Deuchainn Ames airson N - Nitrosamines: A’ Measadh Mutagenicity

Ro-ràdh don Ames Test

Tha an deuchainn Ames, ris an canar cuideachd Bacterial Reverse Mutation Test air a chleachdadh gu farsaing airson assay bith-eòlasach a bhios a’ measadh comas mutagenic todhar ceimigeach, a ’toirt a-steach N - Nitrosamines. Air a leasachadh leis an Dotair Bruce Ames anns na 1970n, tha an deuchainn seo a’ cleachdadh gathan sònraichte den bacterium Salmonella typhimurium a bhios a’ giùlan mùthaidhean ann an ginean a tha an sàs ann an synthesis histidine. Bidh an deuchainn a’ dearbhadh an urrainn do stuth mùthaidhean adhbhrachadh ann an DNA bacterial, a’ toirt seachad comharra air carcinogenicity a dh’ fhaodadh a bhith ann an daoine.

Co-cheangailte ris an Deuchainn Ames airson N - Nitrosamines

N - Tha nitrosamines ainmeil airson na feartan genotoxic agus carcinogenic aca, oir faodaidh iad milleadh DNA adhbhrachadh tro alkyllation agus cuideam oxidative. Tha an deuchainn Ames gu sònraichte feumail ann a bhith a’ lorg am buaidhean mutagenic, leis gu bheil mòran de N - nitrosamines ag iarraidh gnìomhachd metabolach tro thionndadh enzymatic gus eadar-mheadhanan electrophilic fìor reactive a chruthachadh a tha comasach air eadar-obrachadh le DNA. Mar as trice bidh an gnìomhachd seo a’ tachairt anns an òr tro enzymes cytochrome P450. Gus an tionndadh metabollach seo ath-riochdachadh ann an vitro, bidh an deuchainn gu tric air a dhèanamh le agus às aonais gnìomhachd metabolach a’ cleachdadh measgachadh S9, ullachadh enzym grùthan a thig bho chreutairean, a bhios ag atharrais air metabolism mamalan agus a chuireas ri lorg gnìomhachd mutagenic.

Dòigh-obrach an Ames Test

Tha modh àbhaisteach deuchainn Ames a’ toirt a-steach na ceumannan a leanas:

1. 1. Ag ullachadh srathan deuchainn: Bithear a’ cleachdadh gathan Salmonella typhimurium le mùthaidhean a tha ann mu thràth ann an ginean synthesis histidine. Chan urrainn dha na gathan sin fàs às aonais stòr histidine bhon taobh a-muigh mura h-eil mùthadh cùil ag ath-nuadhachadh gnìomh.
2. 2. A’ nochdadh do N - Nitrosamines: Tha an cultar bacterial air a mheasgachadh leis an todhar deuchainn (N - Nitrosamine) air truinnsear agar as ìsle anns a bheil beagan histidine.
3. 3. Gnìomhachadh Metabolic (S9 Mix Addition): Gus cunntas a thoirt air tionndadh metabollach ann am bodhaig an duine, tha cuid de shamhlaichean deuchainn a’ toirt a-steach bloigh S9, earrann enzymatic bho mhicrosomes grùthan radain.
4. 4. Goir agus Fàs: Tha na truinnsearan air an goir aig 37 ° C airson 48 uairean, a’ leigeil le coloinidhean bacteriach fàs ma thachras mùthaidhean a bheir air ais synthesis histidine.
5. 5. Cunntas agus Mion-sgrùdadh Coloinidh: Tha an àireamh de choloinidhean tilleadh (bacteria a fhuair air ais an comas histidine a dhèanamh) air a chunntadh agus air a choimeas ri lannan smachd.
6. Mìneachadh nan Toraidhean

• Deuchainn Ames Deimhinneach: Tha àrdachadh mòr ann an coloinidhean tilleadh an coimeas ris an smachd a’ nochdadh gu bheil an todhar ag adhbhrachadh mùthaidhean, a’ ciallachadh togalaichean mutagenic agus a dh’ fhaodadh a bhith carcinogenic.
• Deuchainn Ames Negative: Mura h-eil àrdachadh mòr air fhaicinn, tha coltas ann gu bheil an todhar neo - mutagenic fo chumhachan deuchainn.
• Dose - Dàimh Freagairt: Bidh dòsan nas àirde a’ leantainn gu ìrean mùthaidh nas àirde a’ neartachadh fianais mutagenity.

Co-dhùnadh

Tha an deuchainn Ames na dhòigh luath agus cosg-èifeachdach airson measadh a dhèanamh air mutagenity N - Nitrosamines. Leis gu bheil iad ceangailte ri aillse, tha e deatamach gun tèid na feartan mutagenic aca a chomharrachadh tron ​​​​mheasadh seo airson smachd riaghlaidh agus measadh cunnairt. Tha an deuchainn seo fhathast na chlach-oisinn ann an sgrìonadh puinnseanta agus measadh sàbhailteachd ceimigeach.

Faclan-luirg: N - Nitrosamines, NDSRIs, OECD 471, deuchainn Ames Meudaichte, grùthan Hamster S9, enzymes Cytochrome P450, Deuchainn Mutation