N - nitrosamines үшін AMES тестілеу: мутагеникті бағалау

AMES тестіне кіріспе

Бактериалды кері мутация тестісі деп те аталатын AMES тестісі биологиялық талдау үшін кеңінен қолданылады, ол химиялық қосылыстардың мутагендік әлеуетін, оның ішінде NTrosamines-тің мутагендік әлеуетін бағалайды. Доктор Брюс Амеспен дамыған, 1970 жылдары, бұл тест гистидин синтезіне қатысты гендердегі мутацияларды алып жүретін Salmonella Dichonesella Sicthimurium бактерияларының арнайы штамдарын қолданады. Сынақ заттың бактериалды ДНҚ-да мутациялар тудыруы мүмкін, жоқ-туындыларды анықтайды, бұл адамдардағы ықтимал канцерогенділіктің көрсетілуін қамтамасыз ететін бактериялық ДНҚ-да туындауы мүмкін.

N - Nitrosamines AMES тестінің өзектілігі

N - Nitrosamines олардың генотоксикалық және канцерогендік қасиеттерімен танымал, өйткені олар ДНҚ-ны алкилденция және тотығу стресс арқылы ДНҚ-ны бұзуы мүмкін. AMES тесті әсіресе олардың мутагендік әсерлерін анықтауда пайдалы, өйткені n - nitrosamines ДНҚ-мен өзара әрекеттесуге қабілетті жоғары реактивті электрофильді аралық делдалдар жасау үшін метаболикалық активацияны қажет етеді. Бұл активация әдетте бауырда Цитохром P450 ферменттері арқылы кездеседі. Витродағы метаболикалық конверсияны көбейту үшін, сынақтар көбінесе метаболикалық активтендіру, S9 қоспасы арқылы метаболикалық активтендіру, сүтқоректілерден алынған бауыр ферментіне дайындалады, олар сүтқоректілердің метаболизмін елемейді және мутагендік қызметті анықтайды.

AMES тестінің әдістемесі

AMES тестінің стандартты тәртібі келесі кезеңдерді қамтиды:

1. 1 Егер кері мутация қалпына келтірілмесе, бұл штамдар сыртқы гистидин көзінсіз өсе алмайды.
2. 2
3. 3
4. 4
5. 5
6. Нәтижелерді түсіндіру

• Оң AMES-тің оң сынағы: Бақылаумен салыстырғанда заттаңдағы колонияның едәуір өсуі мутагендік және ықтимал канцерогендік қасиеттерін білдіретін қосылыс индукторлық мутацияны ұсынады.
• Теріс аморлар сынағы: егер айтарлықтай өсу байқалмаса, қосылыс, мүмкін емес, тестілеу шарттары бойынша mutagenic.
• Дауза - Жауап беру қарым-қатынасы: Мутациялардың жоғарылауына әкелетін жоғары дозалар мутагенділіктің дәлелігін күшейтеді.

Қорытынды

AMES Test - бұл тез және құны - Nitrosamines-дің мутациясын бағалаудың тиімді әдісі. Оларды қатерлі ісікпен байланыстырған олардың қатерлі ісігімен байланысты, олар осы талдау арқылы олардың мутагендік қасиеттерін анықтау нормативтік бақылау және тәуекелдерді бағалау үшін өте маңызды. Бұл тест токсикологиялық скринингте және химиялық қауіпсіздікті бағалауда қалпақ болып қала береді.

Түйін сөздер: N - Nitrosamines, NDSRIS, OECD 471, жақсартылған AMES Test, Hamster Liver S9, Cytochrome P450 ферменттері, мутация сынағы