Do hoạt tính của enzyme chuyển hóa thuốc giảm dần khi thời gian ủ in vitro kéo dài nên các mô hình chuyển hóa in vitro truyền thống có những hạn chế như thời gian ủ ngắn, chuyển hóa trao đổi chất thấp và giới hạn phát hiện thấp hơn (giới hạn định lượng dưới của xét nghiệm CLint là 2,5 μL /(min·106 tế bào)), không thể dự đoán chính xác CLint của thuốc chuyển hóa chậm[1]. Trong khi đó,tế bào gancó nhiều enzyme cần thiết cho các phản ứng oxy hóa, khử, thủy phân và dimer hóa so vớimicrosome ganvà trong các hệ thống in vitro, nhiều mô hình mới có xu hướng được tối ưu hóa dựa trêntế bào gan hệ thống và tiếp tục mô phỏng môi trường in vivo để kéo dài thời gian duy trì hoạt động của enzyme trongtế bào gans, và việc kéo dài thời gian ủ bệnh mang lại khả năng theo dõi quá trình chuyển hóa đầy đủ của các thuốc chuyển hóa chậm[1,2].
Theo quan điểm này, IPHASE, với tư cách là công ty dẫn đầu về thuốc thử sinh học cho nghiên cứu in vitro, đã đi tiên phong trong Hệ thống HepatoMax™ và Hệ thống môi trường HepatoCon™ dựa trên nghiên cứu về các tế bào gan sơ cấp và tế bào mô đệm của nhiều giống khác nhau, bao gồm người, khỉ, chó, chuột và chuột nhắt, v.v. Hệ thống HepatoMax™ và Hệ thống môi trường HepatoCon™ được phát triển bằng cách sử dụng con người cơ bản tuân thủtế bào gans làm ví dụ và cả hai hệ thống đều được thiết lập để xác định hoạt tính và độ ổn định trao đổi chất của các loại enzyme cụ thể cũng như sự gia tăng giá trị phản ứng của các chất chuyển hóa của thuốc tolbutamide sau 10 ngày và 7 ngày để xác minh hệ thống. Chất chuyển hóa tăng giá trị phản ứng sau 10 ngày và hoạt tính cũng như độ ổn định trao đổi chất của các loại enzyme cụ thể sau 7 ngày được xác định để xác nhận hệ thống.
- (1) Hai quy trình nuôi cấy xác nhận thuốc có hệ thống như sau:
IPHASE-HepatoMax™là một hệ thống đồng nuôi cấy các tế bào gan nguyên phát ở người có vách đông lạnh và tế bào mô đệm. Các tế bào gan nguyên phát ở người được hồi sinh và ủ với các tế bào cơ địa trong môi trường HepatoP™ trong 3 ngày để bắt đầu thử nghiệm sử dụng thuốc và quá trình chuyển hóa thuốc được thực hiện trong môi trường HepatoDo™ tự do trong huyết thanh, môi trường này chỉ được bổ sung bằng thuốc mà không thay đổi môi trường. Tổng cộng 4, 72, 168 và 240 giờ sau khi dùng thuốc, giá trị gia tăng của chất chuyển hóa thuốc được xác định để phân tích.
IPHASE-HepatoCon™mặt khác, là một hệ thống nuôi cấy tế bào gan nguyên phát ở người đông lạnh bám dính trong môi trường HepatoCon™. Sau khi hồi sức cho người sơ cấptế bào gans, xét nghiệm sử dụng thuốc được thực hiện sau 3 ngày nuôi cấy chỉ trong môi trường HepatoCon™ và thời gian sử dụng tiếp theo, hệ thống nuôi cấy và phương pháp xét nghiệm giống như của hệ thống HepatoMax™.
