණය: LC-MS/MS මගින් සල්ෆේටඩ් පරිවෘත්තීය උත්පාදන අනුපාතය ප්‍රමාණ කරන්න සහ නිෂේධන අනුපාතය ගණනය කරන්න (IC50/Ki අගය).

සායනික අවදානම් පුරෝකථනය: නිෂේධකය පරිවෘත්තීය නිෂ්පාදනය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කරයි නම් (නිෂේධන අනුපාතය> 50%), එය SULT පරිවෘත්තීය මත යැපෙන ඖෂධ නිෂ්කාශනයට බාධා කළ හැකි බව යෝජනා කරයි, සහ තවදුරටත් vivo වලංගු කිරීම අවශ්‍ය වේ.

5.2 SULT පරිවෘත්තීය ස්ථායීතා අධ්‍යයනය

ඖෂධ සංවර්ධනයේදී, SULT පරිවෘත්තීය ස්ථායීතාවය අධ්‍යයනය කරනු ලබන්නේ in vitro incubation (hepatic cytoplasm/APS) මගින් ඖෂධ සල්ෆේෂන් අනුපාතය සහ පරිවෘත්තීය උත්පාදනය තීරණය කිරීම, ප්‍රධාන SULT උපවර්ගයේ දායකත්වයන් හඳුනා ගැනීම, පරිවෘත්තීය නිෂ්කාශන අවදානම් තක්සේරු කිරීම සහ ව්‍යුහාත්මක ප්‍රශස්තකරණය මඟ පෙන්වීම සඳහා LC-MS/MS විශ්ලේෂණය සමඟ ඒකාබද්ධව සිදු කෙරේ.

5.3 පරිවෘත්තීය උපස්ථර පර්යේෂණ

SULT හි උපස්ථර පර්යේෂණ ක්‍රමය (පරිවෘත්තීය මාර්ග හඳුනාගැනීමේ ක්‍රමය) සෘජුවම CYP එන්සයිමවල සැලසුම වෙත යොමු විය හැක, එය ප්‍රථමයෙන් අදාළ උප වර්ග සඳහා තිරගත කිරීම සඳහා රසායනික නිෂේධනය භාවිතා කරයි, පසුව ඒවා ජාන ප්‍රතිසංයෝජන මගින් සත්‍යාපනය කර ඒවායේ සාපේක්ෂ දායකත්වය ගණනය කරයි.

SULT හි රසායනික නිෂේධන පරීක්ෂණයේ ප්‍රධාන මූලධර්මය සහ තාක්ෂණික මාර්ගය වන්නේ මානව රක්තපාත සයිටොප්ලාස්ම් පද්ධතියේ SULT හි තෝරාගත් නිෂේධක Quercetin සහ DCNP වෙනස් කිරීමෙන් මාතෘ පරිවෘත්තීය හෝ පරිවෘත්තීය නිෂ්පාදනය වළක්වන්නේද යන්න තක්සේරු කිරීමයි.

5.4 එන්සයිම නිෂේධන පර්යේෂණ

SULT බහු ආවේණික ද්රව්ය සහ ඖෂධවල පරිවෘත්තීය ක්රියාවලියට සම්බන්ධ වේ. SULT හි ක්‍රියාකාරිත්වය වැලැක්වීම සඳහා ඖෂධ නිපදවන්නේ නම්, ඖෂධ බෙදාගැනීමේදී ආරක්ෂිත ගැටළු ඇති විය හැක. SULT එන්සයිම නිෂේධනය කිරීමේ ප්‍රධාන මූලධර්මය සහ තාක්‍ෂණික මාර්ගය වන්නේ පරිවෘත්තීය p-නයිට්‍රොෆෙනෝල් සල්ෆේට් නිෂ්පාදනය නිෂේධනය කරන්නේද යන්න සොයා බැලීම සඳහා SULT පිරිසිදු එන්සයිම පද්ධතියක් භාවිත කිරීම සහ p-nitrophenol වැනි විමර්ශන ඖෂධ සහ පරීක්ෂණ උපස්ථර එකතු කිරීමෙනි.

6 නිගමනය

Sulfotransferase (SULT) ඖෂධ පරිවෘත්තිය, ඖෂධ-ඖෂධ අන්තර්ක්‍රියා (DDI) සහ ආරක්ෂාව තක්සේරු කිරීමේදී තීරණාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි. එය මගින් මැදිහත් වන සල්ෆේෂන් පරිවෘත්තීය ඖෂධ නිෂ්කාශනය, සක්රිය කිරීම හෝ විෂ වීම (හෝමෝන ඖෂධ පරිවෘත්තීය හා පාරිසරික දූෂක වැනි) බලපාන අතර, එන්සයිම නිෂේධන අධ්යයන සායනික DDI අවදානම පුරෝකථනය කළ හැකිය. LC-MS/MS තාක්‍ෂණය සමඟ in vitro මාදිලි (අක්මාව සයිටොප්ලාස්ම්, ප්‍රතිසංයෝජන එන්සයිම) ඒකාබද්ධ කිරීමෙන්, SULT උප වර්ගවල (SULT1A1, SULT2A1 වැනි) පරිවෘත්තීය දායකත්වය පැහැදිලි කළ හැකි අතර, ඖෂධ ව්‍යුහය ප්‍රශස්තකරණය සහ පුද්ගලාරෝපිත ඖෂධ මඟ පෙන්වයි. අනාගතයේදී, organoids වැනි උසස් මාදිලි SULT පර්යේෂණයේ පරිවර්තන අගය තවදුරටත් වැඩිදියුණු කරනු ඇත, පරිවෘත්තීය ස්ථායීතාවය සහ ඖෂධ සංවර්ධනයේ ආරක්ෂාව සඳහා වඩාත් නිවැරදි ඇගයීම් නිර්ණායක සපයයි.

යොමුව

Li, Y., Lindsay, J., Wang, L. L., & Zhou, S.F. (2008). මානව සයිටොසොලික් සල්ෆොට්‍රාන්ස්ෆෙරේස් වල ව්‍යුහය, ක්‍රියාකාරිත්වය සහ බහුරූපතාව. වත්මන් ඖෂධ පරිවෘත්තීය, 9(2), 99-105.