Ang nobela sa vitro hepatocyte metabolism nga modelo nagpadali sa hinay nga metabolismo sa mga pagtuon sa pharmacokinetic

Tungod kay ang drug metabolizing enzyme nga mga kalihokan anam-anam nga mikunhod uban sa pagpalugway sa in vitro incubation nga panahon, ang tradisyonal nga in vitro metabolism nga mga modelo adunay mga limitasyon sama sa mubo nga panahon sa paglumlum, ubos nga metaboliko nga pagkakabig ug taas nga ubos nga limitasyon sa detection (ang quantitative ubos nga limitasyon sa CLint assay mao ang 2.5 μL / (min · 106 nga mga selula)), nga dili tukma nga makatagna sa CLint sa mga droga.^[1]. Samtang,hepatocytes adunay mas daghang mga enzyme nga gikinahanglan alang sa oksihenasyon, pagkunhod, hydrolysis ug dimerization reaksyon itandi samicrosome sa atay, ug sa mga sistema sa in vitro, daghang mga bag-ong modelo ang lagmit nga ma-optimize base sahepatocyte sistema ug dugang nga pagsundog sa in vivo nga palibot aron mapalugwayan ang pagpabilin sa kalihokan sa enzyme sahepatocytes, ug ang pagpalugway sa panahon sa paglumlum naghatag posibilidad sa pag-monitor sa igo nga pagbag-o sa metaboliko sa hinay nga metabolizing nga mga tambal^[1,2].

Tungod niini, ang IPHASE, isip usa ka lider sa mga biolohikal nga reagents alang sa in vitro nga panukiduki, nagpayunir sa HepatoMax ™ System ug HepatoCon ™ Media System base sa pagtuon sa adherent primary hepatocytes ug stromal cells sa nagkalain-laing genera, lakip ang tawo, unggoy, canine, ilaga, ug mouse, ug uban pa.hepatocytes ingon nga usa ka panig-ingnan, ug ang duha nga mga sistema gipahimutang alang sa pagtino sa kalihokan ug kalig-on sa metaboliko sa piho nga mga tipo sa enzyme ug ang pagtaas sa kantidad sa tubag sa mga metabolite sa tambal nga tolbutamide sa 10 ka adlaw ug 7 ka adlaw aron masusi ang mga sistema. Ang pagtaas sa metabolite nga kantidad sa tubag sa 10 nga mga adlaw ug ang kalihokan ug kalig-on sa metaboliko sa mga piho nga tipo sa enzyme sa 7 nga mga adlaw determinado aron ma-validate ang mga sistema.

• (1) Ang duha ka sistematikong proseso sa kultura sa validation sa tambal mao ang mosunod:

  IPHASE-HepatoMax™maoy usa ka co-kultura nga sistema sa frozen walled primary human hepatocytes ug stromal cells. Ang panguna nga mga hepatocyte sa tawo gi-resuscitate ug gi-incubate sa stromal cells sa HepatoP™ medium sulod sa 3 ka adlaw aron masugdan ang drug administration assay, ug ang metabolismo sa tambal gihimo sa serum-free HepatoDo™ medium, nga gipuno lamang sa tambal nga wala’y pagbag-o sa medium. Usa ka kinatibuk-an nga 4, 72, 168 ug 240 ka oras pagkahuman sa administrasyon sa droga, ang kantidad nga gidugang sa mga metabolite sa tambal gitino alang sa pagtuki.

 

  IPHASE-HepatoCon™, sa laing bahin, usa ka sistema alang sa pag-kultura sa frozen adherent primary human hepatocytes sa HepatoCon™ medium. Human ma-resuscitate ang nag-unang tawohepatocytes, ang drug administration assay gihimo human sa 3 ka adlaw nga kultura sa HepatoCon™ medium nga nag-inusara, ug ang sunod nga panahon sa administrasyon, ang kultura nga sistema ug ang assay methodology parehas ra sa HepatoMax™ system.

