Fampidirana ny Ames Test
Ny fitsapana Ames, fantatra ihany koa amin'ny hoe Bacterial Reverse Mutation Test dia ampiasaina betsaka amin'ny assay biolojika izay manombatombana ny mety ho mutagenic ny zavatra simika, anisan'izany ny N-Nitrosamines. Novolavolain'ny Dr. Bruce Ames tamin'ny taona 1970, ity fitsapana ity dia mampiasa karazana bakteria Salmonella typhimurium izay mitondra fiovana ao amin'ny fototarazo tafiditra amin'ny synthesis histidine. Ny fitsapana dia mamaritra raha mety hiteraka fiovana ao amin'ny ADN bakteria ny akora iray, izay manondro ny mety ho carcinogenicity amin'ny olombelona.
Ny fifandraisan'ny fitsapana Ames ho an'ny N-Nitrosamines
Ny N-Nitrosamines dia fantatra amin'ny toetrany genotoxic sy carcinogenic, satria mety hiteraka fahasimbana ADN amin'ny alàlan'ny alkylation sy ny adin-tsaina oksidia. Ny fitsapana Ames dia tena ilaina amin'ny fijerena ny fiantraikan'izy ireo amin'ny mutagène, satria maro ny N-Nitrosamines dia mitaky fampahavitrihana metabolika amin'ny alàlan'ny fiovam-po amin'ny enzymatic mba hamoronana intermediate electrophilic mahery vaika afaka mifandray amin'ny ADN. Ity fampahavitrihana ity dia mitranga matetika ao amin'ny atiny amin'ny alàlan'ny enzymes cytochrome P450. Mba hamerenana an'io fiovam-po metabolika in vitro io, ny fitsapana dia matetika atao miaraka amin'ny fampahavitrihana metabolika sy tsy misy fampiasana S9 mix, fiomanana anzima amin'ny atiny avy amin'ny biby mpikiky, izay maka tahaka ny metabolisman'ny biby mampinono ary manatsara ny fahitana ny hetsika mutagenic.
Metodôlôjian'ny fitsapana Ames
Ny fomba fanao mahazatra amin'ny fitsapana Ames dia ahitana ireto dingana manaraka ireto:
- 1. Fiomanana amin'ny fitsapam-pahaizana: Salmonella typhimurium strains miaraka amin'ny fiovana efa misy amin'ny fototarazo synthesis histidine dia ampiasaina. Tsy afaka mitombo ireo tebiteby ireo raha tsy misy loharano histidine ivelany raha tsy mamerina ny asany ny mutation mivadika.
- 2. Fipoahana amin'ny N-Nitrosamine: Ny kolontsaina bakteria dia mifangaro amin'ny fitambarana fitsapana (N-Nitrosamine) eo amin'ny takelaka agar kely misy histidine kely.
- 3. Fampahavitrihana Metabolika (S9 Mix Fanampiny): Mba hahitana ny fiovam-pon'ny metabolika ao amin'ny vatan'olombelona, ny santionany amin'ny fitsapana sasany dia ahitana ampahany S9, nalaina enzymatic avy amin'ny microsomes atiny voalavo.
- 4. Incubation sy fitomboana: Ny takelaka dia incubated amin'ny 37 ° C mandritra ny 48 ora, mamela ny bakteria zanatany hitombo raha misy fiovana izay mamerina ny histidine synthesis.
- 5. Fanisana sy famakafakana zanatany: Isaina sy ampitahaina amin'ny takelaka fanaraha-maso ny isan'ny zanatany miverin-dàlana (bakteria nahazo ny fahafaha-mamokatra histidine indray).
- Fandikana ny vokatra
- Fitsapana Ames Positive: Ny fitomboana lehibe amin'ny zanatany miverina raha oharina amin'ny fanaraha-maso dia manondro fa ny fitambarana dia miteraka fiovan'ny toetr'andro, izay midika hoe mutagenic sy mety ho carcinogenic.
- Fitsapana Ames ratsy: Raha tsy misy fitomboana lehibe hita, dia azo inoana fa tsy mutagenic ny fitambarana ao anatin'ny fepetra fitsapana.
- Dose-Fifandraisana amin'ny valinteny: Ny fatra avo kokoa mitarika ny tahan'ny fiovan'ny toetr'andro dia manamafy ny porofon'ny mutagenicity.
Fehiny
Ny fitsapana Ames dia fomba haingana sy mahomby amin'ny fanombanana ny fahasamihafan'ny N-Nitrosamines. Noho ny fifandraisan'izy ireo amin'ny homamiadana, ny famantarana ny toetrany mutagenic amin'ny alàlan'ity fitsapana ity dia tena ilaina amin'ny fanaraha-maso ny fanaraha-maso sy ny fanombanana ny risika. Ity fitsapana ity dia mijanona ho vato fehizoro amin'ny fitiliana misy poizina sy fanombanana fiarovana amin'ny simika.
Keywords: N-Nitrosamines, NDSRIs, OECD 471, Enhanced Ames test, Hamster liver S9, Cytochrome P450 enzymes, Mutation Test
Fotoana navoaka: 2025-03-11 09:16:10