Aangesien die medisyne metaboliserende ensiemaktiwiteite geleidelik afneem met die verlenging van in vitro -inkubasietyd, het tradisionele in vitro -metabolismemodelle beperkings soos kort inkubasietyd, lae metaboliese omskakeling en 'n hoë laer opsporingsgrens (die kwantitatiewe onderste limiet van Clint -toetsing is 2,5 μl /(min · 106 selle), wat nie akkuraat kan voorspel dat die kloof van die kleuter is nie.[1]. IntussenhepatosietS het meer ensieme wat benodig word vir oksidasie, vermindering, hidrolise en dimeriseringsreaksies in vergelyking metlewer mikrosome, en in in vitro -stelsels, is baie nuwe modelle geneig om geoptimaliseer te word op grond van diehepatosiet stelsel en die in vivo -omgewing verder naboots om die behoud van ensiemaktiwiteit inhepatosiets, en die verlenging van die inkubasietyd bied die moontlikheid om voldoende metaboliese transformasie van stadig metaboliserende middels te monitor[1,2].
In die lig hiervan, het iPhase, as 'n leier in biologiese reagense vir in vitro -navorsing, die Hepatomax ™ -stelsel en Hepatocon ™ -media -stelsel gesit op die studie van aanhangende primêre hepatosiete en stromale selle van verskillende genera, insluitend menslike, monkey, canine, rotte en muis, ens. aanhangende primêre menshepatosietS as voorbeeld, en albei stelsels is opgestel vir die bepaling van die aktiwiteit en metaboliese stabiliteit van spesifieke ensiemtipes en die toename in responswaarde van metaboliete van die geneesmiddeltolbutamied op 10 dae en 7 dae om die stelsels te verifieer. Metabolietverhoog die responswaarde op 10 dae en aktiwiteit en metaboliese stabiliteit van spesifieke ensiemtipes op 7 dae is bepaal om die stelsels te bekragtig.
- (1) Die twee sistematiese medisyne -valideringskultuurprosesse is soos volg:
IPhase - Hepatomax ™is 'n CO - Kultuurstelsel van bevrore ommuurde primêre menslike hepatosiete en stromale selle. Primêre menslike hepatosiete is vir drie dae herleef en geïnkubeer met stromale selle in Hepatop ™ -medium om die medisyne -toedieningsbepaling te begin, en die metabolisme van die middel is in serum - vrye Hepatodo ™ -medium uitgevoer, wat slegs met die middel aangevul is sonder om die medium te verander. 'N Totaal van 4, 72, 168 en 240 uur na toediening van medisyne, is die toegevoegde waarde van geneesmiddelmetaboliete vir ontleding bepaal.
IPhase - Hepatocon ™Aan die ander kant is 'n stelsel vir die kweek van bevrore aanhangende primêre menslike hepatosiete in Hepatocon ™ -medium. Nadat u die primêre mens herleef hethepatosietS, die medisyne -administrasie -toets is uitgevoer na 3 dae van kultuur in Hepatocon ™ -medium alleen, en die daaropvolgende tyd van administrasie, die kultuurstelsel en die toetsmetodologie was dieselfde as dié van die Hepatomax ™ -stelsel.
Intussen, om die akkuraatheid en noukeurigheid van die resultate te verseker, het iPhase terselfdertyd 'n mediumbeheer (sel - gratis) en 'n stromale selbeheer uitgevoer, met drie replikasies, en die resultate het getoon dat dieIPhase - Hepatomax ™ enIPhase - Hepatocon ™ Stelsels het vanaf dag 3 'n sterk piek metabolietrespons opgelewer, en dat hulle albei 'n sterk metaboliese omsettempo getoon het.
- (2) Dwelmmetabolisme is hoofsaaklik afhanklik van die hepatosietCYP450ensiemstelsel, en die aktiwiteit daarvan kan gemeet word om beter te ondersoek.
DieIPhase - Hepatomax ™ enIPhase - Hepatocon ™ stelsels het goeie toepaslikheid.
Iphase het vier kategorieë mediumbeheer (geen selle), hepatomax ™, hepatocon ™ en stromale selle opgestel. Gebruik muur - aanhegtende primêre menshepatosiets As voorbeeld verhoog die metabolietwaardes vanCYP1A2, CYP2B6enCYP3A4is geverifieer op dag 0, 3 en 7 daarnahepatosietHerstel vir 3 dae met Finasteride, Bupropion en Midazolam onderskeidelik as die substraat. Metabolietverhogingwaardes het getoon dat beide beideIPhase - Hepatomax ™ enIPhase - Hepatocon ™ Stelsels het aktiewe ensiemaktiwiteit op dag 7 getoon, wat die normale geneesmiddelmetabolisme deurgaans bevorder.
- (3) Benewens die validering van ensiemaktiwiteit, is goeie metaboliese stabiliteit ook 'n belangrike en onontbeerlike stap om die nut van in vitro -modelle te bevestig.
IPhase het drie kategorieë van Hepatomax ™, Hepatocon ™ en stromale selle opgestel om die metaboliese stabiliteit van tolbutimied oor 'n periode van 80 uur te bepaal met behulp van aanhangende primêre menslike hepatosiete as voorbeeld, wat drie dae na resussitasie van primêre toegedien ishepatosiets, en die resultate het getoon dat beide dieIPhase - Hepatomax ™ enIPhase - Hepatocon ™ Stelsels het albei 'n robuuste metaboliese opruimingsaktiwiteit getoon binne die langste waarde van die toetstyd.
Samevattend het iPhase, as 'n leier in in vitro bio - reagense, ontwikkelIPhase Hepatomax ™ enIPhase Hepatocon ™ In vitro -modelle gebaseer op muur - toegepaste primêre mens, aap, hond, rot en muishepatosietS en stromale selle van verskillende geslagte, met uitstekende metaboliese omset, aktiewe ensiemaktiwiteite en kragtige metaboliese opruimingsaktiwiteite, wat nuwe keuses bied vir ons kliënte om lae -opruimingsmedisyne te ontwikkel, en 'n onontbeerlike vennoot is om dwelmontdekking te besef! DieIPhase Hepatomax ™ enIPhase Hepatocon ™ In vitro -modelle bied uitstekende metaboliese omsetkoerse, aktiewe ensiemaktiwiteite en sterk metaboliese opruimingsaktiwiteite, wat nuwe opsies bied vir kliënte om lae -opruimingsmedisyne te ontwikkel, en is 'n belangrike vennoot in die ontdekking van dwelmmiddels!
Verwysing:
[1] 阮婷婷, 鞠武建, 熊海伟, 等. 低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]. 中国药科大学学报, 2019 (2): 152 - 160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. 'N Nuwe aflosmetode om lae - opruimingswaardes [J] te bepaal. Dwelmmetabolisme en ingesteldheid, 2012, 40 (9): 1860 - 1865.
Postyd: 2024 - 07 - 19 17:20:41