Паколькі актыўнасць ферментаў, якія метабалізуюць лекі, паступова зніжаецца з падаўжэннем часу інкубацыі in vitro, традыцыйныя мадэлі метабалізму in vitro маюць абмежаванні, такія як кароткі час інкубацыі, нізкая метабалічная канверсія і высокая ніжняя мяжа выяўлення (колькасная ніжняя мяжа аналізу CLint складае 2,5 мкл /(мін·106 клетак)), што не можа дакладна прадказаць CLint павольна метабалізаваных лекаў.[1]. тым часам,гепатацытаўs маюць больш ферментаў, неабходных для рэакцый акіслення, аднаўлення, гідролізу і димеризации ў параўнанні змикросомы печані, і ў сістэмах in vitro многія новыя мадэлі, як правіла, аптымізаваны на асновегепатацытаў сістэму і дадаткова імітаваць асяроддзе in vivo, каб падоўжыць захаванне актыўнасці фермента ўгепатацытаўс, а падаўжэнне інкубацыйнага часу дае магчымасць кантраляваць дастатковую метабалічную трансфармацыю павольна метаболізірующихся прэпаратаў.[1,2].
У сувязі з гэтым IPHASE, як лідар у галіне біялагічных рэагентаў для даследаванняў in vitro, стала піянерам сістэмы HepatoMax™ і HepatoCon™ Media System, заснаванай на вывучэнні першасных клетак гепатацытаў і стромальных клетак чалавека, малпы, сабакі, пацукі і мышы і г.д.гепатацытаўs у якасці прыкладу, і абедзве сістэмы былі створаны для вызначэння актыўнасці і метабалічнай стабільнасці пэўных тыпаў ферментаў і павелічэння значэння адказу метабалітаў прэпарата толбутамида праз 10 дзён і праз 7 дзён для праверкі сістэм. Для пацверджання сістэм былі вызначаны значэнне рэакцыі на павышэнне метабалітаў праз 10 дзён, а таксама актыўнасць і метабалічная стабільнасць пэўных тыпаў ферментаў праз 7 дзён.
- (1) Два працэсы сістэматычнай праверкі культуры лекаў наступныя:
IPHASE-HepatoMax™гэта сістэма сумеснага культывавання замарожаных першасных гепатацытаў чалавека і стромальных клетак. Першасныя гепатацыты чалавека рэанімавалі і інкубавалі са стромальных клеткамі ў асяроддзі HepatoP™ на працягу 3 дзён, каб пачаць аналіз на ўвядзенне лекаў, і метабалізм прэпарата праводзіўся ў бессыроватачнай асяроддзі HepatoDo™, якую папаўнялі толькі лекамі без змены асяроддзя. У агульнай складанасці праз 4, 72, 168 і 240 гадзін пасля ўвядзення лекаў для аналізу была вызначана дабаўленая вартасць метабалітаў лекаў.
IPHASE-HepatoCon™, з іншага боку, уяўляе сабой сістэму для культывавання замарожаных адгезійных першасных гепатацытаў чалавека ў асяроддзі HepatoCon™. Пасля першаснай рэанімацыі чалавекагепатацытаўs, аналіз увядзення прэпарата праводзіўся пасля 3 дзён культывавання толькі ў асяроддзі HepatoCon™, а наступны час увядзення, сістэма культывавання і метадалогія аналізу былі такімі ж, як і ў сістэме HepatoMax™.
У той жа час, каб забяспечыць дакладнасць і строгасць вынікаў, IPHASE адначасова правёў кантроль асяроддзя (клетка-бясплатна) і кантроль стромальных клетак у трох паўторах, і вынікі паказалі, штоIPHASE-HepatoMax™ іIPHASE-HepatoCon™ сістэмы далі моцную пікавую метабалітную рэакцыю з 3-га дня і далей, і што яны абедзве паказалі высокую хуткасць метабалічнага абароту.
- (2)Метабалізм лекаў у асноўным залежыць ад гепатацытаўCYP450ферментатыўнай сістэмы, і яе актыўнасць можна вымераць для лепшага вывучэння.
TheIPHASE-HepatoMax™ іIPHASE-HepatoCon™ сістэмы маюць добрую прымяняльнасць.
IPHASE наладзіў чатыры катэгорыі кантролю асяроддзя (без клетак), HepatoMax™, HepatoCon™ і стромальных клетак. Выкарыстанне асноўнага чалавека, які прытрымліваецца сцяныгепатацытаўs у якасці прыкладу, метабаліт павялічвае значэнняCYP1A2, CYP2B6іCYP3A4былі правераны на 0, 3 і 7 дзень паслягепатацытаўаднаўленне на працягу 3 дзён з выкарыстаннем финастерида, бупропиона і мидазолама ў якасці субстратаў адпаведна. Значэнні павышэння метабалітаў паказалі, што абодваIPHASE-HepatoMax™ іIPHASE-HepatoCon™ сістэмы паказалі актыўную ферментную актыўнасць на 7-ы дзень, пастаянна спрыяючы нармальнаму метабалізму лекаў.
- (3) У дадатак да праверкі актыўнасці ферментаў, добрая метабалічная стабільнасць таксама з'яўляецца важным і незаменным крокам у праверцы прыдатнасці мадэляў in vitro.
IPHASE стварыла тры катэгорыі HepatoMax™, HepatoCon™ і стромальных клетак для вызначэння метабалічнай стабільнасці толбутимида на працягу 80 гадзін, выкарыстоўваючы ў якасці прыкладу адгезійныя першасныя гепатацыты чалавека, якія ўводзілі праз 3 дні пасля рэанімацыі першасныхгепатацытаўs, і вынікі паказалі, што абодваIPHASE-HepatoMax™ іIPHASE-HepatoCon™ абедзве сістэмы паказалі надзейную метабалічную клірансную актыўнасць на працягу самага доўгага значэння часу аналізу.
Такім чынам, IPHASE, як лідэр у галіне in vitro біярэагентаў, развіўсяIPHASE HepatoMax™ іIPHASE HepatoCon™ in vitro мадэлі, заснаваныя на насценных-прыкладных першасных чалавеках, малпах, сабаках, пацуках і мышахгепатацытаўі стромальных клетак розных родаў, з выдатным метабалічным абаротам, актыўнай ферментнай дзейнасцю і магутным метабалічным ачышчэннем, што прапануе нашым кліентам новыя магчымасці для распрацоўкі лекаў з нізкім клірэнсам і з'яўляецца незаменным партнёрам у рэалізацыі адкрыцця лекаў! TheIPHASE HepatoMax™ іIPHASE HepatoCon™ Мадэлі in vitro забяспечваюць выдатную хуткасць абмену рэчываў, актыўную дзейнасць ферментаў і моцную метабалічную дзейнасць, забяспечваючы кліентам новыя магчымасці для распрацоўкі лекаў з нізкім клірэнсам, і з'яўляюцца важным партнёрам у адкрыцці лекаў!
Даведка:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S і інш. Новы рэлейны метад для вызначэння нізкіх-значэнняў зазору [J]. Метабалізм і распаўсюд наркотыкаў, 2012, 40 (9): 1860-1865.
Час размяшчэння: 2024-07-19 17:20:41