薬物代謝酵素活性は、in vitro でのインキュベーション時間の延長に伴って徐々に低下するため、従来の in vitro 代謝モデルには、インキュベーション時間が短い、代謝変換率が低い、検出下限が高い（CLint アッセイの定量的下限は 2.5 μL /( min · 106 細胞)）などの制限があり、ゆっくりと代謝される薬物の CLint を正確に予測することはできません。[1]。一方、肝細胞酸化、還元、加水分解、二量化反応に必要な酵素がより多く含まれています。肝臓ミクロソーム、および in vitro システムでは、多くの新しいモデルは、肝細胞 システムを強化し、さらに生体内環境を模倣して体内の酵素活性の保持を延長します。肝細胞インキュベーション時間を延長すると、代謝の遅い薬剤の十分な代謝変化を監視できる可能性が得られます。[1,2].
これを考慮して、IPHASE は、インビトロ研究用の生物学的試薬のリーダーとして、ヒト、サル、イヌ、ラット、マウスなどのさまざまな属の接着性初代肝細胞および間質細胞の研究に基づいて、HepatoMax™ システムおよび HepatoCon™ メディア システムを開発しました。HepatoMax™ システムおよび HepatoCon™ メディア システムは、ヒト接着性初代肝細胞および HepatoCon™ メディア システムを使用して開発されました。肝細胞を例として、特定の酵素タイプの活性と代謝安定性、およびシステムを検証するために 10 日後と 7 日後の薬物トルブタミドの代謝産物の応答値の増加を測定するために、両方のシステムを設定しました。システムを検証するために、10 日目の代謝物増加応答値と 7 日目の特定の酵素タイプの活性と代謝安定性を測定しました。
- (1)体系的な医薬品検証培養プロセスは次の 2 つです。
IPHASE-HepatoMax™凍結壁初代ヒト肝細胞と間質細胞の共培養系である。初代ヒト肝細胞を蘇生させ、HepatoP™培地中で間質細胞とともに3日間インキュベートして薬物投与アッセイを開始し、培地を交換せずに薬物のみを補充した無血清HepatoDo™培地中で薬物の代謝を行った。薬物投与後合計 4、72、168、および 240 時間後に、薬物代謝物の付加価値が分析のために決定されました。
IPHASE-HepatoCon™一方、は、HepatoCon™ 培地で凍結接着初代ヒト肝細胞を培養するシステムです。初代人間を蘇生させた後肝細胞薬物投与アッセイは、HepatoCon™ 培地のみで 3 日間培養した後に行われ、その後の投与時間、培養系、アッセイ方法は HepatoMax™ システムと同じでした。
一方、結果の精度と厳密性を確保するために、IPHASE は培地コントロール (細胞) と間質細胞コントロールを 3 回の複製で同時に実行しました。その結果は、IPHASE-HepatoMax™ そしてIPHASE-HepatoCon™ システムは 3 日目以降に強力なピーク代謝物反応を生成し、両方とも強力な代謝回転率を示したことがわかりました。
- (2)薬物代謝は主に肝細胞に依存するCYP450酵素システムを分析し、その活性を測定してさらに詳しく調べることができます。
のIPHASE-HepatoMax™ そしてIPHASE-HepatoCon™ システムは優れた適用性を持っています。
IPHASE は、培地コントロール (細胞なし)、HepatoMax™、HepatoCon™、および間質細胞の 4 つのカテゴリーを設定しました。壁付着性初代ヒトを使用肝細胞例として、代謝物は次の値を増加させます。CYP1A2, CYP2B6そしてCYP3A40日目、3日目、7日目に確認されました。肝細胞基質としてそれぞれフィナステリド、ブプロピオン、ミダゾラムを使用して 3 日間回復します。代謝物増加値は両方を示しましたIPHASE-HepatoMax™ そしてIPHASE-HepatoCon™ システムは 7 日目までに活性な酵素活性を示し、一貫して正常な薬物代謝を促進しました。
- (3)酵素活性の検証に加えて、良好な代謝安定性も、in vitro モデルの有用性を検証する上で重要かつ不可欠なステップです。
IPHASE は、HepatoMax™、HepatoCon™、間質細胞の 3 つのカテゴリーを設定し、一例として接着初代ヒト肝細胞を使用して 80 時間にわたるトルブチミドの代謝安定性を測定しました。これらの肝細胞は初代肝細胞の蘇生から 3 日後に投与されました。肝細胞s、結果は両方ともIPHASE-HepatoMax™ そしてIPHASE-HepatoCon™ どちらのシステムも、最長のアッセイ時間内で強力な代謝クリアランス活性を示しました。
要約すると、IPHASE は in vitro バイオ試薬のリーダーとして、IPHASE HepatoMax™ そしてIPHASE HepatoCon™ 壁に塗布された初代ヒト、サル、イヌ、ラットおよびマウスに基づく in vitro モデル肝細胞優れた代謝回転率、活性酵素活性、強力な代謝クリアランス活性を備えたさまざまな属の細胞および間質細胞は、お客様に低クリアランス医薬品の開発に新たな選択肢を提供し、創薬実現に欠かせないパートナーです。のIPHASE HepatoMax™ そしてIPHASE HepatoCon™ in vitro モデルは、優れた代謝回転率、活性酵素活性、および強力な代謝クリアランス活性を提供し、顧客が低クリアランス医薬品を開発するための新しいオプションを提供し、創薬における重要なパートナーです。
参考：
[1] 阮婷婷、鞠武建、熊海伟、等.低清除率药物の代谢稳定性预测モデル研究进展[J].中国药科大学学报、2019(2):152-160.
[2] Di L、Trapa P、Obach R S、他。クリアランス値[J]を決定するための新しい中継方法。薬物の代謝と性質、2012、40(9): 1860-1865。
投稿時間: 2024-07-19 17:20:41