 

Samtang, aron masiguro ang katukma ug kalig-on sa mga resulta, ang IPHASE nagpahigayon usa ka medium nga kontrol (cell - libre) ug usa ka stromal cell control sa parehas nga oras, nga adunay tulo nga mga replikasyon, ug ang mga resulta nagpakita nga angIPHASE-HepatoMax™ ugIPHASE-HepatoCon™ Ang mga sistema nagpatunghag kusog nga tubag sa metabolite nga peak gikan sa adlaw nga 3 hangtod sa unahan, ug nga silang duha nagpakita usa ka kusog nga metabolic turnover rate.

 

 

• (2) Ang metabolismo sa tambal nag-una nagdepende sa hepatocyteCYP450enzyme system, ug ang kalihokan niini mahimong masukod aron mas maayo nga masusi.

AngIPHASE-HepatoMax™ ugIPHASE-HepatoCon™ Ang mga sistema adunay maayo nga aplikasyon.

Ang IPHASE nagbutang ug upat ka kategorya sa medium control (walay mga cell), HepatoMax™, HepatoCon™ ug stromal cells. Paggamit sa dingding-adherent primary humanhepatocytes isip usa ka pananglitan, ang metabolite nagdugang sa mga kantidad saCYP1A2, CYP2B6ugCYP3A4gipamatud-an sa adlaw nga 0, 3 ug 7 pagkahumanhepatocytepagkaayo alang sa 3 ka adlaw sa paggamit sa finasteride, bupropion ug midazolam ingon nga substrates, sa tinagsa. Metabolite pagtaas sa mga bili nagpakita nga ang duhaIPHASE-HepatoMax™ ugIPHASE-HepatoCon™ Ang mga sistema nagpakita sa aktibo nga kalihokan sa enzyme sa adlaw nga 7, kanunay nga nagpasiugda sa normal nga metabolismo sa droga.

 

• (3) Dugang sa pag-validate sa kalihokan sa enzyme, ang maayo nga metabolic stability usa usab ka importante ug kinahanglanon nga lakang sa pag-validate sa gamit sa mga in vitro nga mga modelo.

Ang IPHASE nagbutang ug tulo ka mga kategorya sa HepatoMax™, HepatoCon™ ug stromal cells aron mahibal-an ang metabolic stability sa Tolbutimide sulod sa 80 ka oras gamit ang adherent primary human hepatocytes isip pananglitan, nga gihatag 3 ka adlaw human sa resuscitation sa primary.hepatocytes, ug ang mga resulta nagpakita nga ang duhaIPHASE-HepatoMax™ ugIPHASE-HepatoCon™ Ang mga sistema pareho nga nagpakita sa lig-on nga metabolic clearance nga kalihokan sulod sa pinakataas nga kantidad sa panahon sa pagsulay.

 

Sa katingbanan, ang IPHASE, isip usa ka lider sa in vitro bio-reagents, naugmadIPHASE HepatoMax™ ugIPHASE HepatoCon™ in vitro nga mga modelo base sa wall-apply primary human, unggoy, canine, ilaga ug mousehepatocytes ug stromal cells sa lain-laing genera, nga adunay maayo kaayo nga metabolic turnover, aktibo nga enzyme nga mga kalihokan ug gamhanan nga metabolic clearance nga mga kalihokan, nga nagtanyag og bag-ong mga pagpili alang sa among mga kustomer sa pagpalambo og ubos nga clearance nga mga tambal, ug usa ka kinahanglanon nga kauban aron makaamgo sa pagkadiskobre sa droga! AngIPHASE HepatoMax™ ugIPHASE HepatoCon™ Ang in vitro nga mga modelo nagtanyag og maayo kaayo nga metabolic turnover rates, aktibo nga enzyme nga mga kalihokan ug kusog nga metabolic clearance nga mga kalihokan, naghatag og bag-ong mga kapilian alang sa mga kustomer sa pagpalambo sa ubos nga clearance nga mga tambal, ug usa ka importante nga kauban sa pagdiskobre sa droga!

 

Reperensya:

[1]阮婷婷,鞠武建,熊海伟,等.低清除率药物的代谢稳定性预测模型研究进展[J].中国药科大学学报, 2019(2):152-160.

[2] Di L, Trapa P, Obach RS, ug uban pa. Usa ka bag-ong pamaagi sa relay alang sa pagtino sa ubos nga mga kantidad sa clearance [J]. Ang metabolismo ug disposisyon sa droga, 2012, 40(9): 1860-1865.