N - நைட்ரோசமைன்கள்: பிறழ்வை மதிப்பிடுதல்

AMES சோதனைக்கு அறிமுகம்

AMES சோதனை, பாக்டீரியா தலைகீழ் பிறழ்வு சோதனை என்றும் அழைக்கப்படுகிறது, இது உயிரியல் மதிப்பீட்டிற்கு பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, இது n - நைட்ரோசமைன்கள் உள்ளிட்ட வேதியியல் சேர்மங்களின் பிறழ்வு திறனை மதிப்பிடுகிறது. 1970 களில் டாக்டர் புரூஸ் அமெஸால் உருவாக்கப்பட்டது, இந்த சோதனை ஹிஸ்டைடின் தொகுப்பில் ஈடுபட்டுள்ள மரபணுக்களில் பிறழ்வுகளைக் கொண்டிருக்கும் சால்மோனெல்லா டைபிமுரியத்தின் பாக்டீரியத்தின் குறிப்பிட்ட விகாரங்களைப் பயன்படுத்துகிறது. ஒரு பொருள் பாக்டீரியா டி.என்.ஏவில் பிறழ்வுகளை ஏற்படுத்துமா என்பதை சோதனை தீர்மானிக்கிறது, இது மனிதர்களில் சாத்தியமான புற்றுநோயைக் குறிக்கிறது.

N - நைட்ரோசமைன்களுக்கான AMES சோதனையின் பொருத்தம்

N - நைட்ரோசமைன்கள் அவற்றின் மரபணு மற்றும் புற்றுநோய்க்கான பண்புகளுக்கு அறியப்படுகின்றன, ஏனெனில் அவை அல்கைலேஷன் மற்றும் ஆக்ஸிஜனேற்ற அழுத்தத்தின் மூலம் டி.என்.ஏ சேதத்தைத் தூண்டும். AMES சோதனை அவற்றின் பிறழ்வு விளைவுகளைக் கண்டறிய மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கும், ஏனெனில் பல N - நைட்ரோசமைன்களுக்கு நொதி மாற்றத்தின் மூலம் வளர்சிதை மாற்ற செயல்படுத்தல் தேவைப்படுகிறது, இது டி.என்.ஏ உடன் தொடர்பு கொள்ளும் திறன் கொண்ட அதிக எதிர்வினை எலக்ட்ரோஃபிலிக் இடைநிலைகளை உருவாக்குகிறது. இந்த செயல்படுத்தல் பொதுவாக சைட்டோக்ரோம் பி 450 என்சைம்கள் மூலம் கல்லீரலில் நிகழ்கிறது. இந்த வளர்சிதை மாற்ற மாற்றத்தை விட்ரோவில் நகலெடுக்க, சோதனை பெரும்பாலும் S9 கலவையைப் பயன்படுத்தி வளர்சிதை மாற்ற செயல்பாட்டுடன் மற்றும் இல்லாமல் நடத்தப்படுகிறது, இது கொறித்துண்ணிகளிலிருந்து பெறப்பட்ட கல்லீரல் நொதி தயாரிப்பாகும், இது பாலூட்டிகளின் வளர்சிதை மாற்றத்தை பிரதிபலிக்கிறது மற்றும் பிறழ்வு செயல்பாட்டைக் கண்டறிவதை மேம்படுத்துகிறது.

AMES சோதனையின் முறை

AMES சோதனையின் நிலையான செயல்முறை பின்வரும் படிகளை உள்ளடக்கியது:

