Сулфотрансфераза (SULT) барои тадқиқоти DDI, устувории метаболикӣ ва ҷилавгирӣ аз фермент

Калидвожаҳо: таъсири маводи мухаддир-таъсири маводи мухаддир (DDI), сульфотрансфераза (SULT), ингибицияи ферментҳо, метаболизми SULT, устувории метаболикӣ, ферменти SULT1A1 инсон, фермент SULT1A3 инсон, фермент SULT1B1 инсон, SULT1C2 инсон, фермент SULT1C4 инсон, фермент SULT1SULT1SULT12 инсон.

1 IPHASE истеҳсол мекунад

2 Тадқиқоти ферментативӣ дар рушди маводи мухаддир

Дар таҳияи маводи мухаддир омӯзиши фенотипҳои метаболикӣ ва ҷилавгирии ферментҳои ферментҳои метаболикӣ ба монанди CYP450, UGT, SULT ва ғайра муҳим аст. Тадқиқоти фенотипи метаболикӣ моделҳои in vitro дар якҷоягӣ бо технологияи LC - MS/MS барои муайян кардани роҳҳои асосии мубодилаи моддаҳо, ферментҳои асосии метаболикӣ ва параметрҳои кинетикии онҳо (ба монанди Km / Vmax) доруҳо ва арзёбии таъсири полиморфизми ген ба доруҳои фардӣ истифода мебарад. Тадқиқоти ҷилавгирӣ аз ферментҳо ба таъсири ингибитории доруҳо ё пайвастагиҳо ба ферментҳои метаболикӣ (масалан, монеъшавии баргардонидашаванда/бебозгашт), чен кардани арзишҳои IC50/Ki барои пешгӯӣ равона шудааст.таъсири мутақобилаи маводи мухаддир - маводи мухаддир (DDI)хавф. Ин тадқиқотҳо барои оптимизатсияи тарҳрезии доруҳо, арзёбии бехатарӣ (ба монанди муайян кардани метаболитҳои заҳролуд) ва роҳнамоии доруҳои дақиқ заминаи илмӣ медиҳанд. Мушкилоти асосӣ дар табдилдиҳии in vitro ба маълумоти in vivo ва ҳассосияти ошкор кардани метаболитҳои фаровони кам аст. Дар оянда моделҳои пешрафта, аз қабили органоидҳо метавонанд барои боз ҳам баланд бардоштани эътимоднокии тадқиқот истифода шаванд.

3 Сулфотрансфераза (SULT)

Сулфотрансфераза (SULT)як навъи трансфераза аст, ки интиқоли гурӯҳҳои сулфатро катализ мекунад ва дар мубодилаи пайвастагиҳои эндогенӣ (аз қабили гормонҳо ва нейротрансмиттерҳо) ва пайвастагиҳои экзогенӣ (ба монанди доруҳо ва ифлоскунандаи муҳити зист) иштирок мекунад. Сулфотрансферазаҳо асосан дар ситоплазма ва аппарати Голҷи ҷойгир шуда, дар сулфатизатсияи субстратҳои молекулаҳои хурд (аз қабили доруҳо, гормонҳо, нейротрансмиттерҳо) ва молекулаҳои калон (монанди пептидҳо, сафедаҳо, липидҳо, гликозаминогликанҳо) иштирок мекунанд. Сулфотрансферазаҳо муайян карда шудаанд, ки зергурӯҳҳои сершумор доранд, асосан SULT1, SULT2 ва SULT4. Вайроншавии сульфотрансфераза метавонад ба мубодилаи ғайримуқаррарии маводи мухаддир, саратон, ихтилоли эндокринӣ ва ихтилоли асаб оварда расонад.

4 Метаболизми сулфатизатсия/сулфанатсия

Метаболизми сульфатизатсия (инчунин бо номи метаболизми сулфатӣ маълум аст) дар нобудсозии in vivo доруҳо нақши муҳим мебозад ва барои таҳияи нави доруворӣ ва истифодаи оқилонаи клиникии дору заминаи муҳим аст. Сулфотрансферазаи инсон (инчунин бо номи сулфатаза маълум аст) дорои доираи васеи субстратҳо дар бадан аст, ки асосан дар узвҳо ба монанди ҷигар, рӯдаҳои хурд, гурдаҳо ва шушҳо паҳн мешаванд. Ба SULT-ҳои маъмулии инсонӣ дохил мешавандСУЛТ1А1, СУЛТ1А3, SULT1B1, SULT1C2, ваSULT1C4 (ҷадвали 1). Барои аксари субстратҳо, мубодилаи миёнаравии сулфотрансфераза аксар вақт хусусиятҳои хоси монеъшавии субстратро нишон медиҳад; Сатҳи пасти консентратсияи субстрат одатан ифодаи ферментҳоро ба вуҷуд меорад.

