N-Nitrosamines માટે એમ્સ ટેસ્ટ: મ્યુટેજેનિસિટીનું મૂલ્યાંકન

એમ્સ ટેસ્ટનો પરિચય

એમ્સ ટેસ્ટ, જેને બેક્ટેરિયલ રિવર્સ મ્યુટેશન ટેસ્ટ તરીકે પણ ઓળખવામાં આવે છે તે જૈવિક પરીક્ષા માટે વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે જે N-Nitrosamines સહિત રાસાયણિક સંયોજનોની મ્યુટેજેનિક સંભવિતતાનું મૂલ્યાંકન કરે છે. 1970 ના દાયકામાં ડૉ. બ્રુસ એમ્સ દ્વારા વિકસાવવામાં આવેલ, આ પરીક્ષણ બેક્ટેરિયમ સૅલ્મોનેલા ટાઇફિમ્યુરિયમના ચોક્કસ તાણનો ઉપયોગ કરે છે જે હિસ્ટીડિન સંશ્લેષણમાં સામેલ જનીનોમાં પરિવર્તન કરે છે. પરીક્ષણ નક્કી કરે છે કે શું પદાર્થ બેક્ટેરિયલ ડીએનએમાં પરિવર્તન લાવી શકે છે, જે મનુષ્યમાં સંભવિત કાર્સિનોજેનિસિટીનો સંકેત આપે છે.

N-Nitrosamines માટે એમ્સ ટેસ્ટની સુસંગતતા

N-નાઈટ્રોસામાઈન્સ તેમના જીનોટોક્સિક અને કાર્સિનોજેનિક ગુણધર્મો માટે જાણીતા છે, કારણ કે તેઓ અલ્કિલેશન અને ઓક્સિડેટીવ તણાવ દ્વારા ડીએનએને નુકસાન પહોંચાડી શકે છે. એમ્સ ટેસ્ટ ખાસ કરીને તેમની મ્યુટાજેનિક અસરોને શોધવામાં ઉપયોગી છે, કારણ કે ઘણા N-Nitrosamines ને એન્ઝાઈમેટિક રૂપાંતરણ દ્વારા મેટાબોલિક સક્રિયકરણની જરૂર પડે છે જેથી DNA સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરવામાં સક્ષમ અત્યંત પ્રતિક્રિયાશીલ ઇલેક્ટ્રોફિલિક મધ્યવર્તી બને. આ સક્રિયકરણ સામાન્ય રીતે સાયટોક્રોમ P450 ઉત્સેચકો દ્વારા યકૃતમાં થાય છે. વિટ્રોમાં આ મેટાબોલિક રૂપાંતરણની નકલ કરવા માટે, પરીક્ષણ ઘણીવાર મેટાબોલિક સક્રિયકરણ સાથે અને વગર S9 મિશ્રણનો ઉપયોગ કરીને હાથ ધરવામાં આવે છે, જે ઉંદરોમાંથી મેળવેલી યકૃત એન્ઝાઇમ તૈયારી છે, જે સસ્તન પ્રાણીઓના ચયાપચયની નકલ કરે છે અને મ્યુટેજેનિક પ્રવૃત્તિની શોધને વધારે છે.

એમ્સ ટેસ્ટની પદ્ધતિ

એમ્સ ટેસ્ટની માનક પ્રક્રિયામાં નીચેના પગલાં શામેલ છે:

1. 1. ટેસ્ટ સ્ટ્રેઇન્સની તૈયારી: હિસ્ટીડિન સંશ્લેષણ જનીનોમાં પહેલાથી અસ્તિત્વમાં રહેલા પરિવર્તનો સાથે સાલ્મોનેલા ટાઇફીમ્યુરિયમ સ્ટ્રેન્સનો ઉપયોગ થાય છે. આ જાતો બાહ્ય હિસ્ટીડિન સ્ત્રોત વિના વિકાસ કરી શકતી નથી સિવાય કે વિપરીત પરિવર્તન કાર્ય પુનઃસ્થાપિત કરે.
2. એન
3. 3. મેટાબોલિક એક્ટિવેશન (S9 મિક્સ એડિશન): માનવ શરીરમાં મેટાબોલિક રૂપાંતરણ માટે, કેટલાક પરીક્ષણ નમૂનાઓમાં S9 અપૂર્ણાંકનો સમાવેશ થાય છે, જે ઉંદરના યકૃતના માઇક્રોસોમમાંથી એન્ઝાઇમેટિક અર્ક છે.
4. 4. ઇન્ક્યુબેશન અને વૃદ્ધિ: પ્લેટોને 48 કલાક માટે 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ તાપમાને ઉકાળવામાં આવે છે, જો હિસ્ટીડિન સંશ્લેષણને પુનઃસ્થાપિત કરતા પરિવર્તનો થાય તો બેક્ટેરિયલ કોલોનીઓ વધવા દે છે.
5. 5. કોલોની ગણતરી અને વિશ્લેષણ: રિવર્ટન્ટ વસાહતોની સંખ્યા (બેક્ટેરિયા કે જેણે હિસ્ટીડિન ઉત્પન્ન કરવાની ક્ષમતા પુનઃપ્રાપ્ત કરી છે)ની ગણતરી કરવામાં આવે છે અને નિયંત્રણ પ્લેટો સાથે સરખામણી કરવામાં આવે છે.
6. પરિણામોનું અર્થઘટન

• પોઝિટિવ એમ્સ ટેસ્ટ: નિયંત્રણની સરખામણીમાં રિવર્ટન્ટ વસાહતોમાં નોંધપાત્ર વધારો સૂચવે છે કે સંયોજન પરિવર્તનને પ્રેરિત કરે છે, જે મ્યુટેજેનિક અને સંભવિત કાર્સિનોજેનિક ગુણધર્મો સૂચવે છે.
• નેગેટિવ એમ્સ ટેસ્ટ: જો કોઈ નોંધપાત્ર વધારો જોવામાં ન આવે, તો પરીક્ષણની સ્થિતિમાં સંયોજન બિન-મ્યુટેજેનિક હોવાની શક્યતા છે.
• ડોઝ

નિષ્કર્ષ

N-Nitrosamines ની મ્યુટેજેનિસિટીનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે એમ્સ ટેસ્ટ એ ઝડપી અને સસ્તી-અસરકારક પદ્ધતિ છે. કેન્સર સાથેના તેમના જોડાણને જોતાં, આ પરીક્ષા દ્વારા તેમના મ્યુટેજેનિક ગુણધર્મોને ઓળખવા એ નિયમનકારી નિયંત્રણ અને જોખમ મૂલ્યાંકન માટે નિર્ણાયક છે. આ પરીક્ષણ ટોક્સિકોલોજિકલ સ્ક્રિનિંગ અને રાસાયણિક સલામતી મૂલ્યાંકનમાં પાયાનો પથ્થર છે.

કીવર્ડ્સ: N-Nitrosamines, NDSRIs, OECD 471, ઉન્નત એમ્સ ટેસ્ટ, હેમ્સ્ટર લિવર S9, સાયટોક્રોમ P450 એન્ઝાઇમ્સ, મ્યુટેશન ટેસ્ટ