1. 1. சோதனை விகாரங்களைத் தயாரித்தல்: ஹிஸ்டைடின் தொகுப்பு மரபணுக்களில் முன் - ஏற்கனவே உள்ள பிறழ்வுகளுடன் சால்மோனெல்லா டைபிமுரியம் விகாரங்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. தலைகீழ் பிறழ்வு செயல்பாட்டை மீட்டெடுக்காவிட்டால் வெளிப்புற ஹிஸ்டைடின் மூலமின்றி இந்த விகாரங்கள் வளர முடியாது.
2. 2. n - நைட்ரோசமைன்களுக்கு வெளிப்பாடு: பாக்டீரியா கலாச்சாரம் ஒரு சிறிய அளவு ஹிஸ்டைடின் கொண்ட குறைந்தபட்ச அகர் தட்டில் சோதனை கலவையுடன் (n - நைட்ரோசமைன்) கலக்கப்படுகிறது.
3. 3. வளர்சிதை மாற்ற செயல்படுத்தல் (எஸ் 9 கலவை கூட்டல்): மனித உடலில் வளர்சிதை மாற்ற மாற்றத்தைக் கணக்கிட, சில சோதனை மாதிரிகளில் எஸ் 9 பின்னம், எலி கல்லீரல் மைக்ரோசோம்களிலிருந்து ஒரு நொதி சாறு ஆகியவை அடங்கும்.
4. 4. அடைகாக்குதல் மற்றும் வளர்ச்சி: தட்டுகள் 37 ° C வெப்பநிலையில் 48 மணி நேரம் அடைகாத்தன, ஹிஸ்டைடின் தொகுப்பை மீட்டெடுக்கும் பிறழ்வுகள் ஏற்பட்டால் பாக்டீரியா காலனிகள் வளர அனுமதிக்கிறது.
5. 5. காலனி எண்ணுதல் மற்றும் பகுப்பாய்வு: மாற்றியமைத்தல் காலனிகளின் எண்ணிக்கை (ஹிஸ்டைடினை உற்பத்தி செய்யும் திறனை மீட்டெடுக்கும் பாக்டீரியாக்கள்) கணக்கிடப்பட்டு கட்டுப்பாட்டு தகடுகளுடன் ஒப்பிடப்படுகின்றன.
6. முடிவுகளின் விளக்கம்

• நேர்மறை AMES சோதனை: கட்டுப்பாட்டுடன் ஒப்பிடும்போது மாற்றியமைக்கப்பட்ட காலனிகளில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு கலவை பிறழ்வுகளைத் தூண்டுகிறது, இது பிறழ்வு மற்றும் புற்றுநோய்க்கான பண்புகளைக் குறிக்கிறது.
• எதிர்மறை AMES சோதனை: குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்பு எதுவும் காணப்படாவிட்டால், சோதனை நிலைமைகளின் கீழ் கலவை - பிறழ்வு அல்ல.
• டோஸ் - மறுமொழி உறவு: அதிகரித்த பிறழ்வு விகிதங்களுக்கு வழிவகுக்கும் அதிக அளவு பிறழ்வின் ஆதாரங்களை வலுப்படுத்துகிறது.

முடிவு

AMES சோதனை என்பது ஒரு விரைவான மற்றும் செலவு - N - நைட்ரோசமைன்களின் பிறழ்வை மதிப்பிடுவதற்கான பயனுள்ள முறையாகும். புற்றுநோயுடனான அவர்களின் தொடர்பைக் கருத்தில் கொண்டு, இந்த மதிப்பீட்டின் மூலம் அவற்றின் பிறழ்வு பண்புகளை அடையாளம் காண்பது ஒழுங்குமுறை கட்டுப்பாடு மற்றும் இடர் மதிப்பீட்டிற்கு முக்கியமானது. இந்த சோதனை நச்சுயியல் திரையிடல் மற்றும் வேதியியல் பாதுகாப்பு மதிப்பீட்டில் ஒரு மூலக்கல்லாக உள்ளது.

முக்கிய வார்த்தைகள்: N - நைட்ரோசமைன்கள், என்.டி.எஸ்.ஆர்.ஐ.எஸ், ஓ.இ.சி.டி 471, மேம்படுத்தப்பட்ட அமெஸ் சோதனை, வெள்ளெலி கல்லீரல் எஸ் 9, சைட்டோக்ரோம் பி 450 என்சைம்கள், பிறழ்வு சோதனை