Trong khi đó, để đảm bảo tính chính xác và chặt chẽ của kết quả, IPHASE đã thực hiện đồng thời điều khiển môi trường (không có tế bào) và điều khiển tế bào cơ địa, với ba lần lặp lại và kết quả cho thấyIPHASE-HepatoMax™ vàIPHASE-HepatoCon™ các hệ thống tạo ra phản ứng chuyển hóa đỉnh điểm mạnh mẽ từ ngày thứ 3 trở đi và cả hai đều cho thấy tốc độ luân chuyển trao đổi chất mạnh mẽ.
- (2)Chuyển hóa thuốc chủ yếu phụ thuộc vào tế bào ganCYP450hệ thống enzyme và hoạt động của nó có thể được đo lường để kiểm tra tốt hơn.
cácIPHASE-HepatoMax™ vàIPHASE-HepatoCon™ hệ thống có khả năng ứng dụng tốt.
IPHASE thiết lập bốn loại tế bào kiểm soát môi trường (không có tế bào), HepatoMax™, HepatoCon™ và tế bào mô đệm. Dùng tường-kết dính tiểu nhântế bào gans là một ví dụ, chất chuyển hóa làm tăng giá trị củaCYP1A2, CYP2B6vàCYP3A4đã được xác minh vào ngày 0, 3 và 7 sautế bào ganphục hồi trong 3 ngày bằng cách sử dụng finasteride, bupropion và midazolam làm chất nền tương ứng. Giá trị tăng trao đổi chất cho thấy cả haiIPHASE-HepatoMax™ vàIPHASE-HepatoCon™ hệ thống cho thấy hoạt động của enzyme hoạt động vào ngày thứ 7, liên tục thúc đẩy quá trình chuyển hóa thuốc bình thường.
- (3) Ngoài việc xác nhận hoạt động của enzyme, độ ổn định trao đổi chất tốt cũng là một bước quan trọng và không thể thiếu trong việc xác nhận tính hữu ích của các mô hình in vitro.
IPHASE đã thiết lập ba loại tế bào HepatoMax™, HepatoCon™ và tế bào mô đệm để xác định độ ổn định trao đổi chất của Tolbutimide trong khoảng thời gian 80 giờ bằng cách sử dụng tế bào gan nguyên phát ở người bám dính làm ví dụ, được sử dụng 3 ngày sau khi hồi sức cho bệnh nhân nguyên phát.tế bào gans, và kết quả cho thấy rằng cả haiIPHASE-HepatoMax™ vàIPHASE-HepatoCon™ cả hai hệ thống đều cho thấy hoạt tính thanh thải trao đổi chất mạnh mẽ trong khoảng thời gian xét nghiệm dài nhất.
Tóm lại, IPHASE, với tư cách là công ty dẫn đầu về thuốc thử sinh học in vitro, đã phát triểnIPHASE HepatoMax™ vàIPHASE HepatoCon™ mô hình in vitro dựa trên tường-áp dụng sơ cấp trên người, khỉ, chó, chuột và chuột nhắttế bào gans và tế bào cơ địa thuộc nhiều loại khác nhau, với tốc độ trao đổi chất tuyệt vời, hoạt động của enzyme hoạt động và hoạt động thanh thải trao đổi chất mạnh mẽ, mang đến những lựa chọn mới cho khách hàng của chúng tôi để phát triển các loại thuốc có độ thanh thải thấp và là đối tác không thể thiếu để hiện thực hóa việc khám phá thuốc! cácIPHASE HepatoMax™ vàIPHASE HepatoCon™ các mô hình in vitro mang lại tốc độ luân chuyển trao đổi chất tuyệt vời, hoạt động của enzyme hoạt động và hoạt động thanh thải trao đổi chất mạnh mẽ, cung cấp các lựa chọn mới cho khách hàng để phát triển các loại thuốc có độ thanh thải thấp và là đối tác quan trọng trong việc khám phá thuốc!
Tham khảo:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, và cộng sự. Một phương pháp chuyển tiếp mới để xác định các giá trị khe hở - thấp [J]. Chuyển hóa và thải bỏ thuốc, 2012, 40(9): 1860-1865.
Thời gian đăng: 2024-07-19 17:20:41