N-Nitrosamines க்கான Ames சோதனை: பிறழ்வுத்தன்மையை மதிப்பிடுதல்

எய்ம்ஸ் தேர்வு அறிமுகம்

பாக்டீரியல் தலைகீழ் பிறழ்வு சோதனை என்றும் அழைக்கப்படும் அமெஸ் சோதனையானது உயிரியல் மதிப்பீட்டிற்காக பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, இது N-Nitrosamines உட்பட இரசாயன சேர்மங்களின் பிறழ்வு திறனை மதிப்பிடுகிறது. 1970 களில் டாக்டர் புரூஸ் அமேஸால் உருவாக்கப்பட்டது, இந்த சோதனையானது ஹிஸ்டைடின் தொகுப்பில் ஈடுபட்டுள்ள மரபணுக்களில் பிறழ்வுகளைக் கொண்டு செல்லும் பாக்டீரியமான சால்மோனெல்லா டைபிமுரியத்தின் குறிப்பிட்ட விகாரங்களைப் பயன்படுத்துகிறது. ஒரு பொருள் பாக்டீரியா டிஎன்ஏவில் பிறழ்வுகளை ஏற்படுத்துமா என்பதை சோதனை தீர்மானிக்கிறது, இது மனிதர்களுக்கு சாத்தியமான புற்றுநோய்க்கான அறிகுறியை வழங்குகிறது.

N-Nitrosamines க்கான எய்ம்ஸ் சோதனையின் பொருத்தம்

N-நைட்ரோசமைன்கள் அவற்றின் ஜெனோடாக்ஸிக் மற்றும் கார்சினோஜெனிக் பண்புகளுக்காக அறியப்படுகின்றன, ஏனெனில் அவை அல்கைலேஷன் மற்றும் ஆக்ஸிஜனேற்ற அழுத்தத்தின் மூலம் டிஎன்ஏ சேதத்தைத் தூண்டும். அமெஸ் சோதனையானது அவற்றின் பிறழ்வு விளைவுகளைக் கண்டறிவதில் மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கிறது, ஏனெனில் பல N-Nitrosamines டிஎன்ஏ உடன் தொடர்பு கொள்ளும் திறன் கொண்ட உயர் வினைத்திறன் எலக்ட்ரோஃபிலிக் இடைநிலைகளை உருவாக்க நொதி மாற்றத்தின் மூலம் வளர்சிதை மாற்றத்தை செயல்படுத்த வேண்டும். சைட்டோக்ரோம் பி450 என்சைம்கள் மூலம் இந்தச் செயல்படுத்தல் பொதுவாக கல்லீரலில் நிகழ்கிறது. இந்த வளர்சிதை மாற்றத்தை விட்ரோவில் நகலெடுக்க, இந்த சோதனையானது S9 கலவையைப் பயன்படுத்தி வளர்சிதை மாற்றச் செயலாக்கத்துடன் மற்றும் இல்லாமல் நடத்தப்படுகிறது, இது கொறித்துண்ணிகளில் இருந்து பெறப்பட்ட கல்லீரல் நொதி தயாரிப்பு ஆகும், இது பாலூட்டிகளின் வளர்சிதை மாற்றத்தைப் பிரதிபலிக்கிறது மற்றும் பிறழ்வு செயல்பாட்டைக் கண்டறிவதை மேம்படுத்துகிறது.

