N n - үчүн ames тести

Ames Testке киришүү

Бактериялык мутация тести деп аталган ымыркайлардын тесту - бул химиялык кошулмалардын мотагендик потенциалын баалаган биологиялык байланыш үчүн кеңири колдонулат. 1970-жылдары Доктор Брюс Амес тарабынан иштелип чыккан, бул сыноо HISIDINE синтезине тартылган гендердеги мутацияларды көтөргөн бактериялуу салмонелла сайттарынын конкреттүү штаммдарын колдонот. Сыноо бир заттын бактериялык ДНКга мутацияга алып келиши керектигин аныктайт, адамдарда потенциалдуу каржеденцатияны көрсөтөт.

N - үчүн Ames Testтин актуалдуулугу Nitrosamines

N - нитосаминалар өзүлөрүнүн генотоксикалык жана карциногендик касиеттери менен белгилүү, анткени алар ДНКнын зыянга учурашы, алкиляциялык жана кычкылдуу стресс аркылуу белгилүү болушат. Амес тести айрыкча, алардын мутагеникалык эффекттерин аныктоодо пайдалуу, анткени Нетросаминалар ДНК менен өз ара аракеттенүү жөндөмдүү реактивдүү электрофильдик ортомчулуктарды түзүүгө метематикалык конверторлор аркылуу метаболикалык активдештирүүнү талап кылат. Бул активдештирүү адатта CITOCHROME P45 фермалары аркылуу боордо пайда болот. Vitro компаниясында бул затаболик конверсиясын көбөйтүү үчүн, сорттук зат алмашуу үчүн сорттун зат алмашуусун даярдоо жана мутагендик иш-аракеттерди аныктоону күчөтөт.

Амстин тестинин методологиясы

Амстердин тестинин стандарттык жол-жобосу төмөнкү кадамдарды камтыйт:

1. 1. Сыноо штаммдарын даярдоо: HISTIDINE Sinnthes гениндеги учурдагы мутациялар колдонулат. Бул штаммдар тышкы HISTIDINE булагына эч кандай зыян келтирбесе, эч кандай зыян келтире албайт.
2. 2. N - нитросаминаларга тийүү: Бактериялык маданият анализ кошулма (N - Nitrosamine) кичинекей гистлидин камтыган анал-аркан плитасына аралашып, аралаштырылат.
3. 3. Метаболикалык активдештирүү (S9 Mixolous): Адам денесиндеги затаболик конверсиясын эсепке алуу үчүн, тест үлгүлөрү S9 бөлүкчөлөр кирет, ал эми келемиштер боор микросомдорунун фонтматикалык экстракты камтыйт.
4. 4. Инкубация жана өсүү: Плиталар 48 сааттан 37 ° С боюнча инкубацияланат, бактериялык колонияларды өстүрүүгө мүмкүндүк берет, эгерде Хистидиндин синтезин калыбына келтирүү
5. 5. Колонияны эсептөө жана талдоо: Катталуу колониялардын саны (HISTIDINE чыгаруу жөндөмүн калыбына келтирүү) контролдук плиталарга салыштырылат.
6. Натыйжаларды чечмелөө

• Позитивдүү амстердин тести: Контролго салыштырмалуу кайрадан бааланган колониялардын олуттуу көбөйүшү, мутагендик жана потенциалдуу карциногендик касиеттерди билдирет.
• Терс ames тест: Эгерде олуттуу көбөйбөсө, анда эч кандай олуттуу өсүү байкалбаса, анда тест шартында мутагендик эмес.
• Доза - Жооп мамилелери: Мутациялык бааларды көбөйтүүгө алып келген жогорку дозалар мутагээндиктин далилдерин бекемдейт.

Корутунду

Амес тести - бул тез жана чыгым - n nitrosamines баалоонун натыйжалуу ыкмасы. Алардын ассоциациясын рак менен камсыз кылып, алардын мутагенникалык касиеттерин ушул инсайды жөнгө салуучу контролдоо жана тобокелдиктерди баалоо үчүн чечүүчү мааниге ээ. Бул сыноо токсикологиялык скринингдик жана химиялык коопсуздукту баалоонун негизин түзөт.

Ачкыч сөздөр: n - ndsris, oecd 471, өркүндөтүлгөн ames тест, хамстерн Live S9, Cytochrome P450 ферменттер, мутацияны текшерүү