Test Ames għal N - Nitrosamines: Valutazzjoni tal-Mutaġeniċità

Introduzzjoni għat-Test Ames

It-test AMES, magħruf ukoll bħala test ta 'mutazzjoni b'lura ta' batterja huwa użat ħafna għal test bijoloġiku li jevalwa l-potenzjal mutaġeniku ta 'komposti kimiċi, inklużi n - nitrosamini. Żviluppat minn Dr Bruce Ames fis-snin sebgħin, dan it-test juża razez speċifiċi tal-batterju Salmonella Typhimurium li jġorru mutazzjonijiet fil-ġeni involuti fis-sinteżi tal-istidina. It-test jiddetermina jekk sustanza tistax tikkawża mutazzjonijiet fid-DNA batteriku, li tipprovdi indikazzjoni ta 'karċinoġeniċità potenzjali fil-bnedmin.

Rilevanza tat-test Ames għal n - nitrosamines

N - Nitrosamines huma magħrufa għall-proprjetajiet ġenotossiċi u karċinoġeniċi tagħhom, peress li jistgħu jikkawżaw ħsara fid-DNA permezz ta 'alkilazzjoni u stress ossidattiv. It-test AMES huwa partikolarment utli biex jinstab l-effetti mutaġeniċi tagħhom, peress li ħafna nitrosaminji n - jeħtieġu attivazzjoni metabolika permezz ta 'konverżjoni enżimatika biex jiffurmaw intermedji elettrofiliċi reattivi ħafna li kapaċi jinteraġixxu mad-DNA. Din l-attivazzjoni tipikament isseħħ fil-fwied permezz ta 'enzimi taċ-ċitokromu P450. Biex tirreplika din il-konverżjoni metabolika in vitro, it-test spiss jitwettaq bi u mingħajr attivazzjoni metabolika bl-użu ta 'S9 Mix, preparazzjoni ta' enzimi tal-fwied derivata mill-annimali gerriema, li timita l-metaboliżmu mammiferu u ttejjeb l-iskoperta ta 'attività mutaġenika.

Metodoloġija tat-test Ames

Il-proċedura standard tat-test AMES tinvolvi l-passi li ġejjin:

1. 1. Preparazzjoni ta 'razez tat-test: Salmonella typhimurium razez bi mutazzjonijiet pre - eżistenti fil-ġeni ta' sinteżi ta 'l-istidina huma użati. Dawn ir-razez ma jistgħux jikbru mingħajr sors ta 'istidina esterna sakemm mutazzjoni b'lura terġa' tiffunzjona.
2. 2. Esponiment għal N - Nitrosamines: Il-kultura tal-batterja hija mħallta mal-kompost tat-test (n - nitrosamina) fuq pjanċa minima ta 'agar li fiha ammont żgħir ta' istidina.
3. 3
4. 4
5. 5. L-għadd u l-analiżi tal-kolonji: In-numru ta 'kolonji revertant (batterji li reġgħu kisbu l-abbiltà li jipproduċu istidina) huwa magħdud u mqabbel ma' pjanċi ta 'kontroll.
6. Interpretazzjoni tar-riżultati

• Test ta 'Ames pożittiv: Żieda sinifikanti fil-kolonji ta' revertant meta mqabbla mal-kontroll tissuġġerixxi li l-kompost jinduċi mutazzjonijiet, li jimplika proprjetajiet mutaġeniċi u potenzjalment karċinoġeniċi.
• Test ta 'Ames negattiv: Jekk ma tiġi osservata l-ebda żieda sinifikanti, il-kompost x'aktarx mhux - mutaġeniku taħt il-kundizzjonijiet tat-test.
• Doża - Relazzjoni ta 'Rispons: Dożi ogħla li jwasslu għal żieda fir-rati ta' mutazzjoni jsaħħu l-evidenza ta 'mutaġeniċità.

Konklużjoni

It-test AMES huwa metodu mgħaġġel u spiża - effettiv għall-valutazzjoni tal-mutaġeniċità ta 'n - nitrosamines. Minħabba l-assoċjazzjoni tagħhom mal-kanċer, l-identifikazzjoni tal-proprjetajiet mutaġeniċi tagħhom permezz ta 'dan l-assaġġ hija kruċjali għall-kontroll regolatorju u l-valutazzjoni tar-riskju. Dan it-test jibqa 'pedament fl-iskrining tossikoloġiku u fl-evalwazzjoni tas-sigurtà kimika.

Keywords: N - Nitrosamines, NDSRIS, OECD 471, Test AMES imsaħħaħ, Hamster Fwied S9, Enżimi Cytochrome P450, Test tal-Mutazzjoni