எய்ம்ஸ் தேர்வின் முறை

எய்ம்ஸ் தேர்வின் நிலையான செயல்முறை பின்வரும் படிகளை உள்ளடக்கியது:

1. 1. சோதனை விகாரங்கள் தயாரித்தல்: ஹிஸ்டைடின் தொகுப்பு மரபணுக்களில் ஏற்கனவே இருக்கும் பிறழ்வுகளுடன் கூடிய சால்மோனெல்லா டைபிமுரியம் விகாரங்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. தலைகீழ் பிறழ்வு செயல்பாட்டை மீட்டெடுக்காத வரை இந்த விகாரங்கள் வெளிப்புற ஹிஸ்டைடின் மூலமின்றி வளர முடியாது.
2. 2. N-Nitrosamines வெளிப்பாடு: பாக்டீரியா கலாச்சாரம் குறைந்த அளவு ஹிஸ்டைடின் கொண்ட குறைந்தபட்ச அகர் தட்டில் சோதனை கலவையுடன் (N-Nitrosamine) கலக்கப்படுகிறது.
3. 3. மெட்டபாலிக் ஆக்டிவேஷன் (S9 கலவை சேர்த்தல்): மனித உடலில் வளர்சிதை மாற்றத்தை கணக்கிட, சில சோதனை மாதிரிகளில் S9 பின்னம் அடங்கும், இது எலி கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களில் இருந்து ஒரு நொதி சாறு.
4. 4. அடைகாத்தல் மற்றும் வளர்ச்சி: தகடுகள் 37°C வெப்பநிலையில் 48 மணிநேரங்களுக்கு அடைகாக்கப்படுகின்றன, இது ஹிஸ்டைடின் தொகுப்பை மீட்டெடுக்கும் பிறழ்வுகள் ஏற்பட்டால் பாக்டீரியா காலனிகள் வளர அனுமதிக்கிறது.
5. 5. காலனி எண்ணிக்கை மற்றும் பகுப்பாய்வு: ரிவர்ட்டன்ட் காலனிகளின் எண்ணிக்கை (ஹிஸ்டைடின் உற்பத்தி செய்யும் திறனை மீண்டும் பெற்ற பாக்டீரியா) கணக்கிடப்பட்டு கட்டுப்பாட்டு தட்டுகளுடன் ஒப்பிடப்படுகிறது.
6. முடிவுகளின் விளக்கம்

• பாசிடிவ் அமெஸ் சோதனை: கட்டுப்பாட்டுடன் ஒப்பிடும்போது, ​​மீளமைக்கும் காலனிகளில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு, கலவை பிறழ்வுகளைத் தூண்டுகிறது, இது பிறழ்வு மற்றும் புற்றுநோயைத் தூண்டக்கூடிய பண்புகளைக் குறிக்கிறது.
• எதிர்மறை அமெஸ் சோதனை: குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு காணப்படவில்லை எனில், சோதனை நிலைமைகளின் கீழ் கலவையானது மாற்றமில்லாததாக இருக்கலாம்.
• டோஸ்-பதிலளிப்பு உறவு: அதிக அளவு பிறழ்வு விகிதங்களுக்கு வழிவகுக்கும், பிறழ்வுக்கான ஆதாரத்தை வலுப்படுத்துகிறது.

முடிவுரை

எய்ம்ஸ் சோதனையானது N-Nitrosamines இன் பிறழ்வுத்தன்மையை மதிப்பிடுவதற்கான விரைவான மற்றும் செலவு-பயனுள்ள முறையாகும். புற்றுநோயுடனான அவர்களின் தொடர்பைக் கருத்தில் கொண்டு, இந்த மதிப்பீட்டின் மூலம் அவற்றின் பிறழ்வு பண்புகளை அடையாளம் காண்பது ஒழுங்குமுறை கட்டுப்பாடு மற்றும் இடர் மதிப்பீட்டிற்கு முக்கியமானது. இந்த சோதனை நச்சுயியல் திரையிடல் மற்றும் இரசாயன பாதுகாப்பு மதிப்பீட்டில் ஒரு மூலக்கல்லாக உள்ளது.

முக்கிய வார்த்தைகள்: N-Nitrosamines, NDSRIs, OECD 471, மேம்படுத்தப்பட்ட அமேஸ் சோதனை, வெள்ளெலி கல்லீரல் S9, சைட்டோக்ரோம் P450 என்சைம்கள், பிறழ்வு சோதனை