Siccomu l'attività di l'enzima metabolizzante di a droga diminuisce gradualmente cù a prolongazione di u tempu d'incubazione in vitro, i mudelli tradiziunali di metabolismu in vitro anu limitazioni cum'è u tempu d'incubazione brevi, una cunversione metabolica bassa è un limitu più bassu di rilevazione (u limitu minimu quantitativo di l'analisi CLint hè di 2,5 μL /(min·106 cellule)), chì ùn ponu micca predichendu cù precisione CLint di droghe metabolizzate lentamente.[1]. Intantu,epatocitis anu più enzimi necessarii per l'ossidazione, a riduzzione, l'idrolisi è e reazioni di dimerizazione cumparatu cùmicrosomi di fegato, è in sistemi in vitro, parechji mudelli novi tendenu à esse ottimizzati basatu annantu à uepatociti sistema è ancu imitanu l'ambiente in vivo per allargà a ritenzione di l'attività enzimatica inepatocitis, è a prolongazione di u tempu d'incubazione furnisce a pussibilità di monitorà a trasfurmazioni metaboliche sufficienti di droghe metabolizing lente.[1,2].
In vista di questu, IPHASE, cum'è un capu in reagenti biologichi per a ricerca in vitro, hà pionnieru u Sistema HepatoMax™ è u Sistema HepatoCon™ Media basatu annantu à u studiu di epatociti primari aderenti è cellule stromali di vari generi, cumpresi umani, scimmie, cani, ratti è mouse, ecc.epatocitis cum'è un esempiu, è i dui sistemi sò stati stallati per a determinazione di l'attività è a stabilità metabolica di i tipi di enzimi specifichi è l'aumentu di u valore di risposta di metabolites di a droga tolbutamide à 10 ghjorni è 7 ghjorni per verificà i sistemi. U metabolismu aumenta u valore di risposta à i ghjorni 10 è l'attività è a stabilità metabolica di tipi di enzimi specifichi à 7 ghjorni sò stati determinati per validà i sistemi.
- (1) I dui prucessi di cultura sistematica di validazione di droga sò i seguenti:
IPHASE-HepatoMax™hè un sistema di co-cultura di epatociti umani primari congelati è cellule stromali. L'hepatociti umani primari sò stati risuscitati è incubati cù cellule stromali in HepatoP™ medium per 3 ghjorni per inizià l'analisi di l'amministrazione di a droga, è u metabolismu di a droga hè stata realizata in serum-free HepatoDo™ medium, chì hè stata rifornita solu cù a droga senza cambià u mediu. Un totale di 4, 72, 168 è 240 ore dopu l'amministrazione di droga, u valore aghjuntu di i metaboliti di droga hè statu determinatu per l'analisi.
IPHASE-HepatoCon™, invece, hè un sistema per cultivà epatociti umani primari aderenti congelati in u mediu HepatoCon™. Dopu avè risuscitatu l'omu primariuepatocitis, l'analisi di l'amministrazione di a droga hè stata realizata dopu à 3 ghjorni di cultura in u mediu HepatoCon™ solu, è u tempu sussegwente di l'amministrazione, u sistema di cultura è a metodulugia di l'analisi eranu listessi di quelli di u sistema HepatoMax™.
Intantu, per assicurà a precisione è a rigore di i risultati, IPHASE hà realizatu un cuntrollu mediu (cell-free) è un cuntrollu di cellule stromali à u stessu tempu, cù trè replicazioni, è i risultati anu dimustratu chì uIPHASE-HepatoMax™ èIPHASE-HepatoCon™ sistemi pruduciutu una forte risposta metabolite piccu da u ghjornu 3 in avanti, è ch'elli tramindui dimustratu un forte turnover metabolic rate.
- (2) U metabolismu di a droga dipende principalmente da l'hepatocyteCYP 450sistema enzyme, è a so attività pò esse misurata à esaminà megliu.
UIPHASE-HepatoMax™ èIPHASE-HepatoCon™ i sistemi anu una bona applicabilità.
IPHASE hà stabilitu quattru categurie di cuntrollu mediu (senza cellule), HepatoMax™, HepatoCon™ è cellule stromali. Utilizendu u muru - umanu primariu aderenteepatocitis comu un esempiu, u metabolite cresce valori diCYP1A2, CYP2B6èCYP3A4sò stati verificati à u ghjornu 0, 3 è 7 dopuepatocitiricuperazione per 3 ghjorni cù finasteride, bupropion è midazolam cum'è sustrati, rispettivamente. I valori di crescita di metabolite dimustravanu chì i duiIPHASE-HepatoMax™ èIPHASE-HepatoCon™ i sistemi dimustravanu l'attività enzimatica attiva da u ghjornu 7, chì prumove in modu coerente u metabolismu normale di a droga.
- (3) In più di a validazione di l'attività enzimatica, una bona stabilità metabolica hè ancu un passu impurtante è indispensabile in a validazione di l'utilità di mudelli in vitro.
IPHASE hà stabilitu trè categurie di HepatoMax™, HepatoCon™ è cellule stromali per determinà a stabilità metabolica di Tolbutimide per un periudu di 80 ore utilizendu epatociti umani primari aderenti cum'è un esempiu, chì sò stati amministrati 3 ghjorni dopu a risuscitazione di u primariu.epatocitis, è i risultati hà dimustratu chì i duiIPHASE-HepatoMax™ èIPHASE-HepatoCon™ I dui sistemi anu mostratu una robusta attività di clearance metabolica in u valore più longu di u tempu di analisi.
In sintesi, IPHASE, cum'è un capu in bio-reagenti in vitro, hà sviluppatuIPHASE HepatoMax™ èIPHASE HepatoCon™ mudelli in vitro basati nantu à u muru-applicatu primariu umanu, scimmia, canina, ratu è surciepatocitis è cellule stromali di varii generi, cù un eccellente turnover metabolicu, attività enzyme attivu è attività di clearance metabolica putenti, chì offrenu novi scelte per i nostri clienti per sviluppà droghe low-clearance, è sò un cumpagnu indispensabile per realizà a scuperta di droga! UIPHASE HepatoMax™ èIPHASE HepatoCon™ mudeli in vitro offrenu tassi di turnover metabolicu eccellenti, attività enzyme attivu è forti attività di clearance metabolica, chì furnisce novi opzioni per i clienti per sviluppà droghe low-clearance, è sò un cumpagnu impurtante in a scuperta di droga!
Riferimentu:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019 (2): 152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, et al. Un novu metudu di relay per determinà i valori di clearance [J]. Metabolismo di droga è dispusizione, 2012, 40 (9): 1860-1865.
Postu tempu: 2024-07-19 17:20:41