उपन्यास इन भिट्रो हेपाटोसाइट मेटाबोलिज्म मोडेलले ढिलो - मेटाबोलाइजिङ फार्माकोकाइनेटिक अध्ययनलाई सुविधा दिन्छ

इन भिट्रो इन्क्युबेशन समयको लम्बाइसँगै ड्रग मेटाबोलिजिङ इन्जाइम गतिविधिहरू बिस्तारै घट्दै गएकाले, परम्परागत इन भिट्रो मेटाबोलिज्म मोडेलहरूमा छोटो इन्क्युबेशन समय, कम चयापचय रूपान्तरण र पत्ता लगाउने उच्च तल्लो सीमा जस्ता सीमितताहरू छन् (CLint परखको मात्रात्मक तल्लो सीमा 2.5 μL·1/() कोशिकाहरू प्रि-लिट गर्न सक्दैनन्। बिस्तारै मेटाबोलाइज्ड औषधिहरू^[1]। यसैबीच,हेपाटोसाइटs सँग तुलनामा अक्सिडेशन, रिडक्शन, हाइड्रोलाइसिस र डाइमराइजेशन प्रतिक्रियाहरूको लागि आवश्यक अधिक इन्जाइमहरू छन्।कलेजो माइक्रोसोम, र इन भिट्रो प्रणालीहरूमा, धेरै उपन्यास मोडेलहरू को आधारमा अनुकूलित हुन्छन्हेपाटोसाइट प्रणाली र थप इन्जाइम गतिविधि को अवधारण को अवधि को लागी भिभो वातावरण को नक्कलहेपाटोसाइटs, र इन्क्युबेशन समयको लम्बाइले ढिलो मेटाबोलिजिङ ड्रग्सको पर्याप्त मेटाबोलिक रूपान्तरणको निगरानी गर्ने सम्भावना प्रदान गर्दछ।^[१,२].

यसलाई ध्यानमा राख्दै, इन भिट्रो अनुसन्धानका लागि जैविक अभिकर्मकहरूमा अग्रणीको रूपमा, IPHASE ले मानव, बाँदर, कुकुर, मुसा, र मुसा, आदि लगायत विभिन्न जेनेराका अनुयायी प्राथमिक हेपाटोसाइट्स र स्ट्रोमल सेलहरूको अध्ययनको आधारमा HepatoMax™ प्रणाली र HepatoCon™ मिडिया प्रणालीको अग्रगामी रूपमा विकास गरेको छ। मानवहेपाटोसाइटउदाहरणको रूपमा, र दुवै प्रणालीहरू विशिष्ट इन्जाइम प्रकारहरूको गतिविधि र चयापचय स्थिरता निर्धारण गर्न र प्रणालीहरू प्रमाणित गर्न 10 दिन र 7 दिनमा औषधि टोलबुटामाइडको मेटाबोलाइट्सको प्रतिक्रिया मूल्यमा वृद्धिको लागि सेटअप गरिएको थियो। मेटाबोलाइटले 10 दिनमा प्रतिक्रिया मूल्य बढाउँछ र 7 दिनमा विशिष्ट इन्जाइम प्रकारहरूको गतिविधि र मेटाबोलिक स्थिरता प्रणालीहरू मान्य गर्न निर्धारण गरिएको थियो।

• (१) दुई व्यवस्थित औषधि प्रमाणीकरण संस्कृति प्रक्रियाहरू निम्नानुसार छन्:

  IPHASE-HepatoMax™जमेको पर्खाल प्राथमिक मानव hepatocytes र stromal कोशिकाहरु को एक सह-संस्कृति प्रणाली हो। प्राथमिक मानव हेपाटोसाइटहरू पुनरुत्थान गरियो र औषधि प्रशासन परख सुरु गर्न 3 दिनको लागि HepatoP™ माध्यममा स्ट्रोमल कोशिकाहरूद्वारा इन्क्युबेटेड गरियो, र औषधीको चयापचय सीरम-फ्री हेपाटोडो™ माध्यममा गरिएको थियो, जुन माध्यम परिवर्तन नगरी औषधिले मात्र भरिएको थियो। कुल 4, 72, 168 र 240 घण्टा औषधि प्रशासन पछि, ड्रग मेटाबोलाइट्सको मूल्य थपिएको विश्लेषणको लागि निर्धारण गरिएको थियो।

 

  IPHASE-HepatoCon™, अर्कोतर्फ, HepatoCon™ माध्यममा जमेको अनुयायी प्राथमिक मानव hepatocytes को संस्कृति को लागी एक प्रणाली हो। प्राथमिक मानव पुनरुत्थान पछिहेपाटोसाइटs, औषधि प्रशासन परख हेपाटोकोन ™ माध्यममा मात्र 3 दिनको संस्कृति पछि प्रदर्शन गरिएको थियो, र प्रशासनको पछिल्लो समय, संस्कृति प्रणाली र परख विधि हेपाटोम्याक्स प्रणालीको जस्तै थियो।

 

