Meqenëse aktivitetet e enzimës metabolizuese të barnave zvogëlohen gradualisht me zgjatjen e kohës së inkubacionit in vitro, modelet tradicionale të metabolizmit in vitro kanë kufizime të tilla si koha e shkurtër e inkubacionit, konvertimi i ulët metabolik dhe kufiri i poshtëm i lartë i zbulimit (kufiri i poshtëm sasior i analizës CLint është 2.5 μL / (min·106 qeliza)), të cilat nuk mund të parashikojnë me saktësi drogën e metabolizuar të qelizave të ngadalta.[1]. Ndërkohë,hepatocits kanë më shumë enzima të nevojshme për reaksionet e oksidimit, reduktimit, hidrolizës dhe dimerizimit në krahasim memikrozomet e mëlçisë, dhe sistemet in vitro, shumë modele të reja priren të optimizohen bazuar nëhepatocit sistem dhe më tej imitoni mjedisin in vivo për të zgjatur mbajtjen e aktivitetit enzimë nëhepatocits, dhe zgjatja e kohës së inkubacionit ofron mundësinë për të monitoruar transformimin e mjaftueshëm metabolik të barnave që metabolizohen ngadalë.[1,2].
Duke pasur parasysh këtë, IPHASE, si një lider në reagentët biologjikë për kërkime in vitro, ka krijuar si pionier Sistemin HepatoMax™ dhe Sistemin Mediatik HepatoCon™ bazuar në studimin e hepatociteve parësore dhe qelizave stromale të gjinive të ndryshme, duke përfshirë njeriun, majmunin, qenin, miun dhe miun, etj.hepatocits si shembull, dhe të dy sistemet u krijuan për përcaktimin e aktivitetit dhe stabilitetit metabolik të llojeve specifike të enzimave dhe rritjen e vlerës së përgjigjes së metabolitëve të barit tolbutamide në 10 ditë dhe 7 ditë për të verifikuar sistemet. Metaboliti rrit vlerën e përgjigjes në 10 ditë dhe aktiviteti dhe stabiliteti metabolik i llojeve specifike të enzimave në 7 ditë u përcaktuan për të vërtetuar sistemet.
- (1) Dy proceset sistematike të kulturës së vlefshmërisë së barnave janë si më poshtë:
IPHASE-HepatoMax™është një sistem bashkëkulturor i hepatociteve primare të njeriut me mure të ngrira dhe qelizave stromale. Hepatocitet primare të njeriut u ringjallën dhe u inkubuan me qeliza stromale në mjedisin HepatoP™ për 3 ditë për të filluar analizën e administrimit të barit dhe metabolizmi i ilaçit u krye në medium HepatoDo™ pa serum, i cili u plotësua vetëm me ilaçin pa ndryshuar mediumin. Gjithsej 4, 72, 168 dhe 240 orë pas administrimit të barit, vlera e shtuar e metabolitëve të barit është përcaktuar për analizë.
IPHASE-HepatoCon™, nga ana tjetër, është një sistem për kultivimin e hepatociteve primare njerëzore ngjitëse të ngrira në mjedisin HepatoCon™. Pas ringjalljes së njeriut primarhepatocits, analiza e administrimit të barit u krye pas 3 ditësh kulture vetëm në medium HepatoCon™ dhe koha pasuese e administrimit, sistemi i kulturës dhe metodologjia e analizës ishin të njëjta me ato të sistemit HepatoMax™.
Ndërkohë, për të siguruar saktësinë dhe ashpërsinë e rezultateve, IPHASE kreu një kontroll mesatar (pa qelizë) dhe një kontroll të qelizave stromale në të njëjtën kohë, me tre përsëritje, dhe rezultatet treguan seIPHASE-HepatoMax™ dheIPHASE-HepatoCon™ sistemet prodhuan një përgjigje të fortë kulmore të metabolitit që nga dita e 3-të e tutje, dhe që të dy treguan një shkallë të fortë të qarkullimit metabolik.
- (2) Metabolizmi i barnave varet kryesisht nga hepatociti450 CYPsistemi enzimë, dhe aktiviteti i tij mund të matet për të ekzaminuar më mirë.
TëIPHASE-HepatoMax™ dheIPHASE-HepatoCon™ sistemet kanë zbatueshmëri të mirë.
IPHASE krijoi katër kategori të kontrollit të mesëm (pa qeliza), HepatoMax™, HepatoCon™ dhe qeliza stromale. Përdorimi i murit-ngjitës të njeriut primarhepatocits si shembull, metaboliti rrit vlerat eCYP1A2, CYP2B6dheCYP3A4u verifikuan në ditën 0, 3 dhe 7 pashepatocitrikuperim për 3 ditë duke përdorur përkatësisht finasteride, bupropion dhe midazolam si substrate. Vlerat e rritjes së metabolitit treguan se të dyjaIPHASE-HepatoMax™ dheIPHASE-HepatoCon™ sistemet treguan aktivitet aktiv enzimë deri në ditën e 7-të, duke promovuar vazhdimisht metabolizmin normal të barit.
- (3) Përveç vërtetimit të aktivitetit të enzimës, stabiliteti i mirë metabolik është gjithashtu një hap i rëndësishëm dhe i domosdoshëm në vërtetimin e dobisë së modeleve in vitro.
IPHASE krijoi tre kategori të qelizave HepatoMax™, HepatoCon™ dhe stromale për të përcaktuar stabilitetin metabolik të Tolbutimidit për një periudhë prej 80 orësh duke përdorur si shembull hepatocitet primare njerëzore ngjitëse, të cilat u administruan 3 ditë pas ringjalljes së parë.hepatocits, dhe rezultatet treguan se të dyjaIPHASE-HepatoMax™ dheIPHASE-HepatoCon™ Të dy sistemet treguan aktivitet të fortë të pastrimit metabolik brenda vlerës më të gjatë të kohës së analizës.
Në përmbledhje, IPHASE, si një lider në bio-reagentët in vitro, është zhvilluarIPHASE HepatoMax™ dheIPHASE HepatoCon™ modele in vitro të bazuara në mur-të aplikuara primar njeriu, majmuni, qeni, miu dhe miuhepatocits dhe qelizat stromale të gjinive të ndryshme, me qarkullim të shkëlqyer metabolik, aktivitete enzimatike aktive dhe aktivitete të fuqishme të pastrimit metabolik, të cilat ofrojnë zgjedhje të reja për klientët tanë për të zhvilluar barna me pastrim të ulët dhe janë një partner i domosdoshëm për të realizuar zbulimin e barnave! TëIPHASE HepatoMax™ dheIPHASE HepatoCon™ Modelet in vitro ofrojnë norma të shkëlqyera të qarkullimit metabolik, aktivitete aktive enzimë dhe aktivitete të forta të pastrimit metabolik, duke ofruar mundësi të reja për klientët për të zhvilluar barna me pastrim të ulët dhe janë një partner i rëndësishëm në zbulimin e barnave!
Referenca:
[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2): 152-160.
[2] Di L, Trapa P, Obach R S, etj. Një metodë e re rele për përcaktimin e vlerave të ulëta të pastrimit[J]. Metabolizmi dhe disponimi i drogës, 2012, 40 (9): 1860-1865.
Koha e postimit: 2024-07-19 17:20:41