Droga metabolizatzeko entzimaren jarduerak pixkanaka-pixkanaka gutxitzen direnez in vitro inkubazio-denbora luzatzearekin batera, in vitro metabolismo-eredu tradizionalek mugak dituzte, hala nola inkubazio denbora laburra, bihurketa metaboliko baxua eta detekzio-muga baxua (CLint entseguaren beheko muga kuantitatiboa 2,5 μL /(min·106 zelulak) da), eta horrek ezin du zehatz-mehatz iragartzen poliki-poliki metabolizatzen diren drogak.[1]. Bitartean,hepatozitoaOxidazio, murrizketa, hidrolisi eta dimerizazio erreakzioetarako beharrezkoak diren entzima gehiago dituzte.gibeleko mikrosomak, eta in vitro sistemetan, eredu berri asko optimizatu ohi dirahepatozitoa sistema eta gehiago imitatu in vivo ingurunea entzimen jardueraren atxikipena luzatzekohepatozitoas, eta inkubazio denbora luzatzeak metabolizazio moteleko botiken eraldaketa metaboliko nahikoa kontrolatzeko aukera ematen du.[1,2].
Hori ikusita, IPHASE, in vitro ikerketarako erreaktibo biologikoetan lider gisa, HepatoMax™ System eta HepatoCon™ Media System aitzindaria izan da hainbat generotako hepatozito primario atxikien eta estroma-zelulen azterketan oinarrituta, gizakia, tximinoa, txakurra, arratoia eta sagua, etab.hepatozitoas adibide gisa, eta bi sistemak entzima mota espezifikoen jarduera eta egonkortasun metabolikoa zehazteko eta tolbutamida drogaren metabolitoen erantzun-balioa handitzeko 10 egunetan eta 7 egunetan sistemak egiaztatzeko. Metabolitoak 10 egunetan erantzunaren balioa handitzen du eta 7 egunetan entzima mota espezifikoen jarduera eta egonkortasun metabolikoa zehaztu ziren sistemak balioztatzeko.
- (1) Drogak baliozkotzeko kultura sistematikoko bi prozesu hauek hauek dira:
IPHASE-HepatoMax™Izoztutako hormadun giza hepatozito primarioen eta estroma-zelulen ko laborantza sistema bat da. Giza hepatozito primarioak berpiztu eta estromal-zelulekin inkubatu ziren HepatoP™ medioan 3 egunez sendagaiak administratzeko azterketari ekiteko, eta sendagaiaren metabolismoa serum-free HepatoDo™ medioan egin zen, farmakoarekin bakarrik bete zen medioa aldatu gabe. Droga administratu eta 4, 72, 168 eta 240 ordura guztira, droga-metabolitoen balio erantsia zehaztu zen aztertzeko.
IPHASE-HepatoCon™, berriz, izoztutako giza hepatozito primario atxikituak HepatoCon™ medioan hazteko sistema bat da. Lehen gizakia suspertu ondorenhepatozitoas, sendagaiak administratzeko saiakuntza 3 egunez HepatoCon™ medioan bakarrik egin ondoren, eta ondorengo administrazio-denbora, hazkuntza-sistema eta azterketa-metodologia HepatoMax™ sistemaren berdinak izan ziren.
Bien bitartean, emaitzen zehaztasuna eta zorroztasuna bermatzeko, IPHASEk kontrol ertaina (zelula-free) eta estroma-zelulen kontrol bat egin zituen aldi berean, hiru erreplikekin, eta emaitzek erakutsi zutenIPHASE-HepatoMax™ etaIPHASE-HepatoCon™ sistemak 3. egunetik aurrera goi-mailako metabolitoen erantzun handia sortu zuten, eta biek errentamendu metaboliko tasa handia erakutsi zutela.
- (2) Drogen metabolismoa hepatozitoaren menpe dago batez ereCYP450entzima-sistema, eta bere jarduera neur daiteke hobeto aztertzeko.
TheIPHASE-HepatoMax™ etaIPHASE-HepatoCon™ sistemek aplikagarritasun ona dute.
IPHASE-k kontrol ertaineko lau kategoria ezarri zituen (zelularik gabe), HepatoMax™, HepatoCon™ eta estroma-zelulak. Horma-lehen gizaki atxikia erabilizhepatozitoas adibide gisa, metabolitoaren balioak handitzen dituCYP1A2, CYP2B6etaCYP3A4ondorengo 0, 3 eta 7 egunetan egiaztatu zirenhepatozitoaberreskuratzea 3 egunez finasterida, bupropiona eta midazolam substratu gisa erabiliz, hurrenez hurren. Metabolitoaren igoeraren balioak biak direla erakutsi zutenIPHASE-HepatoMax™ etaIPHASE-HepatoCon™ sistemak entzimaren jarduera aktiboa erakutsi zuen 7. egunean, droga-metabolismo normala etengabe sustatuz.
- (3) Entzimaren jarduera balioztatzeaz gain, egonkortasun metaboliko ona ere urrats garrantzitsua eta ezinbestekoa da in vitro ereduen erabilgarritasuna balioztatzeko.
IPHASE-k HepatoMax™, HepatoCon™ eta estroma-zelulen hiru kategoria ezarri zituen Tolbutimidaren egonkortasun metabolikoa 80 orduko epean zehazteko, giza hepatozito primario atxikiak adibide gisa erabiliz, lehen mailako suspertu eta 3 egun igaro ondoren.hepatozitoas, eta emaitzek erakutsi zuten baiIPHASE-HepatoMax™ etaIPHASE-HepatoCon™ sistema biek garbiketa metaboliko jarduera sendoa erakutsi zuten entsegu-denboraren baliorik luzeenean.
Laburbilduz, IPHASE, in vitro bio-erreaktiboetan lider gisa, garatu daIPHASE HepatoMax™ etaIPHASE HepatoCon™ horman oinarritutako in vitro ereduak-aplikatutako lehen gizakia, tximinoa, txakurra, arratoia eta saguahepatozitoaHainbat generotako s eta estromal zelulak, fakturazio metaboliko bikainarekin, entzima jarduera aktiboekin eta garbiketa metaboliko jarduera indartsuarekin, gure bezeroei aukera berriak eskaintzen dizkiete garbitasun baxuko sendagaiak garatzeko, eta ezinbesteko bazkide dira botiken aurkikuntza gauzatzeko! TheIPHASE HepatoMax™ etaIPHASE HepatoCon™ in vitro ereduek fakturazio-tasa metaboliko bikainak, entzima-jarduera aktiboak eta garbiketa metaboliko-jarduera sendoak eskaintzen dituzte, bezeroei aukera berriak eskaintzen dizkiete garbitasun baxuko sendagaiak garatzeko, eta bazkide garrantzitsua dira sendagaien aurkikuntzan!
Erreferentzia:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Garbitasun-balioak[J] zehazteko errele-metodo berri bat. Drug metabolism and disposition, 2012, 40(9): 1860-1865.
Argitalpenaren ordua: 2024-07-19 17:20:41