Yntroduksje ta de ames test
De Ames-test, ek wol baktearjedstnus neamd is in breed brûkt foar biologysk assay dy't it mutagenyske potensjeel evalueart, ynklusyf N-oanfragen. Untwikkele troch Dr. Bruce Ames yn 'e 1970 -er jierren, dizze test brûkt spesifike straffen fan' e baktearje Salmimella Typhimurium dat mutaasjes drage yn genen belutsen by histidine synthesis. De test bepaalt oft in substânsje dy't mutaasjes kin feroarsaakje yn baktearjele DNA, en in oantsjutting jaan fan potensjele karzinogenisiteit yn minsken.
Belang fan 'e Ames-test foar N - Nitrosamines
N - Nitroskines binne bekend om har genotoxyske en karzinogene eigenskippen, om't se DNA-skea kinne oanjaan fia alkylation en oksidative stress. De Ames-test is foaral nuttich by it detektearjen fan har mutsenyske effekten, safolle n - Nitraamisyske aktivaasje fereaskje fia enzymatyske konverzje om heul reaktive elektrofilyske ynterminderen yn steat om te meitsjen mei DNA. Dizze aktivaasje komt typysk foar yn 'e lever troch Cytochrome P450-enzymen. Om dizze metabolyske konverzje yn vitro te replikearjen, wurdt de test faaks útfierd mei en sûnder mingd-tarieding fan S9-miks ôflaat fan 'e leveransiering fan knaagd, wêrtroch Sûchdieren fan' e detanisme fan millyk hawwe en de detection fan mûtsing fan mûtsing fan mûtsen fan mûtsjen fan millykjen.
Metodyk fan 'e Ames Test
De standertproseduere fan 'e Ames-test giet oer de folgjende stappen:
- 1. Tarieding fan teststoelen: salmonella typhimurium straffen mei pre - besteande mutaasjes yn histidine synthesis genen wurde brûkt. Dizze straffen kinne net groeie sûnder in eksterne histidine boarne, útsein as in omkearde mutaasje-funksje herstelt.
- 2. Beëinjen oan N - Nitrosamines: De baktearjele kultuer wurdt mingd mei de testferbining (N - Nitrosamine) op in minimale agar-plaat mei in lyts bedrach fan histid.
- 3. Metabolic Activation (S9 Mix tafoeging): Om akkount te ferantwurdzjen foar metabolike konverzje yn it minsklik lichem befetsje guon testmonsters S9-fraksje, in enzymatysk extract fan rat-levermikrosjes.
- 4. Incubaasje en groei: De platen wurde ynskeakele om 37 oeren ynskeakele, wêrtroch baktearjele koloanjes om te groeien as mutaasjes foarkomme dat histidine synthesis foarkomt.
- 5 Kolony telle en analyse: it oantal werombetelling kolies (baktearje dy't de mooglikheid krige om histidine te produsearjen) wurdt teld en fergelike mei kontrôleplaten.
- Ynterpretaasje fan resultaten
- Positive ames test: in wichtige ferheging fan 'e reau yn fergeliking mei de kontrôle suggereart de ferbining dy't de ferbining beslút mutaasjes, ymplisearje mutsenysk en potinsjeel carcinogene eigenskippen.
- Negative ames test: As der gjin wichtige ferheging wurdt waarnommen, is de ferbining wierskynlik net - mutagenysk ûnder de testbetingsten.
- Dosse - Reaksje relaasje: hegere doses dy't liede ta ferhege mutaasje tariven fersterkje it bewiis fan mutagenialiteit.
Konklúzje
De ames-test is in rappe en kosten - effektive metoade foar it beoardieljen fan 'e mutageniciteit fan N - Nitroskines. Harren assosjaasje mei kanker jûn, identifisearje har mutagenyske eigenskippen troch dizze assay, is krúsjaal foar regeljouwingskontrôle en risiko-beoardieling. Dizze test bliuwt in hoekstien yn Toxicologyske screening en gemyske feiligensvaluaasje.
Trefwurden: N - Nitroskinen, NDSris, OECD 471, ferbettere Ames Test, Hamster Liver S9, Cytochrome P450-enzymen, mutaasje test
Posttiid: 2025 - 03 - 11 09:16:10