Љадвали 1 Тақсим ва вазифаи супероилаи қисман SULT дар бадани инсон

5 Барномаҳои асосии SULT дар рушди маводи мухаддир

5.1 Арзёбии DDI дар In Vitro дар асоси Метаболизм

Арзёбии DDI тавассути SULT миёнаравӣ асосан тавассути ингибиторҳои интихобӣ (ба монанди кверцетин, DCNP) ё системаҳои рекомбинантии ферментҳо дар ситоплазмаи ҷигари инсон ё моделҳои ҳуҷайра, ки зергурӯҳҳои мушаххаси SULT-ро ифода мекунанд, анҷом дода мешавад. Тарҳрезии таҷрибавӣ одатан дар бар мегирад:

Таҳлили фенотипи метаболикӣ: Миқдори тавлиди метаболитҳои сулфатдорро аз ҷониби LC-MS/MS муайян кунед ва суръати монеъшавиро ҳисоб кунед (қимати IC50/Ki).

Пешгӯии хатари клиникӣ: Агар ингибитор истеҳсоли метаболитҳоро ба таври назаррас коҳиш диҳад (меъёри ингибиторӣ> 50%), он метавонад ба тозакунии доруҳои вобаста ба мубодилаи SULT халал расонад ва минбаъд тасдиқи in vivo лозим аст.

5.2 Омӯзиши устувории метаболикии SULT

Дар таҳияи маводи мухаддир, омӯзиши устувории метаболикии SULT тавассути инкубатсияи in vitro (ситоплазми ҷигар/APS) дар якҷоягӣ бо таҳлили LC - MS/MS барои муайян кардани суръати сулфати маводи мухаддир ва тавлиди метаболитҳо, муайян кардани саҳмҳои асосии SULT, арзёбии хатарҳои тозакунии метаболикӣ ва роҳнамоии оптимизатсияи сохторӣ гузаронида мешавад.

5.3 Тадқиқоти субстратҳои метаболикӣ

Усули тадқиқоти субстрат (усули муайянкунии роҳи метаболикӣ)-и SULT метавонад мустақиман ба тарҳрезии ферментҳои CYP ишора кунад, ки аввал монеаи кимиёвиро барои таҳқиқи зертипҳои дахлдор истифода мебарад ва сипас онҳоро бо рекомбиназаҳои ген тафтиш мекунад ва саҳми нисбии онҳоро ҳисоб мекунад.

Принсипи асосӣ ва масири техникии санҷиши монеъшавии кимиёвии SULT аз он иборат аст, ки оё мубодилаи моддаҳои модарӣ ё истеҳсоли метаболитҳо тавассути тағир додани ингибиторҳои интихобшудаи Quercetin ва DCNP-и SULT дар системаи ситоплазмаи ҷигари инсон монеъ мешавад.

5.4 Тадқиқоти монеъшавии ферментҳо

SULT дар мубодилаи моддаҳои эндогении сершумор ва доруҳо иштирок мекунад. Агар доруҳо барои ҷилавгирӣ аз фаъолияти SULT таҳия карда шаванд, ҳангоми мубодилаи маводи мухаддир метавонад мушкилоти эҳтимолии бехатарӣ ба вуҷуд ояд. Принсипи асосӣ ва масири техникии таҳлили монеъшавии ферментҳои SULT ин истифодаи системаи ферментҳои холиси SULT барои муайян кардани он, ки оё истеҳсоли метаболити сулфати p-nitrophenol тавассути илова кардани доруҳои таҳқиқотӣ ва субстратҳои санҷишӣ ба монанди p-nitrophenol монеъ мешавад.

6 Хулоса

Сулфотрансфераза (SULT) дар мубодилаи маводи мухаддир, таъсири мутақобилаи маводи мухаддир - маводи мухаддир (DDI) ва арзёбии бехатарӣ нақши муҳим мебозад. Метаболизми сульфатизатсия, ки тавассути он миёнаравӣ мешавад, ба тозакунӣ, фаъолсозӣ ё заҳролудшавии маводи мухаддир таъсир мерасонад (ба монанди мубодилаи моддаҳои гормонҳо ва ифлоскунандаҳои муҳити зист), дар ҳоле ки таҳқиқоти ҷилавгирӣ аз фермент метавонад хатари клиникии DDI-ро пешгӯӣ кунад. Бо омезиши моделҳои in vitro (ситоплазмаи ҷигар, ферментҳои рекомбинантӣ) бо технологияи LC - MS/MS, саҳми метаболикии зергурӯҳҳои SULT (ба монанди SULT1A1, SULT2A1) мумкин аст равшан карда шавад, ки ба оптимизатсияи сохтори доруҳо ва доруҳои фардӣ роҳнамоӣ мекунад. Дар оянда, моделҳои пешрафта ба монанди органоидҳо арзиши тарҷумаи тадқиқоти SULT-ро боз ҳам баланд мебардоранд ва меъёрҳои дақиқи арзёбии устувории метаболикӣ ва бехатариро дар таҳияи маводи мухаддир таъмин мекунанд.

Истинод

Ли, Ю., Линдсей, Ҷ., Ванг, Л.Л., ва Чжоу, С.Ф. (2008). Сохтор, вазифа ва полиморфизми сулфотрансферазаҳои ситозоликии инсон. Метаболизми ҳозираи маводи мухаддир, 9(2), 99-105.