यसैबीच, नतिजाको शुद्धता र कठोरता सुनिश्चित गर्नको लागि, IPHASE ले एकै समयमा तीनवटा प्रतिकृतिहरू सहित एक मध्यम नियन्त्रण (सेल-फ्री) र एक स्ट्रोमल सेल नियन्त्रण प्रदर्शन गर्‍यो, र परिणामहरूले देखायो किIPHASE-HepatoMax™ रIPHASE-HepatoCon™ प्रणालीहरूले दिन 3 बाट एक बलियो शिखर मेटाबोलाइट प्रतिक्रिया उत्पादन गर्यो, र ती दुबैले बलियो मेटाबोलिक कारोबार दर देखाए।

 

 

• (२) औषधिको मेटाबोलिज्म मुख्यतया हेपाटोसाइटमा निर्भर हुन्छCYP450इन्जाइम प्रणाली, र यसको गतिविधि राम्रो जाँच गर्न मापन गर्न सकिन्छ।

दIPHASE-HepatoMax™ रIPHASE-HepatoCon™ प्रणालीहरू राम्रो लागू हुन्छ।

IFHASE ले मध्यम नियन्त्रण (कुनै कोषहरू नभएको), HepatoMax™, HepatoCon™ र stromal कोशिकाहरूका चार वर्गहरू सेटअप गर्यो। पर्खाल प्रयोग गर्दै - अनुयायी प्राथमिक मानवहेपाटोसाइटउदाहरण को रूप मा, मेटाबोलाइट को मान वृद्धिCYP1A2, CYP2B6रCYP3A4दिन 0, 3 र 7 पछि प्रमाणित गरियोहेपाटोसाइटफिनास्टराइड, बुप्रोपियन र मिडाजोलमलाई सब्सट्रेटको रूपमा क्रमशः प्रयोग गरेर ३ दिनको लागि रिकभरी। मेटाबोलाइट वृद्धि मानहरूले देखाएको छ कि दुबैIPHASE-HepatoMax™ रIPHASE-HepatoCon™ प्रणालीहरूले 7 दिनमा सक्रिय इन्जाइम गतिविधि देखाए, लगातार सामान्य औषधि चयापचयलाई बढावा दिँदै।

 

• (3) इन्जाइम गतिविधिको प्रमाणीकरणको अतिरिक्त, राम्रो चयापचय स्थिरता पनि इन भिट्रो मोडेलहरूको उपयोगिता मान्य गर्न एक महत्त्वपूर्ण र अपरिहार्य कदम हो।

IPHASE ले HepatoMax™, HepatoCon™ र stromal कोशिकाहरूको 80 घण्टाको अवधिमा Tolbutimide को चयापचय स्थिरता निर्धारण गर्नको लागि अनुयायी प्राथमिक मानव हेपाटोसाइटहरू उदाहरणको रूपमा प्रयोग गरी तीन कोटिहरू सेट अप गर्यो, जुन प्राथमिकको पुनरुत्थानको 3 दिन पछि प्रशासित गरिएको थियो।हेपाटोसाइटs, र परिणामहरूले देखाएको छ कि दुबैIPHASE-HepatoMax™ रIPHASE-HepatoCon™ दुवै प्रणालीहरूले परख समयको सबैभन्दा लामो मूल्य भित्र बलियो मेटाबोलिक क्लियरेन्स गतिविधि देखाइयो।

 

संक्षेपमा, IPHASE, भिट्रो बायो-अभिकर्मकहरूमा एक नेताको रूपमा, विकसित भएको छIphase HepatoMax™ रIphase HepatoCon™ भिट्रोमा आधारित मोडेलहरू - प्राथमिक मानव, बाँदर, कुकुर, मुसा र मुसा लागू गरिएकोहेपाटोसाइटउत्कृष्ट मेटाबोलिक टर्नओभर, सक्रिय इन्जाइम गतिविधिहरू र शक्तिशाली मेटाबोलिक क्लियरेन्स गतिविधिहरू सहित विभिन्न जेनेराका s र स्ट्रोमल सेलहरू, जसले हाम्रा ग्राहकहरूलाई न्यून-क्लियरन्स औषधिहरू विकास गर्न नयाँ विकल्पहरू प्रदान गर्दछ, र औषधिको खोजलाई महसुस गर्न अपरिहार्य साझेदार हो! दIphase HepatoMax™ रIphase HepatoCon™ इन भिट्रो मोडेलहरूले उत्कृष्ट मेटाबोलिक कारोबार दरहरू, सक्रिय इन्जाइम गतिविधिहरू र बलियो मेटाबोलिक क्लियरेन्स गतिविधिहरू प्रदान गर्दछ, ग्राहकहरूलाई न्यून-क्लियरन्स औषधिहरू विकास गर्न नयाँ विकल्पहरू प्रदान गर्दछ, र औषधि खोजमा एक महत्त्वपूर्ण साझेदार हो!

 

सन्दर्भ:

[१]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等।低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展 [J]।中国药科大学学报, २०१९(२):१५२-१६०।

[२] Di L, Trapa P, Obach R S, et al। कम - क्लियरेन्स मानहरू [J] निर्धारण गर्नको लागि उपन्यास रिले विधि। ड्रग मेटाबोलिज्म र डिस्पोजिसन, २०१२, ४०(९): १८६०-१८६५।